Efek hepatoprotektif jangka panjang ekstrak metanol-air biji persea americana mill. terhadap aktivitas alt-ast serum pada tikus jantan wistar terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository

Gratis

0
0
153
3 months ago
Preview
Full text

  

EFEK HEPATOPROTEKTIF JANGKA PANJANG EKSTRAK

METANOL-AIR BIJI Persea americana Mill. TERHADAP AKTIVITAS

ALT-AST SERUM PADA TIKUS JANTAN WISTAR TERINDUKSI

KARBON TETRAKLORIDA

  

Skripsi

  Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.)

  Program Studi Farmasi Diajukan Oleh:

  Robert Dwijantara Putra NIM : 108114069

  

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

HALAMAN PERSEMBAHAN

  

Cukuplah kasih karunia-Ku bagimu, sebab justru dalam kelemahanlah kuasa-Ku

menjadi sempurna (2 Korintus 12:9 ).

  BERKAT...tidak selalu berupa emas, intan permata atau uang yang banyak, bukan pula saat kita tinggal di rumah mewah dan pergi bermobil.. Namun BERKAT adalah saat kita kuat dalam keadaan putus asa dan tetap BERSYUKUR saat tak punya apa-apa...

  

KEBAIKAN yg kita lakukan mungkin saja sudah DILUPAKAN orang,tapi

bagaimanapun BERBUAT BAIKlah,bagaimanapun BERIKAN yg TERBAIK dr diri kita.

Pada akhirnya kita tahu bahwa ini adalah urusan antara kita dengan TUHAN kita

dan ini bukan urusan antara kita dan mereka (MOTHER THERESA)

  Kupersembahkan karyaku ini untuk : Tuhan Yesusku, Bapa yang selalu menopangku saat ku tak mampu dan mengangkatku saat kuterjatuh yang senantiasa memberiku kekuatan.

  Papa, mama, kakak dan adik-adikku untuk doa dan perhatiannya.

  Teman-teman yang telah hadir dan memberi semangat.

  PRAKATA Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala berkat kasih karunia dan atas segala perlindungan yang telah diberikan sehingga skripsi berjudul “EFEK HEPATOPROTEKTIF JANGKA PANJANG

  

EKSTRAK METANOL-AIR BIJI Persea Americana MILL. TERHADAP

AKTIVITAS ALT-AST SERUM PADA TIKUS JANTAN WISTAR

TERINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA

  ” yang disusun untuk memenuhi persyaratan memperoleh gelar Sarjana Strata Satu Program Studi Farmasi (S.

  Farm) dapat dikerjakan dengan baik dan lancar.

  Penulis menyadari bahwa dalam pelaksanaan dan penyusunan skripsi ini tidak terlepas dari bantuan dan campur tangan berbagai pihak. Oleh karena itu pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada :

  1. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph. D., Apt. Selaku Dosen Pembimbing skripsi atas segala kesabaran dalam membimbing, memberikan masukan dan motivasi kepada penulis selama penelitian dan penyusunan skripsi ini.

2. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dosen Penguji skripsi atas bantuan dan masukkan selama penyusunan skripsi.

  3. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., selaku Dosen Penguji skripsi atas bantuan dan masukkan selama penyusunan skripsi dan yang telah memberikan bantuan dalam determinasi serbuk tanaman biji Persea americana Mill.

  4. Ibu Rini Dwiastuti, M.Si., Apt. selaku Kepala Laboratorium Fakultas Farmasi yang telah memberikan ijin dalam penggunaan semua fasilitas laboratorium untuk kepentingan penelitian ini.

  5. Pak Heru, Pak Suparjiman, Pak Kayatno, Dokter Ari, Pak Ratijo, dan Pak Wagiran selaku Staff Laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah membantu penulis dalam pengerjaan penelitian di laboratorium.

  6. Segenap dosen dan karyawan atas ilmu yang diberikan.

  7. Keluargaku terkasih, Bapak Budi Kasno, Mama Nastiti Handayani, Henry Budi Saputra, Rio Bryantara Putra dan Nina Fiona Putri yang memberikan doa, kasih sayang dan semangat kepada penulis.

  8. Teman- teman “tim Persea americana Mill.”, Cilla, Dian, Lidya, Ike Kum, Ike Kiting, Dion, Yudhita, Iren, Angel, Dara, Ita, Ote, dan Ayu atas kerja sama, bantuan, suka duka, semangat, dan perjuangan dalam menyelesaikan skripsi sampai akhir.

  9. Liana Risha Gunawan yang selalu mendukung penulis dalam suka dan duka dalam pembuatan skripsi ini.

  10. Teman-teman FST dan FKK 2010 yang selalu mengisi hari-hari dan memberikan semangat kepada penulis dalam pembuatan skripsi ini.

  11. Seluruh teman, baik di Fakultas Farmasi maupun teman-teman lain atas dukungannya dan semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu sehingga penulis dapat menyelesaikan tugas akhir ini dengan baik.

  Penulis menyadari bahwa tugas akhir ini belum sempurna dan masih banyak kekurangan sehingga penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun dari semua pihak demi kemajuan di masa yang akan datang.

  Akhir kata, penulis berharap semoga tugas akhir ini dapat bermanfaat bagi semua pihak serta memberikan sumbangan kecil bagi perkembangan ilmu pengetahuan khususnya di bidang ilmu kefarmasian.

  Yogyakarta, November 2013 Penulis

  

DAFTAR ISI

  HALAMAN JUDUL ..................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................ ii HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................... iii HALAMAN PERSEMBAHAN ................................................................... iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ....................................................... v LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA

  ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS .................................. vi PRAKATA ................................................................................................... vii DAFTAR ISI ................................................................................................ x DAFTAR TABEL ........................................................................................ xv DAFTAR GAMBAR ................................................................................... xvii DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................ xviii

  INTISARI .................................................................................................... xx .................................................................................................. xxi

  ABSTRACT

  BAB I. PENGANTAR ................................................................................ 1 A. Latar Belakang ...................................................................................... 1

  2. Keaslian penelitian ............................................................................ 4

  D. Karbon Tetraklorida ............................................................................... 13

  I. Landasan Teori ....................................................................................... 24 J. Hipotesis ................................................................................................. 26 B. Tujuan Penelitian ...................................................................................

  H. Ekstrak ................................................................................................... 22

  Plus .................................................................................. 20

  ®

  G. Sirup Curliv

  F. Kandungan Fitokimia Biji Persea americana Mill................................. 18

  E. Pemeriksaan Biokimiawi Hati ................................................................ 17

  2. Hepatotoksin tak teramalkan ............................................................ 12

  3. Manfaat penelitian ............................................................................. 5

  1. Hepatotoksin teramalkan ................................................................... 11

  C. Hepatotoksin .......................................................................................... 11

  4. Sirosis hati.......................................................................................... 11

  3. Kolestasis............................................................................................ 10

  2. Nekrosis hati....................................................................................... 10

  1. Perlemakan hati ................................................................................. 9

  BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA .......................................................... 7 A. Anatomi Dan Fisiologi Hati.................................................................... 7 B. Kerusakan Pada Hati............................................................................... 9

  2. Tujuan khusus ................................................................................... 6

  1. Tujuan umum ....................................................................................

  BAB III. METODE PENELITIAN ................................................................ 27 A. Jenis Dan Rancangan Penelitian .............................................................. 27 B. Variabel Dan Definisi Operasional ......................................................... 27

  1. Variabel utama ................................................................................... 27

  2. Variabel pengacau terkendali ............................................................. 27

  3. Variabel pengacau tak terkendali ........................................................ 28

  4. Definisi operasional ............................................................................ 28

  C. Subyek Dan Bahan Penelitian .................................................................. 29

  1. Subyek penelitian ................................................................................ 29

  2. Bahan penelitian .................................................................................. 29

  D. Alat Dan Instrumen Penelitian ................................................................. 30

  E. Tata Cara Penelitian ................................................................................. 31

  1. Determinasi serbuk tanaman Persea americana Mill.......................... 31

  2. Pengumpulan bahan ............................................................................. 31

  3. Pembuatan serbuk ................................................................................ 31

  4. Pembuatan ekstrak metanol biji Persea americana Mill...................... 32

  5. Pembuatan larutan Natrium - Carboxy Methyl Cellulos a (CMC-Na) 1% ......................................................................................................... 32

  6. Pembuatan suspensi ekstrak metanol – air Persea americana Mill. dalam CMC-Na 1 % ............................................................................. 33

  7. Pembuatan larutan karbon tetraklorida (CCl

  4 ) konsentrasi 50% .......... 33

  8. Penetapan kadar air serbuk biji Persea americana Mill. ...................... 33

  10. Uji pendahuluan ................................................................................ 34

  11. Pengelompokan dan perlakuan hewan uji ........................................ 35

  12. Pembuatan serum .............................................................................. 36

  13. Penetapan aktivitas serum ALT dan serum AST .............................. 36

  F. Tata Cara Analisis Hasil ........................................................................ 37

  BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ....................................................... 38 A. Penyiapan Bahan ..................................................................................... 38

  1. Determinasi serbuk ............................................................................. 38

  2. Penetapan kadar air serbuk biji Persea americana Mill..................... 39

  3. Hasil penimbangan bobot ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill....................................................................................................... 39

  B. Uji Pendahuluan ....................................................................................... 40

  1. Penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida .............................. 40

  2. Penentuan waktu pencuplikan darah hewan uji .................................. 41

  3. Penetapan lama pemejanan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. ...................................................................................................... 44

  4. Penetapan dosis ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill.......... 45

  C. Hasil Uji Efek Hepatoprotektif Pemberian Ekstrak Metanol-Air Biji

  Persea americana Mill. ............................................................................ 45

  1. Kontrol negatif olive oil dosis 2 ml/kgBB ........................................... 50

  2. Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ................ 53

  3. Kontrol ekstrak metanol - air biji Persea americana Mill. dosis

  4. Kontrol positif curliv® dosis 4,05 ml/kgBB ........................................ 55 5. Kelompok perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 350; 700 dan 1400 mg/kgBB pada tikus jantan galur wistar terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB .................................. 56

  D. Rangkuman Pembahasan .......................................................................... 61

  BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................... 64 A. Kesimpulan ............................................................................................... 64 B. Saran ......................................................................................................... 64 DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 65 LAMPIRAN .................................................................................................... 69 BIOGRAFI PENULIS .................................................................................... 132

  DAFTAR TABEL Tabel I. Peningkatan aktivitas enzim serum akibat induksi senyawa toksik ....................................................................................... 17 Tabel II. Kandungan fitokimia dari Persea americana pada daun, buah dan biji ....................................................................... ................ 19 Tabel III. Rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 ............................... 41

  Tabel IV. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 ....................................... 42

  Tabel V. Rata-rata aktivitas serum AST tikus setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 .............................. 43

  Tabel VI. Hasil uji Scheffe aktivitas serum AST tikus setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 ....................................... 44

  Tabel VII. Purata ± SE aktivitas ALT dan AST tikus praperlakuan ekstrak metanol

  • – air biji Persea americana Mill. terinduksi

  karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ..................................... 46 Tabel VIII. Hasil uji statistik uji Man Whitney aktivitas ALT tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada kelompok perlakuan .................................................... 47

  Tabel IX. Hasil uji statistik uji Scheffe aktivitas AST tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada kelompok perlakuan ............................................................. 49

  Tabel X. Perbandingan kontrol olive oil jam ke-0 dan jam ke-24 pada serum ALT dan serum AST tikus ............................... 51 Tabel XI. Hasil penetapan kadar air serbuk biji Persea americana

  Mill. ...................................................................................... 129 Tabel XII. Hasil rendemen ekstrak metanol-air biji Persea americana

  Mill. ..................................................................................... 129 Tabel XIII. Bobot pengeringan ekstrak metanol - air biji Persea

  americana Mill. .................................................................. 130

  Tabel XIV. Hasil validitas dan reabilitas pengukuran ALT .................. 130 Tabel XV. Hasil validitas dan reabilitas pengukuran AST .................. 131

  DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Mekanisme biotransformasi dan oksidasi karbon tetraklorida 15 Gambar 2. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 ... 41

  Gambar 3. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 ... 43

  Gambar 4. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus pra- perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill 1 x sehari selama 6 hari terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB ............................................................................. 48

  Gambar 5. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus pra- perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill 1 x sehari selama 6 hari terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB ............................................................................ 50

  Gambar 6. Diagram batang rata-rata perbandingan serum ALT kontrol

  olive oil jam ke-0 dan kontrol olive oil jam ke-24 .............. 51

  Gambar 7. Diagram batang rata-rata perbandingan serum AST kontrol

  olive oil jam ke-0 dan kontrol olive oil jam ke-24 ................ 52

  DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Foto serbuk biji Persea americana Mill. ................................. 70 Lampiran 2. Foto ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. ............. 70 Lampiran 3. Foto suspensi ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dalam CMC-Na 1% .................................................................. 70

  Lampiran 4. Sirup Curliv Plus

  ®

  .................................................................... 71 Lampiran 5. Surat pengesahan determinasi serbuk biji Persea americana

  Mill. .......................................................................................... 72 Lampiran 6. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics

  Committee (MHREC) .............................................................. 73 Lampiran 7. Analisis statistik aktivitas serum ALT dan AST pada uji pendahuluan penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ....................................................................... 74

  Lampiran 8. Analisis statistik aktivitas serum ALT perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ................................................... 83

  Lampiran 9. Analisis statistik serum AST perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB ...................................................................... 102

  Lampiran 10. Analisis statistik aktivitas serum ALT dan serum AST

  Lampiran 11. Perhitungan efek hepatoprotektif ........................................... 126 Lampiran 12. Perhitungan daya hepatoprotektif ekstrak metanol biji

  Persea americana Mill. dibandingkan dengan kontrol ®

  positif Curliv ....................................................................... 126 Lampiran 13. Perhitungan penetapan peringkat dosis ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. kelompok perlakuan ................. 127 Lampiran 14. Perhitungan konversi dosis untuk manusia ........................... 128 Lampiran 15. Perhitungan konversi hari untuk manusia ............................. 128 Lampiran 16. Penetapan kadar air serbuk biji Persea americana Mill. ....... 129 Lampiran 17. Hasil rendemen ekstrak metanol-air biji Persea americana

  Mill. ....................................................................................... 129 Lampiran 18. Bobot pengeringan ekstrak metanol-air biji Persea americana

  Mill. ......................................................................................... 130 Lampiran 19. Hasil pengukuran validitas dan reabilitas ............................... 130

  

INTISARI

  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek hepatoprotektif ekstrak metanol biji alpukat (Persea americana Mill.) pada tikus jantan terinduksi CCl

  4

  dengan cara menurunkan aktivitas serum Alanine Aminotransferase (ALT) dan Aspartate Aminotransferase (AST) dan untuk mengetahui berapa dosis optimum ekstrak metanol biji alpukat untuk menimbulkan efek hepatoprotektif pada tikus jantan terinduksi CCl 4 .

  Penelitian ini bersifat eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. Penelitian ini menggunakan tikus jantan galur Wistar, umur 2-3 bulan dan berat ± 150-250 gram dibagi secara acak ke dalam tujuh kelompok perlakuan. Kelompok 1 (kontrol hepatotoksin) diberi CCl

  4 2 ml/kgBB. Kelompok II (kontrol

  negatif) diberi Olive Oil. Kelompok III (kontrol ekstrak) diberi esktrak metanol

  ®

  biji alpukat dosis 1.400 mg/kgBB, Kelompok IV (kontrol positif) diberi Curliv 4,05 ml/kgBB, Kelompok V-VII (perlakuan) ekstrak metanol biji alpukat dosis 1400; 700; dan 350 mg/kgBB sekali sehari selama 6 hari berturut-turut kemudian pada hari ke tujuh semua kelompok perlakuan diberi larutan CCl

  4 dosis 2

  ml/kgBB. Pada jam ke 24 sesudahnya darah diambil dari sinus orbitalis mata untuk ditetapkan aktivitas ALT-AST serum. Data ALT-AST serum yang didapat dianalisis untuk mengetahui perbedaan aktivitas ALT-AST serum antar kelompok.

  Hasil penelitian menunjukkan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. memberikan efek hepatoprotektif dengan menurunkan aktivitas serum ALT dan AST pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida. Ada kekerabatan dosis dengan respon yang muncul terlihat dari semakin besar dosis praperlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. yang diberikan, maka semakin besar efek hepatoprotektif. Jadi ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 1400; 700; dan 350 mg/kgBB memiliki efek hepatoprotektif berturut-turut 96,6; 87,2; dan 78,6%. Nilai dosis optimum hepatoprotektif ekstrak metanol-air biji Persea

  americana Mill. sebesar 1400 mg/kgBB.

  

Kata kunci : hepatoprotektif, ekstrak metanol biji buah alpukat (Persea

americana Mill.), CCl

  4 ABSTRACT This study aims to determine the hepatoprotective effect of methanol extract of avocado

  4

  ’s seed ( Persea americana Mill . ) in male rats induced CCl by decreasing the alanine aminotransferase (ALT ) and aspartate aminotransferase ( AST ) serum activity and to determine the optimum dose of methanol extract of avocado

  4 .

  ’s seed to give hepatoprotective effects in male rats induced CCl This research was experimentally pure with direct sampling design. This research used male Wistar rats, age 2-3 months and weight ± 150-250 g. The rats were divided into seven treatment groups randomly. Group 1 (hepatotoxins control) was given CCl

  4 2 ml/kgBW . Group II (negative control) was given Olive Oil . Group III (extracts control) was given methanol extract of avocado

  ’s seed at dose 1400 mg/kgBW, Group IV (positive control) was given Curliv ® at dose 4.05 ml/kgBW , group V - VII ( treatment ) were given methanol extract of avocado

  ’s seed at dose 1400 ; 700 , and 350 mg/kgBW. The extract was given once daily for 6 days and then on the seventh day, all treatment groups were given CCl

  4 at dose of 2 ml/kgBW. Twenty-four hours later, the blood was collected

  from the orbital sinus eye to be measured AST and ALT serum activity. ALT - AST data were analyzed statistically.

  Based of the results of the measurement, methanol - water extract of the seeds of Persea americana Mill. has hepatoprotective effect by decreasing the activity of ALT and AST serum in rats induced carbon tetrachloride . There was a relation between dose and response which was seen from higher dose of methanol

  • – water extract of the seeds of Persea americana Mill. given in pretreatment, will give higher hepatoprotective effect. Thus the methanol - water extract of seeds of

  

Persea americana Mill. at dose 1400 ; 700 ; and 350 mg/kgBW have

  hepatoprotective effects respectively 96.6 ; 87.2 , and 78.6 % and the optimum dose of methanol - water extract as hepatoprotector was 1400 mg/kgBW.

  Keyword : hepatoprotective, methanol- water extract of avocado’s seeds (Persea americana Mill.), CCl

  4

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Hati merupakan organ yang berperan penting dalam banyak proses

  metabolisme. Darah yang mengandung nutrisi dari saluran gastrointestinal terlebih dahulu melewati vena portal di hati, dimana nutrisi seperti karbohidrat, lemak dan vitamin dapat dipindahkan dan disimpan dalam jangka waktu tertentu hingga nutrisi tersebut dibutuhkan. Sel-sel hati mampu memetabolisme karbohidrat, lemak, dan protein. Hati mampu mensintesis dan mensekresi empedu, yang mengandung air, ion-ion, lemak-lemak (turunan kolesterol yang dikenal sebagai garam empedu) dan pigmen empedu seperti bilirubin (Stine dan Brown, 1996).

  Aneka penyakit pada hati termasuk penyakit yang paling serius yang dapat dikelompokkan menjadi hepatitis (penyakit radang pada hati) akut dan kronis, hepatosis (penyakit hati tanpa peradangan) dan sirosis (penyakit degeneratif menyebabkan fibrosa pada hati). Faktor-faktor penyebab kerusakan pada hati karena induksi oleh obat atau racun seperti konsumsi alkohol yang berlebihan, antibiotik tertentu, kemoterapi, minyak terperoksidasi, aflatoksin, karbontetraklorida, hidrokarbon terklorinasi dan zat-zat toksik lainnya dan reaksi imunologi (Williamson, David, dan Fred, 1996). Keracunan hati pada pasien yang menderita penyakit kuning diperkirakan 2% disebabkan oleh induksi obat dan 3-

  1970 memberikan gambaran bahwa obat atau toksikan menyebabkan kira-kira 10% dari seluruh kasus hepatitis atau kira-kira 20-30% dari kasus penyakit hati akut. Beberapa penelitian terbaru melaporkan bahwa 15-40% kasus penyakit hati akut diperantarai oleh obat-obatan (Cadman, 2000).

  Salah satu senyawa yang dapat digunakan sebagai senyawa model yang dapat menimbulkan kerusakan pada hati adalah karbon tetraklorida (CCl

  4 ). CCl

  4

  merupakan xenobiotik yang lazim digunakan untuk menginduksi peroksidasi lipid dan keracunan. Dalam endoplasmik retikulum hati CCl

  4 dimetabolisme oleh

  • sitokrom P450 2E1 (CYP2E1) menjadi radikal triklorometil (CCl 3 ).

  Triklorometil dengan oksigen membentuk radikal triklorometilperoxi yang menyerang lipid membran endoplasmik retikulum dan akhirnya menyebabkan kematian sel (Panjaitan, Handharyani, Chairul, Masriani, Zakiah dan Manalu, 2007).

  Obat-obatan untuk mengatasi kerusakan hati masih jarang ditemukan di Indonesia. Maka dari itu dalam penelitian ini akan dicari alternatif terapi pengobatan dari sumber daya alam. Salah satu tanaman yang dapat digunakan sebagai obat tradisional adalah alpukat. Alpukat merupakan tanaman yang dapat tumbuh subur di Indonesia dan merupakan salah satu jenis buah yang digemari banyak orang karena selain rasanya enak, buah alpukat juga kaya antioksidan dan zat gizi seperti lemak yaitu 9,8 g/100g daging buah (Afrianti, 2010). Sebagian besar masyarakat memanfaatkan alpukat pada buahnya saja sedangkan bagian lain seperti biji kurang dimanfaatkan. Biji alpukat dipercaya dapat mengobati sakit menurunkan kadar glukosa darah (Zuhrotun, 2007). Hasil skrining fitokimia yang dilakukan oleh Zuhrotun (2007) terhadap simplisia dan ekstrak etanol biji alpukat menunjukkan bahwa biji alpukat mengandung polifenol, flavonoid, triterpenoid, kuinon, saponin, tanin, monoterpenoid dan seskuiterpenoid.

  Biji alpukat (Persea americana Mill.) mengandung berbagai macam senyawa metabolit sekunder. Salah satunya adalah senyawa golongan fenolik.

  Senyawa fenolik dapat berfungsi sebagai antioksidan karena dapat mengalami reaksi redoks, yang menyebabkan senyawa tersebut dapat berfungsi sebagai agen pereduksi, donor hidrogen, penetral radikal bebas dan pengkhelat logam. Antioksidan dalam pengertian kimia merupakan senyawa pemberi elektron. Antioksidan bekerja dengan cara mendonorkan satu elektronnya kepada senyawa yang bersifat oksidan sehingga aktivitas senyawa oksidan tersebut bisa terhambat.

  Antioksidan menstabilkan radikal bebas dengan melengkapi kekurangan elektron yang dimiliki radikal bebas dan menghambat terjadinya reaksi berantai dari pemberian radikal bebas (Winarsi, 2007). Berdasarkan kemampuannya sebagai antioksidan dimungkinkan biji alpukat juga memiliki khasiat sebagai hepatoprotektor. Senyawa hepatoprotektor merupakan senyawa yang dapat melindungi sel-sel hati dari kerusakan. Sepanjang pengetahuan peneliti, penelitian mengenai aktivitas hepatoprotektif biji alpukat belum pernah dilakukan.

  Pada penelitian ini digunakan ekstrak metanol biji alpukat. Pemilihan ekstrak metanol berdasarkan penelitian sebelumnya. Pada penelitian efek antioksidan biji alpukat (Persea americana Mill.) telah diketahui bahwa senyawa

  

Persea americana Mill . dengan menggunakan pelarut metanol (Carpena,

  Morcuende, Andrade, Kylli dan Estevez, 2011). Pemberian ekstrak metanol biji alpukat secara jangka panjang pada hewan uji tikus jantan wistar yaitu selama 6 hari karena perlakuan selama 6 hari pada hewan uji tikus jika dikonversikan untuk manusia sama dengan 204 hari.

  1. Perumusan masalah

  a. Apakah ekstrak metanol biji alpukat mempunyai efek hepatoprotektif pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida dengan cara menurunkan aktivitas Alanine Aminotransferase (ALT) serum dan Aspartate Transaminase (AST) serum ?

  b. Berapa besar dosis optimum ekstrak metanol biji alpukat untuk menimbulkan efek hepatoprotektif pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida ?

  2. Keaslian penelitian

  Penelitian yang telah dilakukan berkaitan dengan biji Persea americana Mill. yaitu :

  a. Penelitian yang dilakukan oleh Arukwe, dkk (2012). Penelitian tersebut dilakukan untuk mengetahui kandungan dari biji, daun, dan buah Persea

  americana . Pada penelitian tersebut, meskipun dilakukan analisis

  kandungan biji Persea americana namun khasiat kandungan biji Persea americana tidak diteliti.

b. Penelitian yang dilakukan oleh Carpena, dkk (2011). Penelitian ini

  mikroba biji Persea americana Mill. Pada penelitian tersebut tidak dilakukan uji aktivitas Persea americana Mill. untuk digunakan sebagai hepatoprotektor.

  c. Penelitian yang dilakukan oleh Zuhrotun (2007). Penelitian tersebut menguji aktivitas antidiabetes dari ekstrak etanol biji Persea americana Mill. namun tidak dilakukan uji aktivitas hepatoprotektif. Pada penelitian yang akan dilakukan bertujuan untuk menguji aktivitas ekstrak metanol biji Persea americana Mill. sebagai hepatoprotektor secara jangka panjang dan untuk mengetahui dosis efektif dari ekstrak metanol biji Persea americana Mill. sebagai hepatoprotektor.

  Penelitian tentang efek hepatoprotektif ekstrak metanol biji Persea

  

americana Mill. pada tikus jantan wistar terinduksi karbon tetraklorida secara

jangka panjang belum pernah dilakukan sebelumnya.

  3. Manfaat penelitian

  1. Manfaat teoritis Hasil penelitian ini diharapkan mampu memberikan tambahan ilmu pengetahuan tentang tanaman yang memiliki khasiat hepatoprotektif.

  2. Manfaat praktis Hasil penelitian ini diharapkan dapat mengetahui dosis optimum jangka panjang penggunaan tanaman biji alpukat oleh masyarakat khususnya sebagai alternatif pengobatan bagi para penderita penyakit hati.

B. Tujuan Penelitian

  1. Tujuan umum

  Penelitian dilakukan untuk mendapatkan informasi mengenai efek hepatoprotektif ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. secara jamgka panjang untuk pengembangan ilmu kefarmasian.

  2. Tujuan khusus

  a. Untuk mengetahui efek hepatoprotektif ekstrak metanol biji alpukat pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida dengan cara menurunkan aktivitas ALT & AST serum.

  b. Untuk mengetahui besar dosis optimum ekstrak metanol biji alpukat untuk menimbulkan efek hepatoprotektif pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida.

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Anatomi dan Fisiologi Hati Hati merupakan organ yang berperan penting dalam banyak proses

  metabolisme. Darah yang mengandung nutrisi dari saluran gastrointestinal terlebih dahulu melewati vena portal di hati, di mana nutrisi seperti karbohidrat, lemak dan vitamin dapat dipindahkan dan disimpan dalam jangka waktu tertentu hingga nutrisi tersebut dibutuhkan. Sel-sel hati mampu memetabolisme karbohidrat, lemak, dan protein. Hati mampu mensintesis dan mensekresi empedu, yang mengandung air, ion-ion, lemak-lemak (turunan kolesterol yang dikenal sebagai garam empedu) dan pigmen empedu seperti bilirubin (Stine dan Brown, 1996).

  Hati adalah organ yang terbesar yang terletak di sebelah kanan atas rongga perut di bawah diafragma. Beratnya 1.500 g atau 2,5 % dari berat badan orang dewasa normal. Pada kondisi hidup berwarna merah tua karena kaya akan persediaan darah. Hati terbagi menjadi lobus kiri dan lobus kanan yang dipisahkan oleh ligamentum falciforme. Hati disuplai oleh dua pembuluh darah yaitu Vena porta hepatica yang berasal dari lambung dan usus, yang kaya akan nutrien seperti asam amino, monosakarida, vitamin yang larut dalam air, dan mineral dan Arteri hepatica, cabang dari arteri kuliaka yang kaya akan oksigen. Cabang-cabang pembuluh darah vena porta hepatica dan arteri hepatica mengalirkan darahnya ke Di dalam hematosit zat racun akan dinetralkan sedangkan nutrien akan ditimbun atau dibentuk zat baru, dimana zat tersebut akan disekresikan ke peredaran darah tubuh (Lingappa, 1995)

  Sel-sel hati tersusun dalam pola heksagonal khusus, dikenal sebagai lobulus (Stine dan Brown, 1996). Lobulus hati berbentuk silindris dengan panjang beberapa milimeter dan berdiameter 0,8 sampai 2 milimeter. Hati manusia berisi 50.000 sampai 100.000 lobulus (Guyton dan Hall, 1996). Sel-sel epitel disebut hepatosit tersusun menyebar di luar vena sentral (cabang vena hepatik). Di antara kolom-kolom hepatosit terdapat saluran yang disebut sinusoid. Pada sinusoid menempal sel-sel endotelial dengan permeabilitas tinggi. Sinusoid juga mengandung sel-sel fagosit disebut sel-sel Kupffer. Tiga pembuluh lainnya di setiap sudut luar heksagon (area portal): cabang vena portal, cabang dari arteri hepatik, dan saluran empedu. Darah mengalir ke dalam hati melalui cabang arteri hepatik dan vena portal, melalui sinusoid, dan mengalir keluar melalui vena sentral. Empedu dihasilkan di hepatosit dan mengalir keluar melalui kanalikuli empedu (terletak di antara perbatasan hepatosit) menuju saluran empedu.

  Lobulus-lobulus bukanlah unit fungsional yang berdiri sendiri-sendiri. Setiap pasang vena portal/ arteri hepatik mengalirkan darah tidak hanya ke satu lobulus, tetapi ke suatu area sel-sel yang meliputi 2 lobulus atau lebih. Area ini disebut asinus (Stine dan Brown, 1996).

  Hati mempunyai bermacam-macam fungsi dengan 3 fungsi utama dalam tubuh yaitu untuk sintesis, ekskresi dan metabolisme (Chandrasoma dan Taylor, saluran empedu mengangkut empedu sedangkan kandungan empedu menyimpan dan mengeluarkan empedu ke dalam usus halus sesuai kebutuhan (Price dan Wilson, 2005).

  Fungsi metabolisme hati yang lain adalah metabolisme lemak; penimbunan vitamin, besi dan tembaga; konjugasi dan ekskresi steroid adrenal dan gonad, serta detoksifikasi sejumlah zat endogen dan eksogen. Fungsi detoksifikasi sangat penting dan dilakukan oleh enzim hati melalui oksidasi, reduksi, hidrolisis, atau konjugasi zat-zat yang dapat berbahaya, dan mengubahnya menjadi zat yang secara fisiologis tidak aktif (Price dan Wilson, 2005). Untuk menjalankan fungsi tersebut, hati dilengkapi dengan sistem vaskuler hepatika (Guyton, 1983). Sistem vaskuler hepatika memungkinkan hati sebagai tempat utama metabolisme (biotransformasi) obat induk menjadi metabolitnya (Donatus, 1992).

  Hati yang normal mempunyai kapasitas cadangan yang besar untuk melakukan fungsinya. Dalam keadaan normal, 80% bagian dari hati dapat dihentikan aktivitasnya tanpa harus mengurangi fungsinya (Chandrasoma dan Taylor, 1995).

B. Kerusakan Pada Hati

  Kerusakan hati dapat berupa perlemakan hati, nekrosis, kolestatis dan sirosis hati (Price dan Wilson, 2005).

1. Perlemakan hati

  Perlemakan hati adalah penumpukan lemak lebih dari 5% pada organ berhubungan dengan peningkatan kadar asam lemak bebas dalam plasma yang terjadi akibat mobilisasi lemak dari jaringan adiposa atau dari hidrolisis triasilgliserol lipoprotein oleh lipase sensitif hormone di jaringan ekstrahepatik. Pembentukan Very Low Density Lipoprotein (VLDL) tidak dapat mengimbangi meningkatnya influx dan esterifikasi asam lemak bebas sehingga terjadi penumpukan triasilgliserol yang menyebabkan perlemakan hati. Kedua, karena adanya penghambatan metabolik dalam produksi lipoprotein plasma sehingga terjadi penimbunan triasilgliserol (Muray, Daryl, dan Victor, 2009).

  2. Nekrosis hati

  Nekrosis merupakan kematian sel hati yang ditandai dengan rusaknya struktur lobulus hati. Manifestasi dari toksikan yang berbahaya dapat menimbulkan nekrosis. Perubahan biokimia yang terjadi bersifat kompleks dan berbagai hepatotoksikan bekerja melalui berbagai mekanisme. Mekanisme terjadinya nekrosis diantaranya hepatotoksikan secara kovalen mengikat protein dan lipid tidak jenuh dan menyebabkan peroksidasi lipid (Price dan Wilson, 2005). Nekrosis biasanya didahului oleh perubahan morfoligik sel-sel hati, seperti rusaknya inti sel, homogenisasi sitoplasma, dan pecahnya membran plasma (Lu, 1995).

  3. Kolestasis

  Kolestatis merupakan kerusakan hati yang bersifat akut dan disebabkan karena aktifitas ekskresi empedu pada membran kanalikuli biliaris. Penyakit kolestatis lebih jarang ditemukan dibandingkan dengan perlemakan hati dan

4. Sirosis hati

  Sirosis yaitu suatu keadaan berupa penggantian hepatosit yang rusak secara permanen oleh jaringan ikat. Sirosis ditandai dengan adanya septa kolagen yang tersebar di sebagian besar hati. Peradangan hati yang berkepanjangan atau berulang umumnya berkaitan dengan alkoholisme kronik dapat menyebabkan sirosis. Hepatosit memiliki kemampuan untuk beregenerasi cukup cepat untuk menggantikan sel-sel yang rusak (Price dan Wilson, 2005).

  Ada banyak tipe sirosis, berkaitan dengan berbagai sebab : portal, nutrisional, dan sirosis alkoholis. Kerusakan hati ini disebabkan oleh salah gizi, kesenjangan protein makanan dan peminum berat pada periode yang panjang. Gejala permulaan tidak jelas, pada penderita sirosis biasanya mempunyai gangguan lambung, kehilangan nafsu makan, gangguan pencernaan, mual, muntah, sembelit atau diare dan sakit perut berkepanjangan (Cooper, 1996).

C. Hepatotoksin

  Kerusakan hati akut, subakut maupan kronis dapat ditimbulkan oleh hepatotoksin yaitu senyawa kimia yang memiliki efek toksik terhadap hati, dengan dosis berlebihan atau pemejanan dalam jangka waktu yang lama (Zimmerman, 1978).

  Obat atau senyawa kimia yang dapat menyebabkan kerusakan hati dapat dibedakan menjadi dua, yaitu :

1. Hepatotoksin teramalkan (intrinsik)

  Merupakan obat atau senyawa kimia yang pada dasarnya mempunyai menimbulkan kerusakan nekrosis hepatoseluler adalah racun jamur (Amanita

  

phalloides ), aflatoksin, karbontetraklorida, kloroform, parasetamol dan lain

  sebagainya (Chandrasoma dan Taylor, 1995). Prosesnya dikenal sebagai toksisitas-intrinsik, dan aksinya dapat terjadi secara langsung atau tidak langsung.

  Secara langsung maksudnya obat induk atau metabolitnya langsung berikatan dengan komponen membran sel dan merusak sel hati beserta seluruh organelnya, seperti ditunjukkan CCl

  4 dan parasetamol. Secara tidak langsung maksudnya obat

  induk atau obat bentuk metabolitnya dalam menimbulkan luka hepatik dengan cara mengganggu jalur metabolik-khas (misalnya tetrasiklin), atau menggangu jalur ekskresi hepatik (misalnya rifampisin) (Donatus, 1992). Kerusakan yang ditimbulkan bergantung dosis dan dapat dicobakan pada hewan uji dan menyebabkab lesi yang mirip manusia (Zimmerman, 1978).

2. Hepatotoksin tak teramalkan (idiosinkratik)

  Senyawa yang termasuk dalam golongan ini yaitu senyawa yang memiliki sifat tidak toksik pada hati, akan tetapi dapat menyebabkan penyakit hati pada individu yang hipersensitif terhadap senyawa tersebut yang diperantarai oleh mekanisme alergi (misalnya sulfonamid, halotan) atau karena keabnormalan metabolik menuju penumpukan metabolit toksik (misalnya iproniazid, isoniazid) (Zimmerman, 1978; Donatus, 1992). Kerusakan hati yang ditimbulkan oleh hepatotoksin golongan ini tidak dapat diperkirakan dan tidak tergantung pada dosis (Donatus, 1992).

D. Karbon tetraklorida

  Senyawa ini merupakan senyawa sintesis yang tidak terdapat dalam alam secara alami. Karbon tetraklorida berupa cairan bening, berbau manis yang dapat tercium pada jumlah rendah. Karbon tetraklorida juga disebut metanatetraklorida. Karbon tetraklorida paling sering dijumpai dalam bentuk gas tidak berwarna, tidak mudah terbakar, dan sukar larut dalam air. Karbon tetraklorida digunakan dalam produksi cairan untuk lemari es, bahan campuran propelan untuk kaleng aerosol, pestisida, cairan pembersih, minyak pelumas, bahan pemadam kebakaran, dan penghapus noda. Namun sekarang penggunaan karbon tetraklorida dilarang karena efeknya yang berbahaya. Karbon tetraklorida saat ini hanya digunakan untuk keperluan industri (Klassen, 1995).

  Pemberian CCl

  4 secara intragastrikal, subkutan, intraperitoneal dan

  inhalasi dapat menunjukkan ciri kerusakan nekrosis sentrilobuler dan steatosis (Zimmerman, 1978). Karbon tetraklorida (CCl

  4 ) didistribusikan secara cepat

  keseluruh organ dan jaringan, dengan kadar tertinggi pada lemak jaringan, hati dan sumsum tulang (Zimmerman, 1978). Hati merupakan organ yang paling sensitif terhadap CCl

  4 karena fungsi metabolismenya. Ginjal juga dirusak karena

  fungsi ekskresinya. Pada paparan CCl dalam tingkat ringan dan kemudian

  

4

  berhenti, hati dan ginjal mampu memperbaiki sel-sel yang dirusak dan berfungsi normal kembali. Pada paparan terlalu tinggi, sistem saraf termasuk otak dipengaruhi. Penderita dapat mengalami sakit kepala, pusing, mengantuk, mual dan muntah. Efek-efek tersebut dapat mereda jika paparan dapat dihentikan. Pada kasus keterpaparan yang parah, koma dan bahkan kematian dapat terjadi (Loomis, 1978).

  Efek toksik selektif dari CCl

  4 pada sel hati ditandai dengan terjadinya

  degenerasi melemak makrovesikuler dan nekrosis sentrilobuler atau salah satu dari kedua tanda tersebut tergantung dosis CCl yang diberikan. Degenerasi

  4

  melemak sel-sel hati hewan percobaan mulai terjadi dalam waktu 1 jam setelah pemberian CCl

  4 dimana pada saat itu konsentrasi CCl 4 dalam hati mencapai

  puncak. Nekrosis hati mulai tampak dari 6 sampai 12 jam dan mencapai puncak pada 24 sampai 36 jam setelah pemejanan (Zimmerman, 1978).

  Tanda-tanda awal kerusakan hepatoseluler pada hati meliputi peruraian polisom dan ribosom dari retikulum endoplasma kasar, penghambatan sintesis protein dan akumulasi trigliserida. Karbon tetraklorida yang diingesti memasuki hati, mengalami aktivasi metabolit, menghasilkan lipoperoksidasi, pengikatan secara kovalen, dan penghambatan aktivitas mikrosomal ATPase. Nekrosis sel tunggal terjadi dalam 5-6 jam sesudah ingesti, berkembang menjadi nekrosis sentrilobuler maksimum dalam 24-48 jam sesudah ingesti. Aktivitas enzim mikrosomal menurun. Berbagai enzim sitoplasmik dilepaskan hepatosit ke dalam aliran darah. Aktivitas enzim-enzim tersebut di dalam serum berhubungan dengan kehadiran nekrosis pada hati. Regenerasi seluler ditunjukkan dengan peningkatan sintesis DNA dan siklus sel, maksimal 36-48 jam sesudah ingesti. Kecepatan dan jumlah perbaikan jaringan untuk menentukan bentuk kerusakan hati (Bruckner dan Warren, 2001).

  

Gambar 1. Mekanisme biotransformasi dan oksidasi karbon tetraklorida (Timbrell,

2008)

  Keracunan CCl

  4 pada hati diawali dengan metabolisme dehalogenasi

  • reduktif oleh enzim sitokrom P450 (CYP2E1) menjadi suatu radikal bebas CCl

  3

  (triklorometil). Radikal bebas ini dapat berikatan secara kovalen dengan lemak dan protein, menyebabkan kerusakan struktur membran dan penghambatan

  • berbagai enzim. CCl

  3 juga dapat bereaksi dengan O 2 menghasilkan radikal bebas

  yang lain CCl

  3 OO (triklorometilperoksida) (Gambar 1). Selain itu, CCl 3 dapat

  mengikat asam lemak enoat membentuk radikal bebas organik yang dapat bereaksi dengan O

  2 membentuk peroksida dan metabolit sitotoksik lainnya. Proses

  ini dikenal sebagai peroksidasi lemak. Penelitian menunjukkan bahwa antioksidan menghambat pengikatan kovalen oleh CCl

  4 juga bersifat hepatoprotektif (Bruckner dan Warren, 2001).

  2+

  Keracunan CCl

  4 juga ditandai oleh peningkatan kalsium (Ca ) 2+ 2+

  intraseluler. Peningkatan kadar Ca berasal dari masuknya Ca ektraseluler

  2+

  karena kerusakan membran plasma dan berkurangnya pengeluaran Ca

  2+

  intraseluler. Peningkatan Ca intraseluler dalam hepatosit dapat menyebabkan kenaikan fosfolipase A

  2 dan memburukkan kerusakan membran. Peningkatan 2+

  Ca juga berkaitan dengan perubahan kalmodulin dan aktivitas fosforilasi (Bruckner dan Warren, 2001).

  Peroksidasi lipid juga dapat menyebabkan kerusakan membran sel dan kerusakan mitokondria. Kerusakan ini berupa gangguan integritas membran yang menyebabkan keluarnya berbagai isi sitoplasma, antara lain enzim ALT. Enzim ALT yang ada di dalam sel akan keluar dan masuk peredaran darah sehingga jumlah enzim ALT meningkat. Terjadinya penghambatan sintesis protein juga diakibatkan adanya gangguan keluarnya lipid dari hati yang disebabkan karena hambatan sintesis lipoprotein yang membawa trigliserida meninggalkan hati sehingga menimbulkan steatosis (perlemakan hati). Pada keadaan steatosis ini, struktur retikulum endoplasma mengalami distorsi, sintesa protein menjadi lambat, selanjutnya akan terjadi penyimpangan dengan cepat terhadap aktivitas enzim yang berada di retikulum endoplasma (Wahyuni, 2005). Tubuh manusia sebenarnya mempunyai sistem pertahanan untuk mengatasi radikal bebas, salah satunya yaitu glutation-S-transferase (GSH) yang berperan sebagai antioksidan endogen. Jika terdapat radikal bebas di dalam tubuh, senyawa ini akan menangkap radikal bebas tersebut (Timbrell, 2008).

  Peningkatan aktivitas serum ALT yang menyebabkan steatosis akibat

induksi karbon tetraklorida mencapai tiga kali lipat dari kondisi normal (Tabel I) dan

peningkatan aktivitas serum AST mencapai empat kali lipat dari kondisi normal

(Ziemmerman, 1999). Bai, Zhang, Chen, Zong, Guo, dan Liu (2011) melaporkan

adanya peningkatan aktivitas ALT kurang lebih tiga kali lipat dibanding kelompok

kontrol pada tikus terinduksi karbon tetraklorida.

  

Tabel I. Peningkatan aktivitas enzim serum akibat induksi senyawa toksik

(Ziemmerman, 1999).

E. Pemeriksaan Biokimiawi Hati

  Pemeriksaan biokimiawi mencangkup : enzim-enzim serum termasuk aminotransferase, alkaline phosphatase dan 5’-nucleotidase; produk ekskretorik seperti bilirubuin, asam-asam empedu; produk sinetik seperti albumin faktor- faktor koagulasi dan kolesterol.

  Aminotransferase terdiri dari serum Alanine Aminotransferase (ALT) dan Aspartate Aminotransferase (AST) (Woodley dan Allison, 1992). Enzim ini mengkatalis transfer gugus α- amino dari alanin secara berturut-turut menjadi gugus α-keto dari ketoglutarat membentuk asam glutamat dan asam piruvat

  Reaksi yang terjadi : 2-oksoglutarat + L-alanin = Glutamat + Piruvat (1)

  Piruvat + NADH + H = Laktat + NADH (2) Serum Alanine Aminotransferase (ALT) ditemukan secara eksklusif dalam sitosol, sedangkan isoenzim Aspartate Aminotransferase (AST) berada dalam mitokondria dan sitosol (Isselbacher dan Podolsky, 1995). Kadar yang meningkat secara mencolok (500 unit/liter) khas terdapat pada kerusakan hati akut (misalnya karena virus, obat-obatan, hepatitis karena iskhemia) sedangkan kenaikan berderajad sedang (<300 unit/liter) dapat terlihat pada berbagai keadaan (misalnya kerusakan hepatoseluler akut atau kronik, penyakit-penyakit infiltratif, obstruksi bilier). Serum ALT pada umumnya lebih spesifik daripada serum GPT untuk mendeteksi hepatitis viral (Woodley dan Allison, 1992). Kadar yang tertinggi ditemukan pada keadaan yang menyebabkan nekrosis hati yang luas, seperti hepatitis virus yang berat, cedera hati akibat toksin, atau kolaps sirkulasi yang berkepanjangan (Isselbacher dan Podolsky, 1995). Kenaikan kadar transaminase dalam serum disebabkan disebabkan oleh sel-sel yang kaya akan transaminase mengalami nekrosis atau hancur. Enzim-enzim tersebut masuk dalam peredaran darah. Kenaikan kembali atau bertahannya nilai transaminase yang tinggi biasanya menunjukkan berkembangannya kelainan dan nekrosis hati (Isselbacher dan Podolsky, 1995).

F. Kandungan Fitokimia Biji Persea americana Mill.

  Biji alpukat (Persea americana Mill.) mengandung berbagai macam Senyawa fenolik dapat berfungsi sebagai antioksidan karena dapat mengalami reaksi redoks, yang menyebabkan senyawa tersebut dapat berfungsi sebagai agen pereduksi, donor hidrogen, penetral radikal bebas dan pengkhelat logam.

  Kulit dan biji Persea americana Mill. memiliki efek antioksidan yang cukup besar. Efek ini bergantung pada varietasnya. Ekstrak dari Persea

  

americana tidak memiliki komponen yang toksik atau berbahaya. Metanol dapat

  digunakan untuk mengekstak senyawa fenolik total dengan cukup baik (Carpena et al , 2011).

  Persea americana Mill. mengandung berbagai macam senyawa

  fitokimia, diantaranya adalah saponin, tanin, flavonoid, sianogenik glikosida, alkaloid, fenol, steroid (Tabel II). Flavonoid merupakan senyawa poten antioksidan yang larut air dan penangkap radikal bebas. Flavonoid mencegah kerusakan oksidatif pada sel, memiliki aktivitas antikanker yang kuat, dan melindungi tubuh dengan cara melawan semua tahap karsinogenesis. Fenol juga telah diteliti secara ekstensif sebagai pencegah penyakit. Fenol yang ada pada

  

Persea americana memiliki kemampuan untuk digunakan sebagai anti-inflamsi,

  anti-penggumpalan darah, antioksidan, peningkat sistem imun dan lain sebagainya. Sedangkan alkaloid adalah metabolit sekunder yang dapat berfungsi sebagai analgesik dan memiliki efek bakterisida (Arukwe et al. 2012).

  Tabel II. Kandungan fitokimia dari Persea americana pada daun, buah dan

  biji (Arukwe et al. 2012)

  ®

G. Sirup Curliv Plus

  ®

  Sirup Curliv Plus merupakan suplemen untuk memproteksi hati dan

  ® membantu dalam pemulihan penyakit hati. Sirup Curliv Plus diproduksi oleh PT.

  ®

  SOHO Industri Pharmasi Indonesia. Kandungan bahan sirup Curliv Plus setiap 5 ml yaitu ekstrak Silymarin 8,75mg, ekstrak Schizandrae Fructus 33,75 mg, ekstrak Curcuma xanthorrhiza 37,5 mg, Liquiritiae Radix 33,75 mg dan vitamin B6 0,5 mg.

  Silybum marianum merupakan tumbuhan yang diketahui berperan

  sebagai hepatoprotektor. Tumbuhan ini dilaporkan mampu melindungi hati dari berbagai jenis racun, paracetamol, alkohol, CCl D-galaktosamin, radiasi,

  4,

  penyempitan/ penyumbatan pembuluh darah yang disusul dengan nekrosis dan pengelupasan sel-sel hati, serta virus hepatitis. Mekanisme kerja silymarin sebagai hepatoprotektor berkaitan perannya sebagai antioksidan, antiperoksidasi lipid, serta meningkatkan daya detoksifikasi. Silybum marianum juga berperan dalam meningkatkan sintesis protein sel-sel hati, mengurangi aktivitas bahan-bahan yang menyebabkan tumor, memelihara sel mast (sejenis sel pada jaringan ikat yang banyak mengandung basofil, kemungkinan juga terkait dengan pembentukan histamin dan heparin), memodulasi kekebalan tubuh, antiradang dan antifibrosis (Scoot Luper, 1998). atau dikenal sebagai temulawak merupakan

  Curcuma xanthorrhiza

  tumbuhan obat yang berasal dari Indonesia. Secara tradisional temulawak tersebut digunakan untuk pengobatan demam, jerawat, batu empedu, peningkatan produksi

  ASI (Panigoro, Samsudin, Diah, 2013). Curcuma xanthorrhiza pada saat sekarang ini telah banyak diteliti terkait kandungan maupun efek farmakologinya.

  Berdasarkan hasil dari beberapa penelitian dengan menggunakan hewan uji berupa tikus dan juga mencit, menunjukkan bahwa pemberian Curcuma

  

xanthorrhiza (100 mg/kgBB) memiliki efek sebagai hepatoprotektif dengan

  menggunakan beberapa variasi hepatotoksin seperti karbon tetraklorida (CCl

  4 ),

  galaktosamin, paracetamol, dll. Melalui pengecekan gambaran histopatologis terlihat bahwa nekrosis dan kongesti vascular ditemukan lebih sedikit pada kelompok hewan uji yang diberi Curcuma xanthorriza tersebut. Efek hepatoprotektif ini dikarenakan banyaknya senyawa antioksidan di dalam

  Curcuma xanthorrhiza (Committee on Herbal Medicinal Products, 2013).

  Curcuminoid di dalam Curcuma xanthorrhiza memiliki khasiat sebagai antioksidan dan juga antiinflamasi. Kurkumin bertindak sebagai scavenger terhadap spesies oksigen, seperti radikal hidroksil, anion superoksida, dan oksigen singlet dan juga menghambat peroksidasi lipid (Committee on Herbal Medicinal Products, 2013).

  Schizandrae Fructus atau berasal dari tanaman Schizandrae chinesis.

Schizandrae Fructus telah banyak digunakan untuk mengobati batuk, asma, diare,

insomnia dalam pengobatan dengan menggunakan obat-obatan tradisional Cina.

  Beberapa penelitian juga telah berhasil melakukan isolasi senyawa yang terkandung di dalam Schizandrae Fructus yang terbukti memiliki efek hepatoprotektif. Penelitian Kim, Ren, Gil, Jin, Seung, Hye, Ji, Tae, Youn (2006) membuktikan bahwa Schizandrae Fructus memiliki aktivitas antihepatotoksik terhadap CCl

  4 dan galaktosamin.

H. Ekstrak

  Menurut Farmakope Indonesia edisi IV, ekstrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan mengekstraksi senyawa aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani atau pelikan menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang telah ditetaphan (Ditjen POM, 1995).

  Dalam proses ekstraksi, terjadi peristiwa difusi pelarut ke dalam sel bahan. Pelarut yang masuk ke dalam sel bahan tersebut akan melarutkan senyawa bila kelarutan senyawa yang diekstrak sama dengan pelarut. Dengan cara tersebut akan tercapai kesetimbangan antara zat terlarut dan pelarut. Pengeluaran bahan aktif dari serbuk bahan tergantung kepada laju difusi subtansi dari serbuk bahan ke dalam pelarut, waktu kontak dan laju pelarut menembus serbuk bahan (Bombardelli, 1991).

  Menurut Purseglove, Brown, Green, dan Robins (1981), tahapan proses ekstraksi adalah sebagai berikut. Pertama adalah tahapan persiapan bahan dan pelarut, tahap pembuatan serbuk bahan dengan ukuran tepat sesuai keperluan ekstraksi, tahap ekstraksi dan tahap pemekatan larutan ekstrak. Menurut Bernardini (1982), ada beberapa fakor yang mempengaruhi kecepatan ekstraksi, yaitu penanganan pendahuluan, lama ekstraksi, suhu dan tipe pelarut yang digunakan. Sebelum memulai ekstraksi, dilakukan persiapan bahan baku yang untuk mempermudah proses ekstraksi. Selain itu, tingkat kemudahan ekstraksi bahan kering masih ditentukan oleh ukuran partikel bahan. Bahan yang akan diekstrak sebaiknya berukuran seragam untuk mempermudah kontak antara bahan dengan pelarut. Metode ekstraksi yang dilakukan tergantung pada beberapa faktor antara lain tujuan ekstraksi, skala ekstraksi, sifat komponen yang akan diekstrak, dan sifat pelarut yang digunakan. Beberapa metode umum yang biasa dilakukan adalah ekstraksi dengan pelarut, distilasi, pengepresan mekanik, dan sublimasi. Diantara metode-metode tersebut, metode yang banyak dilakukan adalah distilasi dan ekstraksi menggunakan pelarut. Prinsip ekstraksi menggunakan pelarut adalah bahan yang akan diekstrak kontak langsung dengan pelarut selama selang waktu tertentu dan komponen yang akan diekstrak akan terlarut dalam pelarut (Hougton dan Raman, 1998).

  Jenis pelarut yang digunakan dalam proses ekstraksi akan mempengaruhi jenis bahan yang akan terekstrak. Kelarutan suatu senyawa dalam pelarut tergantung dari gugus-gugus yang terikat pada pelarut tersebut. Pelarut yang mempunyai gugus hidroksil (alkohol) dan karbonil (keton) termasuk pelarut polar, sedangkan hidrokarbon termasuk ke dalam non polar. Masing-masing pelarut mempunyai efesiensi yang berbeda-beda. Pemilihan pelarut harus didasarkan pada sifat polaritas, stabilitas, dan harga. Konsep like dissolves like merupakan konsep yang menjelaskan adanya fenomena dalam proses ekstraksi, nilai kepolaran pelarut harus sedekat mungkin dengan kepolaran sampel. Konsep ini sangat berguna jika komponen yang akan diekstrak sudah diketahui melarutkan alkaloid dan aglikon. Pelarut non polar akan melarutkan senyawa seperti lilin, lemak, dan terpenoid yang bersifat non polar (Houghton dan Raman, 1998).

  Metanol (CH

3 OH) merupakan pelarut polar yang dapat bercampur

  dengan air, alkohol, ester, keton, eter, dan sebagian pelarut organik. Metanol sedikit larut dalam lemak dan minyak. Metanol berbentuk hablur cairan tidak berwarna, jernih, bau khas dengan berat molekul 32,04. Titik didih metanol berada pada 64,7 ºC (Ditjen POM, 1995).

I. Landasan Teori Di dalam hati, terdapat bermacam-macam bentuk kerusakan hati.

  Kerusakan hati akibat induksi obat yang biasa terjadi yaitu nekrosis. Nekrosis merupakan kematian sel hati yang ditandai dengan rusaknya struktur lobulus hati.

  Manifestasi dari toksikan yang berbahaya dapat menimbulkan nekrosis. Perubahan biokimia yang terjadi bersifat kompleks dan berbagai hepatotoksikan bekerja melalui berbagai mekanisme. Mekanisme terjadinya nekrosis diantaranya hepatotoksikan secara kovalen mengikat protein dan lipid tidak jenuh dan menyebabkan peroksidasi lipid (Price dan Wilson, 2005).

  Keracunan CCl pada hati diawali dengan metabolisme dehalogenasi

  4

  • reduktif oleh enzim sitokrom P450 menjadi suatu radikal bebas CCl

  3

  (triklorometil). Radikal bebas ini dapat berikatan secara kovalen dengan lemak dan protein, menyebabkan kerusakan struktur membran dan penghambatan

  • berbagai enzim. CCl

  3 juga dapat bereaksi dengan O 2 menghasilkan radikal bebas

asam lemak enoat membentuk radikal bebas organik yang dapat bereaksi dengan O

  

2 membentuk peroksida dan metabolit sitotoksik lainnya. Proses ini dikenal

  sebagai peroksidasi lemak. Penelitian menunjukkan bahwa antioksidan mengurangi sitotoksisitas CCl

  4 secara in vitro dan in vivo. Agen yang

  menghambat pengikatan kovalen oleh CCl juga bersifat hepatoprotektif

  4 (Bruckner dan Warren, 2001).

  Biji alpukat (Persea americana Mill.) mengandung berbagai macam senyawa metabolit sekunder. Salah satunya adalah senyawa golongan fenolik.

  Senyawa fenolik dapat berfungsi sebagai antioksidan karena dapat mengalami reaksi redoks, yang menyebabkan senyawa tersebut dapat berfungsi sebagai agen pereduksi, donor hidrogen, penetral radikal bebas dan pengkhelat logam. Persea

  

americana Mill. juga mengandung berbagai macam senyawa fitokimia,

  diantaranya adalah tanin, flavonoid, alkaloid dan fenol. Flavonoid merupakan senyawa poten antioksidan yang larut air dan penangkap radikal bebas. Flavonoid mencegah kerusakan oksidatif pada sel, memiliki aktivitas antikanker yang kuat, dan melindungi tubuh dengan cara melawan semua tahap karsinogenesis.

  (Arukwe et al, 2012).

  Pada penelitian ini digunakan ekstrak metanol biji Persea americana. Pemilihan ekstrak metanol berdasarkan penelitian sebelumnya. Pada penelitian efek antioksidan biji alpukat (Persea americana Mill.) telah diketahui bahwa senyawa fenolik yang berkhasiat sebagai antioksidan dapat terambil dengan baik dari biji Persea americana Mill. dengan menggunakan pelarut metanol (Carpena,

  J. Hipotesis

  Ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. memiliki efek hepatoprotektif pada tikus jantan terinduksi karbontetraklorida.

BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis dan Rancangan Penelitian Penelitian termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. B. Variabel dan Definisi Variabel Utama

1. Variabel utama :

a. Variabel bebas. Variabel bebas dari penelitian ini adalah variasi dosis pemberian ekstrak metanol Persea americana Mill. ( biji buah alpukat ).

  Dosis ekstrak metanol Persea americana Mill. adalah sejumlah (gram) ekstrak metanol Persea americana Mill. tiap satuan kilogram berat badan subjek uji yang bersangkutan.

  b. Variabel tergantung. Variabel tergantung dari penelitian ini adalah efek hepatoprotektif ekstrak metanol Persea americana Mill. secara jangka panjang terhadap sel hati tikus terinduksi CCl

  4 , ditandai dengan tolok ukur

  kuantitatif berupa penurunan aktifitas Alanine Aminotransferase (ALT) dan Aspartate Transaminase (AST).

2. Variabel pengacau terkendali

  Hewan uji tikus jantan galur Wistar, berat badan 150-250 gram, umur antara 2-3 bulan. a. Frekuensi pemberian ekstrak metanol Persea americana Mill. 1 kali sehari selama 6 hari berturut-turut dengan waktu pemberian yang sama. b.Cara pemberian ekstrak dilakukan secara per oral (p.o).

  c. Bahan uji yang digunakan berupa biji Persea americana Mill. yang diperoleh dari Padang, Sumatra Barat.

3. Variabel pengacau tak terkendali

  Kondisi patologis hewan uji 4.

   Definisi operasional

  Definisi operasional yang digunakan pada penelitian ini yaitu :

  a. Ekstrak metanol biji Persea americana Mill. adalah ekstrak kental yang diperoleh dengan mengekstraksi serbuk kering biji Persea americana Mill. seberat 10,0 gram yang dilarutkan dalam 100 ml pelarut metanol 70% yang dikeringkan hingga bobot tetap.

  b. Efek hepatoprotektif adalah kemampuan ekstrak metanol biji Persea

  americana Mill. pada dosis tertentu dapat melindungi hepar dari hepatotoksin.

  c. Dosis optimum adalah dosis yang mampu memberikan % efek hepatoprotektif dan % daya hepatoprotektif paling optimal.

  d. Jangka panjang adalah penetapan lama pemejanan ekstrak metanol-air biji Mill. selama enam hari dan pada hari ke 7 diberi karbon

  Persea americana tetraklorida dosis 2 ml/kgBB.

C. Subyek dan Bahan Penelitian

  1. Subyek penelitian

  Subyek uji yang digunakan berupa tikus jantan galur Wistar, umur 2-3 bulan dengan berkisar antara 150-250 gram, diperoleh dari Laboratorium Imono Fakultas Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

  2. Bahan penelitian

  a. Bahan uji adalah simplisia biji buah alpukat (Persea americana Mill.) yang berupa serbuk. Bahan uji diperoleh dari kawasan Sumatera Barat yang telah diserbukkan, dideterminasi serta ditetapkan kadar airnya.

  b. Bahan hepatotoksik adalah larutan CCl (E. Merck, Darmstadt, Germany)

  4

  yang dilarutkan dalam Olive Oil (merek dagang Bartoli) yang diperoleh dari Laboratorium Kimia Analisis Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Konsentrasi karbon tetraklorida yang digunakan adalah 50% dengan dosis 2 ml/kgBB.

  c. Bahan pelarut aquadest diperoleh dari Laboratorium Farmakologi Toksikologi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

  d. Bahan pengektrak serbuk biji alpukat yaitu metanol teknis (PT. Brataco) dengan konsentrasi 99% yang diencerkan hingga konsentrasi 70% menggunakan pengencer aquadest.

  e. Penetapan aktivitas ALT digunakan pereaksi siap pakai kit GPT-ALAT (E.

  Merck, Darmstadt, Germany) untuk mengukur aktivitas ALT serum. Masing-masing bahan terdiri atas dua reagen yaitu Reagen 1 dan Reagen 2.

  GPT-ALAT :

  R1 TRIS pH 7.15 140 mmol/L L-Alanine 700 mmol/L LDH (Lactate dehydrogenase)

  ≥2300 U/L R2 2-Oxoglutarate 85 mmol/L

  NADH 1 mmol/L

  Pyridoxal-5-phosphate FS :

  100mmol/L Good’s buffer pH 9.6 Pyridoxal-5-phosphate 13mmol/L

  f. Aquabidest digunakan sebagai pencuci vitalab mikro dan juga sebagai blanko dalam pengukuran aktvitas kreatinin serum. Aquabidest ini diperoleh dari laboratorium Kimia Analisis Instrumental Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

  g. Natrium-Carboxymethyl Cellulosa (CMC-Na). CMC-Na yang digunakan dalam bentuk serbuk, diperoleh dari laboratorium Biofarmasetika Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta

D. Alat dan Instrumen Penelitian

  Alat-alat yang dipakai meliputi :

  1. Seperangkat alat gelas berupa bekker glass, erlenmeyer, gelas ukur, labu ukur, cawan porselen, pipet tetes, batang pengaduk (Pyrek Iwaki)

  2. Timbangan analitik

  3. Shaker

  5. Sentrifuge

  6. Vortex

  7. Spuit per oral dan syringe 3 cc

  8. Pipa kapiler

  9. Vitalab micro (Microlab 200, Merck)

  10. Kamera (Canon 5D)

E. Tata Cara Penelitian 1. Determinasi serbuk Persea americana Mill.

  Determinasi serbuk biji tanaman Persea americana Mill. dilakukan dengan mencocokan ciri-ciri tanaman Persea americana Mill. dengan serbuk biji tanaman Persea Americana Mill. yang telah dideterminasi dengan menggunakan buku acuan determinasi. Determinasi dilakukan secara makroskopis termasuk organoleptis serbuk dan secara mikroskopis. Determinasi dilakukan oleh Yohanes Dwiatmaka, M.Si yang merupakan dosen Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

  2. Pengumpulan bahan

  Bahan uji yang digunakan adalah biji Persea americana Mill. yang masih segar, diperoleh dari Sumatera Barat pada bulan Januari (musin penghujan).

  3. Pembuatan serbuk

  Biji Persea americana Mill. dicuci bersih dibawah air mengalir. Setelah bersih, biji kemudian dikering anginkan hingga biji tidak tampak basah lagi, kemudian biji Persea americana Mill. dipotong tipis-tipis dan dikeringan di pengeringan. Setelah kering, biji diserbukkan dan diayak dengan ayakan nomor

  40. Pengayakan dilakukan agar kandungan fitokimia yang terkandung dalam biji

  

Persea americana Mill. lebih mudah tersekstrak karena luas permukaan spesifik

yang kontak dengan pelarut semakin besar.

  4. Pembuatan ekstrak metanol biji Persea americana Mill.

  Sebanyak 10 gram serbuk kering biji Persea americana Mill. diekstraksi dengan cara maserasi. Serbuk dilarutkan dalam 100 ml pelarut metanol 70% di dalam Erlenmeyer bersumbat kaca. Ekstraksi dilakukan pada suhu kamar. Perbandingan jumlah serbuk dan pelarut adalah 1:10. Campuran serbuk dan pelarut kemudian digojong selama 1 menit, didiamkan dalam ruangan gelap dan ditutup. Setiap harinya selama 5 hari berturut-turut pada jam yang sama dilakukan penggojogan selama 1 menit. Kemudian dilakukan penyaringan dengan kertas saring dengan bantuan pompa vakum. Ekstrak kemudian diuapkan dengan menggunakan rotary evaporator pada suhu 70 C hingga tidak ada lagi tetesan pada rotary evaporator. Hasilnya kemudian dipindahkan ke dalam cawan porselen yang telah ditimbang bobotnya terlebih dahulu. Selanjutnya, dipekatkan dengan menggunakan penangas air pada suhu 70

  C. dilakukan penimbangan setiap harinya hingga bobot ekstrak tetap (selisih penimbangan < 0,5 mg tiap gram zat sisa dari 2 penimbangan berturut-turut). Kemudian ekstrak disimpan di dalam desikator hingga saat akan digunakan.

  5. Pembuatan larutan Natrium-Carboxy Methyl Cellulosa (CMC-Na) 1%

  Larutan CMC-Na 1% dibuat dengan cara menimbang 5,0 g CMC-Na kemudian ditaburan secara merata di permukaan 200 mL aquadest di dalam gelas kimia dan ditunggu hingga semua serbuk terbasahi, tanpa pengadukan. Setelah semua serbuk CMC-Na terbasahi maka dilakukan pengadukan hingga seluruh CMC-Na larut. Larutan CMC-Na kemudian dimasukkan ke dalam labu takar 500 ml dan ditambahkan aquadest hingga batas tanda.

  6. Pembuatan suspensi ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dalam CMC-Na 1%

  Suspensi ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dibuat dengan konsentrasi 7%. Sebanyak 3,5 g ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. ditimbang secara seksama. Kemudian dilarutkan dengan menggunakan larutan CMC-Na 1% hingga terlarut keseluruhan dan dimasukkan ke dalam labu takar 50 mL dan ditambah dengan larutan CMC-Na 1% hingga batas tanda, selanjutnya digojog hingga homogen.

  7. Pembuatan larutan karbon tetraklorida (CCl 4 ) konsentrasi 50%

  Larutan CCl dalam Olive Oil dibuat dengan cara melarutkan 25 ml CCl

  4 4 dalam labu takar 50 ml kemudian ditambahkan dengan Olive Oil hingga tanda.

  Digojog hingga homogen. Pengambilan CCl

  4 dilakukan dengan menggunakan pipet gondok 25 ml.

  8. Penetapan kadar air serbuk biji Persea americana Mill.

  Penetapan kadar air dilakukan dengan cara menimbang sebanyak 5,0 g serbuk biji Persea americana Mill. dan kemudian serbuk tersebut dimasukkan ke dalam alat moisture balance selama 15 menit pada suhu 105°C. Perhitungan kadar

  

balance dengan sesudah serbuk dimasukkan ke dalam alat moisture balance.

  Selisih bobot inilah yang merupakan kadar air dari serbuk biji Persea americana Mill.

  9. Penetapan konsentrasi ekstrak pekat

  Rata-rata bobot ke enam replikasi ekstrak metanol biji Persea americana Mill. kental yang telah dibuat.

  Bobot ekstrak = berat cawan ekstrak kental – berat cawan kosong. Rata- rata bobot ekstrak = Konsentrasi ekstrak didapat dari hasil rata-rata bobot ekstrak.

  Konsentrasi yang digunakan adalah konsentrasi pekat yang dapat dibuat. Pada konsentrasi yang digunakan tersebut ekstrak dapat dimasukkan dan dikeluarkan dari spuit oral . Cara pembuatannya adalah dengan melarutkan ekstrak setiap cawan dalam labu ukur 5 ml dengan pelarut yang sesuai (CMC Na 1%). Sehingga konsentrasi ekstrak dapat ditetapkan.

  10. Uji pendahuluan

a. Penetapan dosis hepatoprotektif CCl

  4 Pemilihan dosis CCl 4 dilakukan untuk mengetahui pada dosis berapa

  CCl

  4 mampu menyebabkan kerusakan pada hati tikus yang ditandai dengan

  peningkatan serum ALT paling tinggi. Dosis hepatotoksik yang digunakan dalam penelitian ini berdasarkan pada hasil orientasi yang sedang dilakukan sehingga nantinya bisa didapat dosis yang mampu meningkatkan aktivitas ALT serum pada tikus bila diberikan secara per oral.

b. Penetapan waktu cuplikan darah

  Kenaikan serum ALT akan terjadi pada waktu 24-48 jam setelah pemejanan CCl

4. Untuk mendapatkan waktu pencuplikan darah dilakukan

  orientasi dengan 4 kelompok perlakuan waktu. Masing-masing kelompok sejumlah 3 ekor tikus. Kelompok I diambil darah pada jm ke-0 setelah pemejanan CCl 4, kelompok II diambil darah pada jam ke-24 setelah pemejanan CCl

  4 ,

  kelompok III diambil darah pada jam ke-48 dan keompok IV diambil darah pada jam ke-72 setelah pemejanan CCl

4. Setelah pengambilan darah, darah diukur

  aktivitas serum ALT dan ditentukan waktu optimal pengukuran cuplikan darah berdasarkan data serum ALT.

c. Penetapan lama pemejanan ekstrak metanol biji Persea americana Mill.

  Lama waktu pemejanan ekstrak metanol biji Persea americana Mill dilakukan selama 6 hari berturut-turut, pada hari ketujuh dipejankan senyawa hepatotoksin dan diukur aktivitas ALT-nya setelah 24 jam pemejanan senyawa hepatotoksin.

11. Pengelompokan dan perlakuan hewan uji

  Sejumlah tiga puluh lima ekor tikus dibagi secara acak ke dalam tujuh kelompok perlakuan masing-masing sejumlah 5 ekor. Kelompok I (kontrol hepatotoksin) diberi larutan CCl

  4 secara intraperitonial. Kelompok II (kontrol

  negatif) diberi minyak zaitun (Olive Oil) dosis 3,84 g/Kg BB selama 6 hari berturut-turut secara intrapenitonial. Kelompok III (kontrol ekstrak biji Persea

  

americana Mill.) dengan dosis 1400mg/kgBB selama 6 hari berturut-turut secara ® selama enam hari berturut-turut secara peroral. Kelompok V sampai dengan kelompok VII berturut-turut diberi ekstrak metanol biji Persea americana Mill dengan dosis 1400; 700; dan 350 mg/kgBB selama 6 hari berturut-turut secara peroral. Kemudian pada hari ketujuh semua kelompok perlakuan diberi larutan CCl dosis tertentu secara intraperitonial setelah 24 jam diambil darahnya melalui

  4

  sinus orbitalis mata. Cuplikan darah diambil serumnya untuk aktivitas ALT serumnya.

  12. Pembuatan serum

  Darah tikus diambil melalui sinus orbitalis mata dan ditampung dalam effendrof 1,5 ml melalui dinding tabung, didiamkan selama 15 menit. Dilakukan sentrifugasi dengan kecepatan 10000 rpm selama 15 menit dan diambil supernatannya (serum). Supernatan ditampung dalam effendrof 1,5 mL. Serum yang belum diukur kemudian disimpan dalam lemari pembeku (Freezer).

  13. Penetapan aktivitas serum ALT dan serum AST

  Alat yang digunakan untuk menganalisis aktivitas ALT-AST serum adalah vitalab mikro. Aktivitas enzim diukur pada panjang gelombang 340 nm, suhu 37 C dengan faktor koreksi -1745. Aktivitas serum ALT-AST dinyatakan dalam U/L. Pengukuran aktivitas serum ALT-AST dilakukan di laboratorium Biokimia , Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

  Analisis dilakukan dengan cara sebagai berikut, 100 μL serum dicampur dengan reagen I sebanyak 1000 µL, divortex selama 5 detik. Didiamkan selama 1 menit. R eagen II ditambahkan sebanyak 250 μL, divortex 5 detik dan dibaca

F. Tata Cara Analisis Hasil

  Data aktivitas ALT diuji dengan Kolmogorov-Smirnov untuk mengetahui distribusi data dan analisis varian untuk melihat homogenitas varian antar kelompoknya sebagai syarat analisis parametrik. Jika data terdistribusi normal maka dilanjutkan dengan analisis variansi pola searah (One Way ANOVA) dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui perbedaan masing-masing kelompok. Kemudian dilanjutkan dengan uji LSD untuk melihat perbedaan antar kelompok bermakna (signifikan) (p<0,05) atau tidak bermakna signifikan (p>0,05). Tetapi apabila distribusi tidak normal dilakukan analisis dengan Kruskal Wallis untuk mengetahui perbedaan aktivitas ALT serum antar kelompok. Kemudian dilanjutkan Mann Whitney untuk melihat perbedaan tiap kelompok.

  Data derajat kerusakan hati juga dianalisis sesuai prosedur diatas dengan taraf kepercayaan 95%. Perhitungan persen efek hepatoprotektif terhadap hepatotoksin CCl

  4 dilakukan dengan rumus :

  ( ) ( ) ( )

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian dan besar

  dosis optimum hepatoprotektif ekstrak metanol air biji alpukat (Persea americana Mill.) pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida dengan melihat penurunan aktivitas serum ALT dan serum AST.

  Pengamatan hasil penelitian ini dapat tercapai dengan penelitian meliputi determinasi tanaman biji alpukat (Persea americana Mill.), penetapan kadar air serbuk kering biji alpukat (Persea americana Mill.), penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida, penentuan waktu pencuplikan darah hewan uji, uji kontrol

  ®

  negatif olive oil, uji kontrol positif obat Curliv , uji efek hepatoprotektif ekstrak metanol air biji Persea americana Mill. dosis 1400; 700; dan 350 mg/kgBB.

A. Penyiapan Bahan

1. Determinasi serbuk

  Pada penelitian ini digunakan serbuk biji Persea americana Mill. sebagai bahan uji. Determinasi serbuk dilakukan dengan tujuan untuk membuktikan bahwa serbuk yang digunakan benar merupakan bagian biji dari tanaman Persea

  

americana Mill. sehingga tidak terjadi kesalahan dalam penyiapan bahan yang

  digunakan. Determinasi dilakukan di Laboratorium Farmakognosi Fitokimia, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Determinasi dilakukan dengan cara mencocokkan kesamaan ciri dari serbuk biji yang digunakan pada sebelumnya. Hasil dari determinasi membuktikan bahwa serbuk tersebut benar serbuk biji Persea americana Mill.

  2. Penetapan kadar air serbuk biji Persea americana Mill.

  Penetapan kadar air serbuk biji Persea americana Mill. bertujuan untuk mengetahui kadar air dalam serbuk biji Persea americana Mill., sehingga dapat diketahui apakah serbuk biji Persea americana Mill. memenuhi persyaratan yang ditetapkan. Persyaratannya adalah bila serbuk memiliki kadar air kurang dari 10% (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995). Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Gravimetri dengan menggunakan alat moisture

  

balance . Serbuk yang akan digunakan dipanaskan di dalam alat pada suhu 105 ºC

  selama 15 menit. Digunakan suhu 105 °C dengan maksud supaya kandungan air telah menguap dan waktu 15 menit dianggap bahwa kadar air dalam serbuk daun

  

Persea americana Mill. telah memenuhi persyaratan parameter standarisasi non

  spesifik. Hasil perhitungan menunjukkan bahwa serbuk biji Persea americana Mill. memiliki kadar air 7,4%. Hal ini menyatakan bahwa serbuk biji Persea americana Mill. memenuhi persyaratan kadar air yang ditetapkan.

  

3. Hasil penimbangan bobot ekstrak metanol-air biji Persea americana

Mill.

  Pembuatan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill.menggunakan metode ekstraksi maserasi. Metode ini dipilih karena proses pengerjaan dan peralatan yang digunakan sederhana. Metode maserasi digunakan untuk mengekstrak simplisia dimana zat aktif yang terkandung di dalamnya mudah larut karena berdasarkan penelitian yang pernah dilakukan menunjukkan penyarian biji

  

Persea americana Mill. dengan menggunakan cairan penyari metanol : air (70:30)

  dapat memiliki khasiat sebagai antioksidan. Dari penelitian tersebut diharapkan penyarian biji Persea americana Mill. dengan penyari metanol : air (70:30) juga memiliki efek sebagai hepatoprotektif. Parameter standarisasi ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dilihat dari bobot tetap pengeringan yaitu selisih penimbangan < 0,5 mg tiap gram zat sisa dari 2 penimbangan berturut-turut. Ekstrak dalam cawan ditimbang setiap satu jam hingga bobot tetap. Selisih bobot antara 2 penimbangan pada penetapan bobot tetap ekstrak metanol-air biji Persea

  

americana Mill. sebesar 0% menunjukkan pelarut penyari ekstrak sudah tidak

  ada. Hasil menunjukkan bahwa sebanyak 200 g serbuk kering biji Persea

americana Mill. menghasilkan 53,1 g ekstrak kental, dengan rendemen 26,55 %.

B. Uji Pendahuluan

1. Penentuan dosis hepatotoksin karbontetraklorida Pada penelitian ini digunakan karbontetraklorida sebagai hepatotoksin.

  Tujuan dari penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida adalah untuk menentukan dosis karbon tetraklorida yang dapat menyebabkan kerusakan hati tikus yang ditunjukkan dengan peningkatan aktivitas ALT-AST yang tertinggi. Peningkatan ALT yang dapat menyebabkan kerusakan hati (steatosis) mencapai tiga kali lipat terhadap kontrol, sedangkan peningkatan aktivitas GPT mencapai empat kali lipat terhadap kontrol (Zimmerman, 1999). Dosis yang digunakan pada penelitian ini mengacu dari penelitian Janakat dan Al-Merie (2002), yaitu pada

2. Penentuan waktu pencuplikan darah hewan uji

  Penentuan waktu pencuplikan darah bertujuan untuk mengetahui selang waktu karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB mencapai efek hepatotoksin yang paling maksimal. Hal ini ditunjukkan dengan peningkatan aktivitas ALT-AST serum tertinggi pada selang waktu tertentu.

  Karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB diujikan pada tikus jantan, kemudian dilakukan pengambilan cuplikan darah melalui sinus orbitalis mata dengan selang waktu tertentu yaitu jam ke-0, 24, dan 48. Hasil uji ini berupa aktivitas ALT yang tersaji pada Tabel. III, IV dan Gambar 2.

  

Tabel. III Rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah induksi karbon tetraklorida

  dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 (n = 3) Selang waktu pencuplikan (jam) Purata aktivitas serum ALT ± SE (U/L)

  68,0±9,6 24 203,3±15,9 48 54,7±5,5

  

Gambar 2. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah induksi

  Data serum ALT hasil dari analisis pola searah (One Way ANOVA) setelah terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB menunjukkan nilai signifikansi 0,000 (p<0,05). Hasil ini menunjukkan bahwa antara ketiga kelompok terdapat perbedaan, sehingga dapat dilanjutkan ke uji Scheffe agar dapat diketahui kebermaknaan perbedaan antar kelompok. Data tersaji pada Tabel IV.

  

Tabel IV. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus setelah induksi karbon

  tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 Waktu pencuplikan Jam ke-0 Jam ke-24 Jam ke-48

  • Jam ke-0 B TB
  • Jam ke-24 B B - Jam ke-48 TB B Keterangan : B = Berbeda bermakna (P ≤ 0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p>0,05)

  Nilai normal serum ALT pada tikus normal adalah 29,8-77,0 U/l sedangkan nilai normal serum AST sebesar 19,3-68,9 U/l (Hastuti, 2008). Pada tabel III, terlihat aktivitas ALT yang paling tinggi pada jam ke 24, yakni 203,3±15,9 U/l yang memberikan peningkatan ALT yang signifikan dan berbeda bermakna dibandingkan dengan jam ke 0 dan 48 (Tabel III). Aktivitas tersebut mengalami penurunan pada jam ke 48 (54,7±5,5 U/l), yang berbeda tidak bermakna terhadap jam ke 0. Ini berarti aktivitas ALT pada jam ke 48 sudah kembali normal.

  Hasil uji aktivitas AST setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB diujikan pada tikus jantan, kemudian dilakukan pengambilan cuplikan darah melalui sinus orbitalis mata dengan selang waktu tertentu yaitu jam ke-0, 24, dan 48 tersaji pada tabel V, VI, dan gambar 3.

  

Tabel. V Rata-rata aktivitas serum AST tikus setelah induksi karbon tetraklorida

  dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 Selang waktu pencuplikan (jam) Purata aktivitas serum AST ± SE (U/L)

  88,3±3,8 24 446,3±19,3 48 147,3±7,5

  

Gambar 3. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus setelah induksi

  karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada pencuplikan darah jam ke-0, jam ke- 24, dan jam ke-48

  Hasil analisis statistik serum AST dengan uji Kolmogorov Smirnov setelah terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kg BB menunjukkan bahwa distribusi normal dengan nilai signifikansi p>0,05 sehingga dapat dilanjutkan ke analisis variansi pola searah (One Way ANOVA) dan memiliki nilai signifikansi 0,000 (p< 0,05). Hasil ini menunjukkan bahwa antara ketiga kelompok terdapat perbedaan. Untuk mengetahui kebermaknaan perbedaan antar kelompok

  

Tabel VI. Hasil uji Scheffe aktivitas serum AST tikus setelah induksi karbon

  tetraklorida dosis 2 ml/kg BB pada pencuplikan darah jam ke-0, jam ke-24, dan jam ke-48 (n=3) Waktu pencuplikan Jam ke-0 Jam ke-24 Jam ke-48

  • Jam ke-0 B B - Jam ke-24 B B Jam ke-48
  • B B Keterangan : B = Berbeda bermakna (P ≤ 0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p>0,05)

  Dari tabel V dan gambar 3, terlihat aktivitas AST paling tinggi terjadi pada jam ke 24, yakni 446,3±19,3 U/l, yang memberikan adanya peningkatan AST yang signifikan menunjukkan adanya perbedaan bermakna antara jam ke 0 dan 48 (Tabel V). Seperti halnya aktivitas ALT, aktivitas AST pada jam ke 48 juga mengalami penurunan dan memberikan perbedaan bermakna terhadap jam ke 0 dan 24. Hal ini berarti aktivitas AST pada jam ke 48 sudah mengalami penurunan (147,3±7,5 U/l) walau belum sampai keadaan normal. Berdasarkan hasil tersebut maka pada penelitian ini menggunakan waktu pencuplikan darah pada jam ke 24 setelah pemberian karbon tetraklorida.

3. Penetapan lama pemejanan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill.

  Dalam penelitian efek hepatoprotektif ekstrak metanol-air daun

  

Macaranga tanarius terhadap tikus terinduksi parasetamol, menjelaskan bahwa

  praperlakuan ekstrak metanol-air daun M. tanarius jangka panjang pada kelompok hewan uji diberikan selama enam hari dan pada hari ke 7 diberikan hepatotoksin menurut model penelitian Kurniawati, dkk (2011).

  Penelitian ini didasarkan pada model penelitian Kurniawati, dkk (2011) Mill. mengikuti model pemberian praperlakuan selama enam hari dan pada hari ke 7 diberi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB.

4. Penetapan dosis ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill.

  Tujuan dari penetapan dosis ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. adalah untuk menentukan tingkatan dosis ekstrak metanol-air biji Persea

  

americana Mill. yang akan digunakan dalam penelitian ini. Penentuan dosis

  ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. didasarkan pada dosis maksimal ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. pada tikus. Dosis maksimal ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. pada tikus didasarkan pada konsentrasi tertinggi ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill.

  Konsentrasi yang dapat digunakan adalah konsentrasi pekat yang dapat dibuat dimana pada konsentrasi tersebut ekstrak dapat dimasukkan serta dikeluarkan dari spuit oral. Dari hasil orientasi diketahui bahwa konsentrasi tertinggi ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. yang dapat dipejankan secara oral pada tikus adalah 70 mg/ml sehingga diperoleh dosis maksimal 1400 g/kgBB. Kemudian ditentukan tiga tingkatan dosis ekstrak metanol-air biji Persea

  americana Mill., yaitu 350; 700; dan 1400 mg/kgBB.

C. Hasil Uji Efek Hepatoprotektif Pemberian Ekstrak Metanol-Air biji

  Persea americana Mill

  Tujuan dari uji efek hepatoprotektif ekstrak metanol-air biji Persea

  

americana Mill. pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida adalah

  mengetahui pengaruh waktu protektif pemberian ekstrak metanol-air biji Persea Mill didasarkan pada penurunan aktivitas ALT dan AST akibat

  americana selama enam hari secara per oral berturut-turut terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB.

  Data hasil dari aktivitas serum ALT dianalisis dengan uji Kruskal-Wallis menunjukkan nilai signifikansi 0,000 (< 0,05) yang berarti hasil ini menunjukkan bahwa antar kelompok terdapat perbedaan. Untuk mengetahui kebermaknaan perbedaan antar kelompok digunakan uji Man Whitney. Untuk data aktivitas serum AST setelah dianalisis dengan uji Kruskal-Wallis menunjukkan nilai signifikansi 0,000 (< 0,05) yang berarti hasil ini menunjukkan bahwa antar kelompok terdapat perbedaan. Untuk mengetahui kebermaknaan perbedaan antar kelompok digunakan uji Man Whitney Hasil penelitian aktivitas ALT dan AST (U/l) disajikan dalam bentuk purata ± SE pada tabel VII, VIII, dan IX serta diagram batang gambar 4 dan 5.

  

Tabel VII. Purata ± SE aktivitas ALT dan AST tikus praperlakuan ekstrak metanol-air

biji Persea americana Mill. terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB (n=5)

Aktivitas Efek Daya

  Purata ± SE Purata ± SE Hepatoprotek- Hepatopro- Kel Perlakuan tif (%)* tektif (%)**

(U/L) ALT (U/L) AST

  Kontrol hepatotoksin I 183,2±5,1 476,8±14,3 - - CCl 2ml/kg BB

4 Kontrol negatif olive oil

  II 47,6±2,0 60,2±2,4 100,0 - 2 ml/kgBB EMBPA 1400 mg/kgBB

  III 45,6±0,9 80,8±2,0 - - (kontrol ekstrak) ®

  Kontrol positif Curliv

  IV 105,4±7,4 377,0±15,3 57,4 100,0 4,05 ml/kgBB EMBPA 1400 mg/kgBB

V 52,2±0,7 156,8±2,4 96,6 168,4

  • CCl 4 2ml/kgBB EMBPA 700 mg/kgBB +

  VI 65,0±2,2 267,4±6,7 87,2 151,9 CCl 2ml/kgBB

  4 EMBPA 350 mg/kgBB +

  VII 76,6±2,0 321,2±6,9 78,6 137,0 CCl 2ml/kgBB

  4 Keterangan : EMBPA = Ekstrak Metanol-Air Biji Persea americana Mill.

  (*) diperoleh dari penurunan aktivitas ALT pada kelompok perlakuan

(**) diperoleh dari penurunan aktivitas Alt pada kelompok perlakuan dibandingkan

  • CCl
  • CCl

  • CCl
    • B B B B B B Kontrol negatif

  • CCl
  • CCl
  • CCl

  4 2ml/kgBB B B B B B B -

  EMBPA 350 mg/kgBB

  4 2ml/kgBB B B B B B - B

  EMBPA 700 mg/kgBB

  4 2ml/kgBB B TB B B - B B

  1400 mg/kgBB

  4,05 ml/kgBB B B B - B B B EMBPA

  Curliv ®

  B TB - B B B B Kontrol positif

  1400 mg/kgBB (kontrol ekstrak)

  2 ml/kgBB B - TB B TB B B EMBPA

  olive oil

  4 2ml/kg BB

  4 2ml/kg BB

  Kontrol hepatotok- sin CCl

  EMBPA 350 mg/kgBB

  4 2ml/kg BB

  EMBPA 700 mg/kgBB

  4 2ml/kg BB

  EMBPA 1400 mg/kgBB

  ® 4,05 ml/kgBB

  (kontrol ekstrak) Kontrol positif Curliv

  2 ml/kg BB EMBPA 1400 mg/kg BB

  Kontrol negatif olive oil

  4 2ml/kg BB

  Kelompok Perlakuan Kontrol hepato- toksin CCl

  pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada kelompok perlakuan

  

Tabel VIII. Hasil uji statistik uji Man Whitney aktivitas ALT tikus setelah

  Keterangan : B = Berbeda bermakna ( p≤ 0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p> 0,05) EMBPA = Ekstrak Metanol-Air Biji Persea americana Mill

  

Gambar 4. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus praperlakuan

  ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill 1 x sehari selama 6 hari terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB Keterangan : B = Berbeda bermakna ( p≤ 0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p> 0,05) EMBPA = Ekstrak Metanol-Air Biji Persea americana Mill

  4 2ml/kgBB B B B B B B -

  4 2ml/kg BB

  EMBPA 350 mg/kgBB + CCl

  4 2ml/kgBB B B B B B - B

  EMBPA 700 mg/kgBB + CCl

  4 2ml/kgBB B B B B - B B

  1400 mg/kgBB + CCl

  4,05 ml/kgBB B B B - B B B EMBPA

  Curliv ®

  B B - B B B B Kontrol positif

  1400 mg/kgBB (kontrol ekstrak)

  2 ml/kgBB B - B B B B B EMBPA

  oil

  4 2ml/kg BB

  Kontrol hepatotok- sin CCl

  EMBPA 350 mg/kgBB

  4 2ml/kg BB

  EMBPA 700 mg/kgB B + CCl

  4 2ml/kg BB

  1400 mg/kgBB

  4,05 ml/kg BB EMBPA

  Curliv ®

  BB (kontrol ekstrak) Kontrol positif

  • CCl

  BB EMBPA 1400 mg/kg

  Kontrol negatif olive oil 2 ml/kg

  4 2ml/kg BB

  Kelompok Perlakuan Kontrol hepato- toksin CCl

  pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada kelompok perlakuan

  

Tabel IX. Hasil uji statistik uji Man Whitney aktivitas AST tikus setelah

  • CCl
    • B B B B B B Kontrol negatif olive

  

Gambar 5. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus praperlakuan

  ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. 1 x sehari selama 6 hari terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB

1. Kontrol negatif olive oil dosis 2 ml/kgBB

  Tujuan dari pengujian kontrol negatif (kelompok III) adalah untuk memastikan bahwa peningkatan aktivitas serum ALT-AST pada tikus akibat dari efek hepatotoksin karbon tetraklorida dan bukan karena pemberian olive oil yang digunakan sebagai pelarut karbon tetraklorida. Dosis olive oil yang diberikan sama dengan dosis karbon tetraklorida yakni 2 ml/kgBB bertujuan untuk mengetahui apakah dengan dosis sama, olive oil memberikan pengaruh terhadap peningkatan kadar serum ALT-AST atau tidak.

  

Tabel. X Perbandingan kontrol olive oil jam ke-0 dan jam ke-24 pada serum ALT

  dan serum AST tikus Perbandingan terhadap

  Kel Purata ± Serum ALT

  Perlakuan

SE (U/L)

  Olive oil jam ke-0 Olive oil jam ke-24 Olive oil

  • I 41,6±1,12 B jam ke-0

  Olive oil

  II 47,6±2,0 B - jam ke-24 Serum AST

  Olive oil jam ke-0 Olive oil jam ke-24 Olive oil

  III

  • 50,2±2,2 B jam ke-0

  Olive oil

  IV

  • 60,2±2,4 B jam ke-24

  Keterangan : B = Berbeda bermakna (P ≤ 0,05) TB = Berbeda tidak bermakna (p>0,05)

  

Gambar 6. Diagram batang rata-rata perbandingan serum ALT kontrol olive oil jam

ke-0 dan kontrol olive oil jam ke-24

  

Gambar 7. Diagram batang rata-rata perbandingan serum AST kontrol olive oil jam

ke-0 dan kontrol olive oil jam ke-24

  Berdasarkan hasil pengukuran serum ALT-AST yang terlihat pada tabel X dan gambar 6 dan 7, aktivitas serum ALT-AST kontrol negatif olive oil pada jam ke 0 berturut-turut adalah 41,6±1,12 dan 50,2±2,2 U/l. Pada pengujian ini didapat aktivitas serum ALT-AST kontrol negatif olive oil pada jam ke 24 sebesar 47,6±2,0 dan 60,2±2,4 U/l (Tabel X).

  Secara statistik, apabila aktivitas serum ALT-AST antara kontrol negatif

  

olive oil 2 ml/kgBB jam ke 24 dibandingkan dengan jam ke 0 memberikan

  perbedaan yang bermakna (p≤0,05), hal ini berarti olive oil sebagai pelarut karbon tetraklorida tidak memberikan pengaruh terhadap aktivitas serum ALT-AST

  (Tabel X).

  Hasil pengukuran terhadap aktivitas serum ALT-AST menunjukkan aktivitas serum ALT-AST, artinya apabila pada kelompok kontrol maupun perlakuan terjadi peningkatan terhadap aktivitas serum ALT-AST bukan karena penggunaan olive oil sebagai pelarut. Nilai serum ALT-AST kelompok kontrol negatif ini akan dijadikan dasar nilai normal serum ALT-AST penelitian selanjutnya.

2. Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB

  Tujuan dari uji kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB (Kelompok I) adalah mengetahui pengaruh pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB terhadap sel hati tikus yang ditunjukkan dengan peningkatan aktivitas serum ALT dan AST. Selain itu, kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB digunakan untuk patokan dalam menganalisis efek hepatoprotektif dari ekstrak metanol-air Persea americana Mill.. Uji dilakukan dengan cara memejankan karbon tetraklorida 2 ml/kgBB secara intraperitonial pada tikus, hal ini berdasarkan penelitian Janakat dan Al-Merie (2002). Kemudian pada jam ke- 24 diambil darahnya untuk diukur aktivitas serum ALT dan AST.

  Pada hasil pengukuran yang dapat dilihat pada tabel V, menunjukkan aktivitas serum ALT kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB adalah 183,2±5,1 U/l. Hasil ini bila dibandingkan dengan kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB (Kelompok II) sebesar 47,6±2,0 U/l, kemudian data dianalisis dengan uji lanjutan uji Man Whitney maka secara statistik menunjukkan perbedaan bermakna (p<0,05) antara kedua kelompok tersebut (Tabel VIII). Parameter utama terjadinya kerusakan hati adalah aktivitas serum ALT. Hasil pengukuran ini menunjukkan terjadi kenaikan serum ALT mencapai tiga kalinya dari nilai normal serum ALT tikus. Berdasarkan Zimmerman (1999), disebutkan bahwa kenaikan nilai serum ALT akibat pemejanan karbon tetraklorida adalah tiga kalinya. Hal ini dapat diartikan hasil penelitian sudah sesuai dengan teori.

  Hasil pengukuran aktivitas serum AST kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB yaitu sebesar 476,8±14,3 U/l. Hasil ini bila dibandingkan dengan serum AST kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB sebesar 60,2±2,4 U/l memberikan perbedaan yang bermakna (p<0,05). Dengan adanya kenaikan rata- rata serum ALT dan serum AST membuktikan bahwa karbon tetraklorida 2 ml/kgBB memiliki efek hepatotoksik pada tikus jantan.

  Hasil serum ALT menunjukkan terjadi kerusakan ringan sel hati tikus, yaitu steatosis. Menurut Zimmerman (1999), nilai serum ALT kerusakan hati ringan steatosis meningkat mencapai tiga kali lipat terhadap nilai normal dan nilai serum AST mencapai empat kali lipat terhadap nilai normal. Berdasarkan penelitian Janakat dan Al-Merie (2002), kenaikan aktivitas serum AST mencapai 695 U/l. Hasil penelitian menunjukkan serum AST yang meningkat sebesar 596,20 ± 25,3 U/l.

  

3. Kontrol ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 1400

mg/kgBB

  Tujuan dilakukannya perlakuan kontrol ekstrak metanol-air biji Persea

  

americana Mill. (Kelompok III) adalah melihat pengaruh pemberian ekstrak

  metanol-air biji Persea americana Mill. terhadap sel hati tikus tanpa induksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB. Pada perlakuan ini menggunakan dosis terbesar ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. yaitu 1400 mg/kgBB dengan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dari dosis rendah 350 mg/kgBB hingga dosis tertinggi 1400 mg/kgBB.

  Terlihat pada tabel VII, kontrol perlakuan serum ALT kontrol ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 1400 mg/kgBB memberikan aktivitas sebesar 45,6±0,9 U/l. Bila dibandingkan dengan aktivitas serum ALT kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB sebesar 47,6±2,0 U/l, setelah data dianalisis dengan analisis uji lanjutan uji Man Whitney, maka terlihat angka aktivitas yang memiliki perbedaan tidak bermakna (p>0,05). Bila dibandingkan dengan kelompok hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB menunjukkan perbedaan bermakna seperti pada tabel VII. Hal ini menggambarkan bahwa ekstrak metanol- air biji Persea americana Mill. tidak memberikan pengaruh hepatotoksik pada sel hati tikus.

  Pengukuran aktivitas serum AST kontrol ekstrak metanol-air biji Persea

  

americana Mill. yang tersaji pada tabel VII adalah 80,8±2,0 U/l. Secara statistik,

  bila dibandingkan dengan aktivitas serum AST kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB sebesar 60,2±2,4 U/l terdapat perbedaan bermakna (p≤0,05). Terjadinya peningkatan aktivitas serum AST kontrol ekstrak metanol-air biji Persea

  

americana Mill. bisa terjadi akibat kerja otot rangka atau jantung karena enzim

  aspartate di dalam tubuh, sebagian besar tidak spesifik berada di dalam hati saja, tetapi berada dalam otot rangka, jantung, serta tersebar ke seluruh jaringan tubuh.

  ® 4. dosis 4,05 ml/kgBB Kontrol positif Curliv

  ®

  Tujuan dilakukan perlakuan Kontrol positif Curliv adalah untuk

  ® pada hati terinduksi karbon tetraklorida. Bila dibandingkan, secara statistik aktivitas serum ALT ( tabel VIII dan gambar 4) dan serum AST (tabel IX dan

  ®

  gambar 5) kelompok kontrol Curliv dosis 4,05 ml/kgBB memiliki perbedaan bermakna terhadap aktivitas serum ALT-AST kelompok kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB dan kelompok kontrol ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 1400 mg/kgBB. Pada tabel VII menunjukkan aktivitas serum ALT

  ®

  kelompok Curliv yaitu 105,4±7,4 U/l memiliki perbedaan bermakna dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB sebesar 183,2±5,1 U/l.

  Aktivitas serum AST (tabel VII) yang digunakan sebagai data pendukung juga

  ®

  memberikan perbedaan bermakna antara kelompok kontrol Curliv dosis 4,05 ml/kgBB yaitu sebesar 377,0±15,7 U/l dan kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB yaitu sebesar 476,8±14,3 U/l. Hal ini menunjukkan bahwa

  ®

  praperlakuan Curliv selama enam hari berturut-turut memiliki kemampuan hepatoprotektif karena mampu menurunkan aktivitas serum ALT-AST terhadap hewan uji terinduksi karbon tetraklorida walau belum sampai pada keadaan normal.

5. Kelompok perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill.

  dosis 350; 700; dan 1400 mg/kg BB pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB

  Pada kelompok perlakuan ini dilakukan dengan memberikan praperlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 350; 700; dan 1400 mg/kgBB selama enam hari dan pada hari ke 7 diberi karbon tetraklorida

  

Persea americana Mill. pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida

  didasarkan pada ada tidaknya penurunan aktivitas serum ALT-AST akibat praperlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill.. Tabel VII menunjukkan bahwa ada kekerabatan dosis dengan respon yang muncul yang dapat dilihat dari semakin besar dosis praperlakuan ekstrak metanol-air biji

  

Persea americana Mill. yang diberikan, maka semakin besar efek hepatoprotektif.

  Hal ini berarti semakin besar perlindungan yang diberikan pada sel hati tikus, terbukti dengan terjadinya penurunan aktivitas serum ALT-AST tikus.

  Kelompok V perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 1400 mg/kgBB aktivitas serum ALT sebesar 52,2±0,7 U/l. Bila dibandingkan dengan kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB secara statistik terdapat perbedaan bermakna (Tabel VII). Aktivitas serum ALT kelompok V memberikan perbedaan tidak bermakna (p>0,05) terhadap kelompok kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB. Sedangkan pada aktivitas serum AST kelompok V terhadap kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB memberikan perbedaan bermakna secara statistik. Aktivitas serum AST pada kelompok V dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB secara statistik berbeda bermakna. Hal ini berarti ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 1400 g/kgBB memberikan efek hepatoprotektif.

  Kelompok VI perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 700 mg/kgBB aktivitas serum ALT sebesar 65,0±2,2 U/l. Bila dibandingkan dengan kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB maupun

  (Tabel VII). Hal yang sama juga terlihat pada aktivitas serum AST pada kelompok VI dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB maupun kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB secara statistik terdapat perbedaan bermakna (Tabel VII). Hal ini berarti ekstrak metanol-air biji Persea

  

americana Mill. memiliki efek hepatoprotektif, namun kerusakan yang

  ditimbulkan belum bisa kembali seperti keadaan normal. Hal ini kemungkinan terjadi karena kandungan antioksidan pada dosis tengah yaitu 700 mg/kgBB belum cukup untuk menurunkan aktivitas serum ALT-AST akibat induksi karbon tetraklorida.

  Kelompok VII perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 350 mg/kgBB aktivitas serum ALT sebesar 76,6±2,0 U/l. Bila dibandingkan dengan kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB secara statistik terdapat perbedaan bermakna (Tabel VII). Aktivitas serum ALT kelompok VII memberikan perbedaan bermakna terhadap kelompok kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB. Hal yang sama juga terlihat pada aktivitas serum AST pada kelompok VII dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 ml/kgBB berbeda bermakna secara statistik. Begitu juga dengan serum AST kelompok VII terhadap kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB. Hal ini berarti ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. memiliki efek hepatoprotektif, namun kerusakan yang ditimbulkan belum bisa kembali seperti keadaan normal. Hal ini kemungkinan terjadi karena kandungan antioksidan pada dosis terendah yaitu 350 mg/kgBB belum cukup untuk menurunkan aktivitas serum ALT-AST akibat sehingga diartikan bahwa kelompok V mampu melindungi sel hati dari induksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB.

  Kelompok perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 1400 mg/kgBB (Kelompok V) merupakan kelompok yang memiliki tingkat kerusakan hati paling rendah yang memberikan perbedaan serum ALT bermakna terhadap kelompok perlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 350 dan 750 mg/kgBB (Tabel VII). Hal ini kemungkinan karena jumlah kandungan zat aktif antioksidan dalam ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 350 dan 700 mg/kgBB belum cukup memberikan efek hepatoprotektif hingga keadaan normal pada hewan uji yang terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB. Selain itu, karena penggunaan penyari kombinasi metanol : air (70:30) dimana belum diketahui secara pasti kandungan metabolit sekunder yang terdapat pada biji Persea americana Mill. yang memiliki efek hepatoprotektif yang dapat larut dan tertarik dari ekstrak tersebut, sehingga kemungkinan mempengaruhi penggunaan dosis ekstrak 350 dan 700 mg/kgBB karena dimungkinkan bahwa kandungan dalam kombinasi tersebut akan menurunkan aktivitas penangkapan radikal bebas. Dengan demikian, perlu dilakukan pengembangan lebih lanjut mengenai penggunaan penyari yang berbeda untuk dapat menarik senyawa yang mempunyai aktivitas penangkapan radikal bebas yang lebih kuat sehingga dapat menjangkau dosis ekstrak yang kecil. Ketiga dosis ekstrak metanol-air biji Persea

  

americana Mill. menunjukkan bahwa ada kekerabatan dosis dengan respon yang

  muncul terlihat dari semakin besar dosis praperlakuan ekstrak metanol-air biji

  Dosis optimum diperoleh dari ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dosis 1400 mg/kgBB karena pada dosis 1400 g/kgBB ini dapat menurunkan aktivitas serum ALT-AST yang paling besar dibandingkan dua dosis lainnya.

  Pada penelitian ini dari ketiga dosis memiliki kemampuan hepatoprotektif. Jika ketiga dosis tersebut dikonversikan untuk manusia, diketahui bahwa dosis terkecil yaitu 350 mg/kgBB yaitu 3,92 g/70kgBB manusia masih terlalu besar jika diberikan untuk manusia, karena itu pada penelitian ini disarankan perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai kemampuan hepatoprotektif ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dengan dosis yang lebih rendah.

  Potensi kemampuan hepatoprotektif ekstrak metanol-air biji Persea

  

americana Mill. dosis 350; 700; dan 1400 mg/kgBB apabila dibandingkan dengan

®

  kemampuan hepatoprotektif dari kontrol positif Curliv yang diasumsikan memiliki daya hepatoprotektif 100%, maka dosis 350; 700; dan 1400 mg/kgBB memiliki daya hepatoprotektif berturut-turut sebesar 168,4; 151,9 dan 137,0 %. Daya hepatoprotektif diperoleh dari penurunan aktivitas ALT pada kelompok perlakuan dibandingkan dengan penurunan aktivitas ALT pada kontrol positif

  ® Curliv .

  Keracunan CCl

  4 pada hati diawali dengan metabolisme dehalogenasi

  • reduktif oleh enzim sitokrom P450 menjadi suatu radikal bebas CCl

  3

  (triklorometil). Radikal bebas ini dapat berikatan secara kovalen dengan lemak dan protein, menyebabkan kerusakan struktur membran dan penghambatan

  • - -

  yang lain CCl

  3 OO (triklorometilperoksida). Selain itu, CCl 3 dapat mengikat

  asam lemak enoat membentuk radikal bebas organik yang dapat bereaksi dengan O

  

2 membentuk peroksida dan metabolit sitotoksik lainnya. Proses ini dikenal

  sebagai peroksidasi lemak. Penelitian menunjukkan bahwa antioksidan mengurangi sitotoksisitas CCl secara in vitro dan in vivo. Agen yang

  4

  menghambat pengikatan kovalen oleh CCl

  4 juga bersifat hepatoprotektif (Bruckner dan Warren, 2001).

  Kemungkinan mekanisme kerja kandungan antioksidan dalam biji Persea

  

americana Mill. memberikan efek hepatoprotektif adalah menangkap radikal

  bebas triklorometil (

  • CCl3) yang merupakan metabolit reaktif. Akibatnya serangkaian peristiwa yang akan menyebabkan steatosis pada hati akan terhenti.

  Perlu juga dilakukan penelitian dengan menggunakan model hepatotoksin lain seperti parasetamol untuk mengetahui efek hepatoprotektif dari ekstrak metanol- air biji Persea americana Mill. dan mengetahui dosis efektifnya dimana kerusakan yang terjadi berupa nekrosis sel hati karena terbentuknya metabolit NAPQI. Adanya kemungkinan mekanisme efek hepatoprotektif antioksidan dalam biji Persea americana Mill., maka dapat dilakukan uji selanjutnya untuk menunjang data penelitian sehingga dapat dilakukan pembuatan formulasi sediaan untuk pengembangan obat herbal.

D. Rangkuman Pembahasan

  Hasil penelitian menunjukkan bahwa praperlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. kelompok V dosis 1400 mg/kgBB, kelompok VI pengaruh pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida dengan cara menurunkan aktivitas serum ALT-AST. Ada kekerabatan dosis dengan respon yang muncul terlihat dari semakin besar dosis praperlakuan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. yang diberikan, maka semakin besar efek hepatoprotektif. Hal ini terbukti dari perolehan hasil purata ± SE aktivitas serum ALT dari dosis tinggi hingga rendah berturut-turut sebesar 52,2 ± 0,7; 65,0 ± 2,2; dan 76,6 ± 2,0 U/l. Sedangkan hasil purata ± SE untuk aktivitas serum AST berturut-turut adalah 156,8 ± 2,4; 267,4 ± 6,7; dan 321,2 ± 6,9 U/l. Hasil ini menjawab permasalahan pertama dalam penelitian ini yaitu pemberian ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. mempunyai pengaruh pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida dengan cara menurunkan aktivitas serum ALT-AST.

  Aktivitas serum ALT kelompok kontrol ekstrak metanol-air biji Persea

  

americana Mill. 1400 mg/kgBB secara statistik menunjukkan perbedaan yang

tidak bermakna dibandingkan kelompok kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB.

  Namun, aktivitas serum AST kelompok kontrol ekstrak metanol-air biji Persea

  

americana Mill. 1400 mg/kgBB terdapat perbedaan bermakna dibandingkan

  kelompok kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB. Dapat disimpulkan bahwa pemberian ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. tidak memberikan pengaruh terhadap sel hati tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB dan kenaikan serum ALT-AST akibat induksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB.

  Dosis optimum diperoleh dari ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill.

  Pada dosis 1400 g/kgBB ini dapat menurunkan aktivitas serum ALT-AST yang paling besar dibandingkan dua dosis lainnya.

  Kemungkinan mekanisme kerja kandungan antioksidan dalam biji Persea

  

americana Mill. dalam memberikan efek hepatoprotektif adalah menangkap

  radikal bebas triklorometil (

  • CCl3) yang merupakan metabolit reaktif. Akibatnya serangkaian peristiwa yang akan menyebabkan steatosis pada hati akan terhenti.

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan Berdasarkan hasil yang diperoleh dan analisis statistik yang telah

  dilakukan, maka dapat disimpulkan :

  1. Pemberian ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. pada dosis 1400; 700; dan 350 mg/kgBB mempunyai efek hepatoprotektif pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida berupa penurunan aktivitas serum ALT-AST.

  2. Dosis optimum hepatoprotektif ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida adalah sebesar 1400 mg/kgBB.

B. Saran

  Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang :

  1. Uji efek hepatoprotektif ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. pada tikus jantan terinduksi parasetamol.

  2. Perlu dilakukan pengembangan lebih lanjut mengenai penggunaan penyari yang berbeda untuk dapat menarik senyawa yang mempunyai aktivitas penangkapan radikal bebas yang lebih kuat.

  3. Perlu dilakukan penelitian efek hepatoprotektif ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. dengan dosis yang lebih rendah.

DAFTAR PUSTAKA

  Afrianti, L.H., 2010, Macam Buah-buahan untuk Kesehatan, Alfabeta, Bandung, pp. 33. Arukwe, U., Amadi, B.A., Duru, M. K.C., Agomuo,E.N., Adindu, E. A., Odika,

  P.C., 2012, Chemical Composition of Persea americana Leaf, Fruit and Seed, IJRRAS, 346-349. Bernardini, E. 1982, Vegetables Oil and Fats Processing, Vol. 1, Interstamps, Rome. Bombardelli, E. 1991, Technologies for The Processing of Medicinal Plants, In :

  R. O. B. Wijesekera, The Medicinal Plant Industry, CRC Press, Boca Raton, pp. 1991. Bruckner, J. V., and Warrren, D.A., 2001, Toxic Effects of Solvent amd Vapors in

  Klaassen,C. D., Casarett and

  Doull’s Toxicology The Basic Science of th

  Poison, 6 edition, Mc. Graw Hill Companies, Inc., New York, pp. 887.

  Cadman B. E., 2000, Adverse Effect of Drugs on The Liver, in Halber, R., and

  nd

  Edward, C., (Eds), Clinical Pharmacy and Theraupetics, (2 ) ed., Churchill Livingstone, Edinburgh, Pp. 183. Carpena, J. G. R, Morcuende, D., Andrade M. J., Kylli, P., and Estevez, M., 2011,

  Avocado (Persea americana Mill.) Phenolics, In Vitro Antioxidant and Antimicrobial Activities, and Inhibition of lipid and Protein Oxidation In Porcine Patties, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 5625-5635.

  nd

  Chandrasoma, P. and Taylor, C.R., 1995, Concise Pathology, 2 edition, Lavoisier Publising, New Jersey, pp. 620-622, 631-633, 641. Committee on Herbal Medicinal Products, 2013, Assessment report on Curcuma

  Roxb. (C. xanthorrhiza D. Dietrich)., Rhizome, Review

  xanthorrhiza article , European Medicines Agency, London, pp.2-22.

  Cooper, R. B., 1996, Disease (Penyakit), Jilid I Edisi I, Diterjemahkan oleh Mangku Sitepoe, PT. Gramedia, Jakarta, pp. 293-296. Ditjen POM,1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, Departemen Kesehatan RI, Jakarta, pp.31, 706. Donatus, I. A., 1992, Peran Fitofarmaka dalam Upaya Pengobatan Hepatitis, Kumpulan Naskah Lengkap Simposium Nasional Hepatitis, Yogyakarta.

  Edem, D.O., dan Akpanabiatu, M.I., 2006, Effects of palm oil-containing diets on enzyme activities of rats. Pakistan J. Nutr., 5 (4), pp.301- 305. Guyton, A.C., and Hall, J.,E., 1996, Textbook of Medical physiology, Edisi 9, CCV EGC, Jakarta, pp. 1103-1105. Guyton, A.C., 1983, Review of Medical Physiology, diterjemahkan oleh Adji Dharma, CV EGC, Jakarta, pp. 392-400. Hastuti, T., 2008, Aktivitas enzim Transaminase dan Gambaran Histopatologi

  Tikus yang Diberikan Kelapa Kopyor Pasca Induksi Parasetamol, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Laporan Penelitian, Institut Pertanian, Bogor.

  Houghton, P.J. dan Raman, A., 1998, Laboratory Handbook for The Fractionation of Natural Extrac, . Chapman and Hall, London. Isselbacher, K.J., dan Podolsky, D.K., 1995, Tes Diagnostik Pada Penyakit Hati,

  Harrison : Prinsip-Prinsip Ilmu Penyakit Dalam, alih bahasa oleh

  Ahmad H., Volume 4, 1655 – 1656, EGC Press, Jakarta. Janakat, S., dan Al-Merie, H., 2002, Optimization of the dose and route of injection, and characterization of the time course of carbon tetrachloride- induced hepatotoxicity in the rat, J. Pharm. Tox. Methods, 41-44,48. Kim, H. C., Ren, B. A., Gil, S. J., Jin, S. B., Seung, H. O., Hye, S. L., Ji, W. K.,

  Tae, O. K., Youn, C. K., 2006, Hepatoprotective Lignan Compound from Schizandrae Fructus on Tacrine Induced Cytotoxicity in Hep G2 Cells, Jurnal, Korean J., Orietal Physiology & Phatology, pp. 1282-1284. Klassen, C. D., 1995, Non Metalic Environmental Toxicants, Goodman and

  th

  Edition,

  

Gilman’s, The Pharmacological Basic Of Therapeutics, 9

McGraw-Hill, USA, pp. 1680-2681.

  Kurniawati, A.Y., Adrianto, E.E., dan Hendra, P., 2011, Uji Praklinik Ekstrak Metanol-Air Macaranga tanarius L. Kajian : Aktivitas Antiinflamasi dan Hepatoprotektif, Kongres Ilmiah dan Rapat Kerja Nasional IAI 2011, IAI, Manado.

  Lingappa, V.,R., 1995, Pathophysiology of Disease; An Introduction to Clinical

  st

Medicine , 1 ed, Appleton and Lange, Connecticut, pp. 245-247.

  Loomis, 1978, Toksikologi Dasar, Diterjemahkan oleh Imono Argo Donatus, Edisi 3, IKIP Semarang Press, Semarang, pp. 3,16,22,228-230.

  Lu, F.C., 1995, Toksikologi Dasar : Asas, Organ Sasaran, dan Penilaian Resiko,

  Edisi 2, Terj.dari Basic Toxicology : Fundamentals, Target Organs, and Risk Assesment, Alih bahasa : Edi Nugroho, UI Press, Jakarta, pp.

  210,217. Muray, K.R., Daryl, K. G., and Victor, W. R., 2009, Biokimia Harper, (Edisi ke-

  27, Terj. dari : Harpers Biochemistry, Alih bahasa : Andry Hartono, Penerbit Buku Kedokteran, Jakarta, pp. 308,349. Panigoro, R., Samsudin, S., Diah D., 2013, Comparison of Curcumin Level in

  Fresh and Decoction od Dried Curcuma xanthorrhiza Roxb. Rhizome,

  Jurnal , JK Welfare & Pharmascope Foundation, International Journal of Research in Pharmaceutical Sciences, pp. 256-259.

  Panjaitan, R.G.P, Handharyani, Chairul., Masriani., Zakiah, Z., Manalu, W., 2007, Pengaruh Pemberian Karbontetraklorida Terhadap Fungsi Hati dan Ginjal Tikus, Makara Kesehatan, Vol 11, pp. 1, 11-16.

  Price, S.A. and Wilson, L.M., 2005, Patofisiologi : Konsep Klinis Proses-Proses

Penyakit, Penerbit Buku Kedokteran, Jakarta, pp. 427, 475-477.

Purseglove, J.W., E.G. Brown, C.L. Green, S.R.J. Robins, 1981, Spices, Vol. 1, Longman Inc., New York.

  

Research Vol. 1 : Selection, Preparation and Pharmalogical Evaluation of Plant

Material, John Wiley & Sons, Cichester, England, pp. 49.

  Luper S., 1998, A review of plant used in the treatment of liver disease: Part 1.

  Alternative medicine review 3(6): 410-421.

  Stine, K.E. and Brown, T.M., 1996, Principles of Toxicology, CRC Press, Boca Raton, pp.149-153. Timbrell, J. A. 2008, Principles of Biochemical Toxicology, 4th Edition, Informa Healthcare, New York, pp.308-311. Wahyuni, S., 2005, Pengaruh Daun Sambiloto (Andrographis paniculata, Ness) Terhadap Kadar SGPT dan SGOT Tikus Putih, GAMMA, 1(1), pp. 45-53. Williamson, E.M., David, T.O., and Fred, J.E., 1996, Pharmacological Methods in Phytotherapy. Winarsi, H., 2007, Antioksidan Alami dan Radikal Bebas, Kanisius, Yogyakarta.

  Zimmerman, H. J., 1978, Hepatotoxicity, Apleton, Century Crofts, New York, pp.

  38,49,51. Zimmerman, H. J., 1999, Hepatotoxicity, 2nd edition, Lippincott Williams and Wilkins, Philadelphia, pp. 195-210.

  Zuhrotun, 2007, Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Biji Buah Alpukat (Persea americana Mill.) Bentuk Bulat, Laporan Penelitian, Universitas Padjajaran Bandung, Bandung.

  

LAMPIRAN

  

Lampiran 1. Foto serbuk biji Persea americana Mill.

  

Lampiran 2. Foto ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill.

  

Lampiran 3. Foto suspensi ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill.

dalam CMC-Na 1%

  Lampiran 4. Sirup Curliv Plus ®

  

Lampiran 5. Surat pengesahan determinasi serbuk biji Persea americana

Mill.

  

Lampiran 6. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics

Committee (MHREC)

  

Lampiran 7. Analisis statistik aktivitas serum ALT dan AST pada uji

pendahuluan penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2

ml/kgBB

NPar Tests (ALT)

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum jam_ke_0 3 68.0000 16.70329

  50.00

  83.00 One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test jam_ke_0 N

  3 Normal Parameters

  a

  Mean 68.0000 Std. Deviation 16.70329

  Most Extreme Differences Absolute .238 Positive .193 Negative -.238

  Kolmogorov-Smirnov Z .412

  Asymp. Sig. (2-tailed) .996 a. Test distribution is Normal.

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum jam_ke_24 3 2.0333E2 27.53785 185.00 235.00

  One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

  jam_ke_24 N

  3

  a

  Normal Parameters Mean 203.3333 Std. Deviation 27.53785

  Most Extreme Differences Absolute .353 Positive .353 Negative -.253

  Kolmogorov-Smirnov Z .611

  Asymp. Sig. (2-tailed) .850 a. Test distribution is Normal.

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum jam_ke_48 3 54.6667 9.45163

  44.00

  62.00 One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test jam_ke_48 N

  3

  a

  Normal Parameters Mean 54.6667 Std. Deviation 9.45163

  Most Extreme Differences Absolute .304 Positive .219 Negative -.304

  Kolmogorov-Smirnov Z .527 Asymp. Sig. (2-tailed) .944 a. Test distribution is Normal.

  NPar Tests (AST) Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum jam_ke_24 3 4.4633E2 33.50124 410.00 476.00

  Most Extreme Differences Absolute .246 Positive .194 Negative -.246

  Mean 446.3333 Std. Deviation 33.50124

  a

  3 Normal Parameters

  jam_ke_24 N

  One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum jam_ke_0 3 88.3333 6.50641

  Kolmogorov-Smirnov Z .324 Asymp. Sig. (2-tailed) 1.000 a. Test distribution is Normal.

  Most Extreme Differences Absolute .187 Positive .187 Negative -.181

  Mean 88.3333 Std. Deviation 6.50641

  a

  3 Normal Parameters

  95.00 One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test jam_ke_0 N

  82.00

  Kolmogorov-Smirnov Z .425 Asymp. Sig. (2-tailed) .994 a. Test distribution is Normal.

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum jam_ke_48 3 1.4733E2 13.01281 134.00 160.00

  One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

  jam_ke_48 N

  3 Normal Parameters

  a

  Mean 147.3333 Std. Deviation 13.01281

  Most Extreme Differences Absolute .187 Positive .181 Negative -.187

  Kolmogorov-Smirnov Z .324

  Asymp. Sig. (2-tailed) 1.000 a. Test distribution is Normal.

  Oneway (ALT-AST Serum)

Descriptives

  95% Confidence Interval for Mean

  Std. Lower Upper N Mean Deviation Std. Error Bound Bound Min Max

  ALT CCl4 Dosis 2ml/kg BB 3 68.0000 16.70329 9.64365 26.5067 109.4933 50.00

  83.00 jam ke-0 CCl4 Dosis 2ml/kg BB 3 2.0333E2 27.53785 15.89899 134.9255 271.7412 185.00 235.00 jam ke-24 CCl4 Dosis 2ml/kg BB 3 54.6667 9.45163 5.45690 31.1875 78.1458 44.00

  62.00 jam ke-48 Total 9 1.0867E2 73.18470 24.39490 52.4119 164.9214 44.00 235.00

  AST CCl4 Dosis 2ml/kg BB 3 88.3333 6.50641 3.75648 72.1705 104.4961 82.00

  95.00 jam ke-0 CCl4 Dosis 2ml/kg BB 3 4.4633E2 33.50124 19.34195 363.1116 529.5550 410.00 476.00 jam ke-24 CCl4 Dosis 2ml/kg BB 3 1.4733E2 13.01281 7.51295 115.0077 179.6590 134.00 160.00 jam ke-48 Total 9 2.2733E2 167.22515 55.74172 98.7927 355.8740 82.00 476.00

  Test of Homogeneity of Variances Levene Statistic df1 df2 Sig.

  ALT 2.732

  2 6 .143 AST 3.169

  2 6 .115

  

ANOVA

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

  ALT Between Groups 40594.667 2 20297.333 54.046 .000 Within Groups

  2253.333 6 375.556 AST Between Groups 221046.000 2 110523.000 248.552 .000 Within Groups

  2668.000 6 444.667 Total

  223714.000

  8 Post Hoc Tests

  

Multiple Comparisons

  Scheffe 95% Confidence

  Depen Interval dent Mean

  Variabl Difference Lower Upper e (I) kelompok (J) kelompok (I-J) Std. Error Sig. Bound Bound ALT CCl4 Dosis 2ml/kg CCl4 Dosis

  • BB jam ke-0 2ml/kg BB jam -135.33333 15.82310 .000 -186.0821 -84.5846 ke-24 CCl4 Dosis 2ml/kg BB jam 13.33333 15.82310 .715 -37.4154 64.0821 ke-48

  CCl4 Dosis 2ml/kg CCl4 Dosis

  • BB jam ke-24 2ml/kg BB jam 135.33333 15.82310 .000 84.5846 186.0821 ke-0 CCl4 Dosis
  • 2ml/kg BB jam 148.66667 15.82310 .000 97.9179 199.4154 ke-48

  CCl4 Dosis 2ml/kg CCl4 Dosis BB jam ke-48 2ml/kg BB jam -13.33333 15.82310 .715 -64.0821 37.4154 ke-0

  CCl4 Dosis

  • 2ml/kg BB jam -148.66667 15.82310 .000 -199.4154 -97.9179 ke-24

  AST CCl4 Dosis 2ml/kg CCl4 Dosis

  BB jam ke-0 2ml/kg BB jam -358.00000 17.21756 .000 -413.2212 302.7788 ke-24

  CCl4 Dosis

  • 2ml/kg BB jam -59.00000 17.21756 .039 -114.2212 -3.7788 ke-48

  CCl4 Dosis 2ml/kg CCl4 Dosis

  • BB jam ke-24 2ml/kg BB jam 358.00000 17.21756 .000 302.7788 413.2212 ke-0 CCl4 Dosis
  • 2ml/kg BB jam 299.00000 17.21756 .000 243.7788 354.2212 ke-48

  CCl4 Dosis 2ml/kg CCl4 Dosis

  • BB jam ke-48 2ml/kg BB jam 59.00000 17.21756 .039 3.7788 114.2212
CCl4 Dosis

  • 2ml/kg BB jam -299.00000 17.21756 .000 -354.2212

  243.7788 ke-24

  • . The mean difference is significant at the 0.05 level.

  Homogeneous Subsets ALT

  Scheffe Subset for alpha = 0.05 kelompok N

  1

  2 CCl4 Dosis 2ml/kg BB jam 3 54.6667 ke-48 CCl4 Dosis 2ml/kg BB jam 3 68.0000 ke-0 CCl4 Dosis 2ml/kg BB jam 3 203.3333 ke-24 Sig.

  .715 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

  AST

  Scheffe Subset for alpha = 0.05 kelompok N

  1

  2

  3 CCl4 Dosis 2ml/kg BB jam ke-0 3 88.3333 CCl4 Dosis 2ml/kg BB jam ke-48 3 1.4733E2 CCl4 Dosis 2ml/kg BB jam ke-24 3 4.4633E2 Sig.

  1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

  Means

Case Processing Summary

  Cases Included Excluded Total

  N Percent N Percent N Percent SGPT * kelompok 9 60.0% 6 40.0% 15 100.0%

  Report

  ALT Std. Error of kelompok Mean N Std. Deviation Mean

  CCl4 Dosis 2ml/kg BB jam 68.0000 3 16.70329 9.64365 ke-0

  CCl4 Dosis 2ml/kg BB jam 2.0333E2 3 27.53785 15.89899 ke-24

  CCl4 Dosis 2ml/kg BB jam 54.6667 3 9.45163 5.45690 ke-48

  Total 1.0867E2 9 73.18470 24.39490

  

Case Processing Summary

  Cases Included Excluded Total

  N Percent N Percent N Percent AST * kelompok 9 60.0% 6 40.0% 15 100.0% AST

  Std. Error of kelompok Mean N Std. Deviation Mean CCl4 Dosis 2ml/kg BB jam

  88.3333 3 6.50641 3.75648 ke-0 CCl4 Dosis 2ml/kg BB jam

  4.4633E2 3 33.50124 19.34195 ke-24 CCl4 Dosis 2ml/kg BB jam

  1.4733E2 3 13.01281 7.51295 ke-48 Total 2.2733E2 9 167.22515 55.74172

  

Lampiran 8. Analisis statistik aktivitas serum ALT perlakuan ekstrak

metanol-air biji Persea americana setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2

ml/kgBB

NPar Tests

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum kontrol_CCl4 5 1.8320E2 11.43241 168.00 197.00 kontrol_olive_oil 5 47.6000 4.39318

  43.00

  54.00 kontrol_ekstrak 5 45.6000 2.07364

  43.00

  48.00 kontrol_positif 5 1.0540E2 16.53179 89.00 131.00 dosis_1400 5 52.2000 1.48324

  50.00

  54.00 dosis_700 5 65.0000 4.84768

  60.00

  72.00 dosis_350 5 76.6000 4.56070

  73.00

  84.00 One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test Kontrol Kontrol Kontrol Kontrol Dosis Dosis Dosis

  CCl4 olive oil ekstrak positif 1400 700 350 N

  5

  5

  5

  5

  5

  5

  5 Normal Mean 183.200 47.6000 45.6000 105.4000 52.2000 65.000 76.600

  a

  Parameters Std. Deviation 11.4324 4.39318 2.07364 16.53179 1.48324 4.8476 4.5607

  Most Extreme Absolute .163 .242 .180 .273 .246 .195 .316 Differences

  Positive .136 .242 .180 .273 .154 .195 .316 Negative -.163 -.148 -.176 -.161 -.246 -.151 -.215

  Kolmogorov-Smirnov Z .363 .541 .402 .610 .551 .437 .706 Asymp. Sig. (2-tailed) .999 .931 .997 .851 .922 .991 .701 a. Test distribution is Normal.

  NPar Tests Descriptive Statistics

  28.00 EMBPA 1400 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  a. Kruskal Wallis Test

  6 Asymp. Sig. .000

  ALT Chi-Square 32.218 df

  a,b

  35 Test Statistics

  23.00 Total

  5

  18.00 EMBPA 350 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  12.00 EMBPA 700 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  5

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  5.00 kontrol positif curliv 4,05mg/kgBB

  5

  7.00 kontrol ekstrak 1400mg/kgBB

  5

  33.00 kontrol olive oil 2mL/kgBB

  5

  ALT kontrol CCl4 2mL/kgBB

  kelompok N Mean Rank

  

Ranks

  7.00 Kruskal-Wallis Test

  1.00

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol CCl4 2mL/kgBB

  5

  8.00

  40.00 kontrol olive oil 2mL/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00

  Mann-Whitney Test Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol CCl4 2mL/kgBB

  5

  8.00

  40.00 kontrol ekstrak 1400mg/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol CCl4 2mL/kgBB

  5

  8.00

  40.00 kontrol positif curliv 4,05mg/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10 ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol CCl4 2mL/kgBB

  5

  8.00

  40.00 EMBPA 1400 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.619 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol CCl4 2mL/kgBB

  5

  8.00

  40.00 EMBPA 700 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 Kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks ALT kontrol CCl4 2mL/kgBB

  5

  8.00

  40.00 EMBPA 350 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.619 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol olive oil 2mL/kgBB

  5

  6.00

  30.00 kontrol ekstrak 1400mg/kgBB

  5

  5.00

  25.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U 10.000 Wilcoxon W 25.000 Asymp. Sig. (2-tailed) .599

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .690 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol olive oil 2mL/kgBB

  5

  3.00

  15.00 kontrol positif curliv 4,05mg/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol olive oil 2mL/kgBB

  5

  4.00

  20.00 EMBPA 1400 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  7.00

  35.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U 5.000 Wilcoxon W 20.000 Z -1.581 Asymp. Sig. (2-tailed) .114

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .151 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00

  Mann-Whitney Test Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol olive oil 2mL/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 700 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol olive oil 2mL/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 350 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.619 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol ekstrak 1400mg/kgBB

  5

  3.00

  15.00 kontrol positif curliv 4,05mg/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol ekstrak 1400mg/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 1400 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.619 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00

  Mann-Whitney Test Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol ekstrak 1400mg/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 700 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol ekstrak 1400mg/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 350 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10 ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.619 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol positif curliv 4,05mg/kgBB

  5

  8.00

  40.00 EMBPA 1400 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.619 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol positif curliv 4,05mg/kgBB

  5

  8.00

  40.00 EMBPA 700 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00

  Mann-Whitney Test Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT kontrol positif curliv 4,05mg/kgBB

  5

  8.00

  40.00 EMBPA 350 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.619 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT EMBPA 1400 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 700 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10 ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.619 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT EMBPA 1400 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 350 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.627 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum ALT 35 82.2286 46.78240

  43.00 197.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks ALT EMBPA 700 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 350 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  ALT Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.619 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  Means Case Processing Summary

  Cases Included Excluded Total

  N Percent N Percent N Percent ALT * kelompok 35 100.0% .0% 35 100.0%

  

Report

  ALT kelompok Mean N Std. Deviation Std. Error of Mean kontrol CCl4 2mL/kgBB 1.8320E2 5 11.43241 5.11273 kontrol olive oil 2mL/kgBB 47.6000

  5 4.39318 1.96469 kontrol ekstrak 45.6000 5 2.07364 .92736

  1400mg/kgBB kontrol positif curliv 1.0540E2 5 16.53179 7.39324

  4,05mg/kgBB EMBPA 1400 mg/kgBB +

  52.2000 5 1.48324 .66332 CCl4 2ml/kgBB EMBPA 700 mg/kgBB +

  65.0000 5 4.84768 2.16795 CCl4 2ml/kgBB EMBPA 350 mg/kgBB +

  76.6000 5 4.56070 2.03961 CCl4 2ml/kgBB Total 82.2286 35 46.78240 7.90767

  

ANOVA Table

  Sum of Mean Squares df Square F Sig. ALT * Between (Combined) 72515.771 6 12085.962 178.447 .000 kelompok Groups

  Linearity 13840.457 1 13840.457 204.352 .000 Deviation from

  58675.314 5 11735.063 173.266 .000 Linearity

  Within Groups 1896.400 28 67.729 Total 74412.171

  34 Measures of Association R R Squared Eta Eta Squared

  Graph

Lampiran 9. Analisis statistik serum AST perlakuan ekstrak metanol-air biji

  

Persea americana Mill. setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB

NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum kontrol_CCl4 5 4.7680E2 31.87789 441.00 521.00 kontrol_olive_oil 5 60.2000 5.26308

  55.00

  69.00 kontrol_ekstrak 5 80.8000 4.38178

  76.00

  84.00 kontrol_positif 5 3.7700E2 34.22718 344.00 419.00 dosis_1400 5 1.5680E2 5.31037 149.00 163.00 dosis_700 5 2.6740E2 14.99333 252.00 288.00 dosis_350 5 3.2120E2 15.44992 303.00 336.00

  

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

  kontrol_ kontrol_ kontrol_ kontrol Dosis Dosis Dosis CCl4 olive_oil ekstrak positif 1400 700 350

  N

  5

  5

  5

  5

  5

  5

  5 Normal Mean 476.8000 60.2000 80.8000 377.0000 156.8000 267.4000 321.2000

  a

  Parameters Std.

  31.87789 5.26308 4.38178 34.22718 5.31037 14.99333 15.44992 Deviation

  Most Extreme Absolute .172 .315 .367 .225 .167 .289 .316 Differences

  Positive .172 .315 .263 .225 .129 .289 .237 Negative -.131 -.162 -.367 -.193 -.167 -.160 -.316

  Kolmogorov-Smirnov Z .385 .705 .822 .503 .374 .647 .706 Asymp. Sig. (2-tailed) .998 .703 .510 .962 .999 .797 .702

  a. Test distribution is Normal.

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Kruskal-Wallis Test

  Ranks

  Kelompok N Mean Rank AST kontrol CCl4 2mL/kgBB

  5

  33.00 kontrol olive oil 2mL/kgBB

  5

  3.00 kontrol ekstrak 1400mg/kgBB

  5

  8.00 kontrol positif curliv 4,05mg/kgBB

  5

  28.00 EMBPA 1400 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  13.00 EMBPA 700 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  18.00 EMBPA 350 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  23.00

  a,b Test Statistics

  AST Chi-Square 33.357 Df

  6 Asymp. Sig. .000

  a. Kruskal Wallis Test

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 Kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol CCl4 2mL/kgBB

  5

  8.00

  40.00 kontrol olive oil 2mL/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  

Ranks

  Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol CCl4 2mL/kgBB

  5

  8.00

  40.00 kontrol ekstrak 1400mg/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.652 Asymp. Sig. (2-tailed) .008

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00

  Mann-Whitney Test Ranks

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  15.00 Total

  3.00

  5

  40.00 EMBPA 1400 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  8.00

  5

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol CCl4 2mL/kgBB

  Ranks

  7.00 Mann-Whitney Test

  1.00

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  NPar Tests Descriptive Statistics

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol CCl4 2mL/kgBB

  b. Grouping Variable: kelompok

  a a. Not corrected for ties.

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008

  b

  10 Test Statistics

  15.00 Total

  3.00

  5

  40.00 kontrol positif curliv 4,05mg/kgBB

  8.00

  5

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol CCl4 2mL/kgBB

  5

  8.00

  40.00 EMBPA 700 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol CCl4 2mL/kgBB

  5

  8.00

  40.00 EMBPA 350 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00

  Mann-Whitney Test Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol olive oil 2mL/kgBB

  5

  3.00

  15.00 kontrol ekstrak 1400mg/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.652 Asymp. Sig. (2-tailed) .008

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol olive oil 2mL/kgBB

  5

  3.00

  15.00 kontrol positif curliv 4,05mg/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.652 Asymp. Sig. (2-tailed) .008

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol olive oil 2mL/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 1400 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol olive oil 2mL/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 700 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10 AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 Kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol olive oil 2mL/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 350 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00

  Mann-Whitney Test Ranks

  Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol ekstrak 1400mg/kgBB

  5

  3.00

  15.00 kontrol positif curliv 4,05mg/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.652 Asymp. Sig. (2-tailed) .008

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 Kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol ekstrak 1400mg/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 1400 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.652 Asymp. Sig. (2-tailed) .008

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol ekstrak 1400mg/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 700 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.652 Asymp. Sig. (2-tailed) .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol ekstrak 1400mg/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 350 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.652 Asymp. Sig. (2-tailed) .008

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00

  Mann-Whitney Test Ranks

  Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol positif curliv 4,05mg/kgBB

  5

  8.00

  40.00 EMBPA 1400 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol positif curliv 4,05mg/kgBB

  5

  8.00

  40.00 EMBPA 700 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol positif curliv 4,05mg/kgBB

  5

  8.00

  40.00 EMBPA 350 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST EMBPA 1400 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 700 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00

  Mann-Whitney Test Ranks

  Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST EMBPA 1400 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 350 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 35 2.4860E2 147.75062

  55.00 521.00 kelompok 35 4.0000 2.02920

  1.00

  7.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks AST EMBPA 700 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  3.00

  15.00 EMBPA 350 mg/kgBB + CCl4 2ml/kgBB

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: kelompok

  Means Case Processing Summary

  Cases Included Excluded Total

  N Percent N Percent N Percent AST * kelompok 35 100.0% .0% 35 100.0%

  

Report

  AST kelompok Mean N Std. Deviation Std. Error of Mean kontrol CCl4 2mL/kgBB 4.7680E2 5 31.87789 14.25623 kontrol olive oil 2mL/kgBB 60.2000

  5 5.26308 2.35372 kontrol ekstrak 1400mg/kgBB 80.8000 5 4.38178 1.95959 kontrol positif curliv 4,05mg/kgBB 3.7700E2 5 34.22718 15.30686

  EMBPA 1400 mg/kgBB 1.5680E2 5 5.31037 2.37487 EMBPA 700 mg/kgBB 2.6740E2 5 14.99333 6.70522 EMBPA 350 mg/kgBB 3.2120E2 5 15.44992 6.90941 Total 2.4860E2 35 147.75062 24.97441

  

ANOVA Table

  Sum of Squares df Mean Square F Sig. AST * kelompok

  Between Groups

  (Combined) 731323.200 6 121887.200 312.955 .000 Linearity 99.457 1 99.457 .255 .617 Deviation from Linearity

  731223.743 5 146244.749 375.495 .000 Within Groups 10905.200 28 389.471 Total 742228.400

  34 Measures of Association R R Squared Eta Eta Squared

  AST * kelompok .012 .000 .993 .985

  

Lampiran 10. Analisis statistik aktivitas serum ALT dan serum AST

perlakuan kontrol negatif olive oil dosis 2 ml/kgBB

ALT NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum jam_ke_0 5 41.6000 2.50998

  40.00

  46.00 jam_ke_24 5 47.6000 4.39318

  43.00

  54.00 One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test jam_ke_0 jam_ke_24 N

  5

  5

  a

  Normal Parameters Mean 41.6000 47.6000 Std. Deviation 2.50998 4.39318

  Most Extreme Differences Absolute .394 .242 Positive .394 .242 Negative -.262 -.148

  Kolmogorov-Smirnov Z .882 .541 Asymp. Sig. (2-tailed) .418 .931 a. Test distribution is Normal.

  Test of Homogeneity of Variances

  ALT Levene Statistic df1 df2 Sig.

  2.482

  1 8 .154

  T-Test Paired Samples Statistics

  Mean N Std. Deviation Std. Error Mean Pair 1 jam_ke_0 41.6000 5 2.50998 1.12250 jam_ke_24 47.6000

  5 4.39318 1.96469 N Correlation Sig. Pair 1 jam_ke_0 & jam_ke_24 5 .866 .058

  

Paired Samples Test

  Paired Differences 95% Confidence Interval of the Difference

  Std. Std. Error Sig. (2- Mean Deviation Mean Lower Upper t df tailed)

  Pair jam_ke_0 -

  • 6.00000 2.54951 1.14018 -9.16563 -2.83437 -5.262 4 .006 1 jam_ke_24

  Graph

  AST NPar Tests Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum jam_ke_0 5 50.2000 4.96991

  43.00

  54.00 jam_ke_24 5 60.2000 5.26308

  55.00

  69.00 One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test jam_ke_0 jam_ke_24 N

  5

  5

  a

  Normal Parameters Mean 50.2000 60.2000 Std. Deviation 4.96991 5.26308

  Most Extreme Differences Absolute .313 .315 Positive .222 .315 Negative -.313 -.162

  Kolmogorov-Smirnov Z .701 .705 Asymp. Sig. (2-tailed) .710 .703 a. Test distribution is Normal.

  Test of Homogeneity of Variances

  AST Levene Statistic df1 df2 Sig.

  .134

  1 8 .724

  T-Test Paired Samples Statistics

  Mean N Std. Deviation Std. Error Mean Pair 1 jam_ke_0 50.2000 5 4.96991 2.22261 jam_ke_24 60.2000

  5 5.26308 2.35372

  Paired Samples Correlations N Correlation Sig.

  Pair 1 jam_ke_0 & jam_ke_24 5 .543 .344

  Paired Samples Test

  Paired Differences 95% Confidence

  Interval of the Std.

  Difference Std. Error Sig. (2-

  Mean Deviation Mean Lower Upper t df tailed) Pair - jam_ke_0 -

  • 4.89898 2.19089 -16.08289

  4 .010 1 jam_ke_24 1.00000E1 3.91711 4.564

  Graph

  

Lampiran 11. Perhitungan efek hepatoprotektif

Rumus perhitungan efek hepatoprotektif :

  ( ) ( ) ( )

  Maka perhitungan efek hepatoprotektif ALT serum sebagai berikut :

   Kelompok perlakuan ekstrak metanol biji Persea americana Mill. dosis 1400 mg/kgBB + induksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB : ( ) ( )

  ( )  Kelompok perlakuan ekstrak metanol biji Persea americana Mill. dosis 700 mg/kgBB + induksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB :

  ( ) ( ) ( )

   Kelompok perlakuan ekstrak metanol biji Persea americana Mill. dosis 350 mg/kgBB + induksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB : ( ) ( )

  ( )

  

Lampiran 12. Perhitungan daya hepatoprotektif ekstrak metanol biji Persea

® americana Mill. dibandingkan dengan kontrol positif Curliv

  Rumus perhitungan daya hepatoprotektif : ( ) ( )

  ( ) Maka perhitungan daya hepatoprotektif ALT serum sebagai berikut :  Kelompok perlakuan ekstrak metanol biji Persea americana Mill. dosis 1400 mg/kgBB + induksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB :

  ( ) ( ) ( )

   Kelompok perlakuan ekstrak metanol biji Persea americana Mill. dosis 700 mg/kgBB + induksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB : ( ) ( )

  ( )  Kelompok perlakuan ekstrak metanol biji Persea americana Mill. dosis 350 mg/kgBB + induksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB :

  ( ) ( ) ( )

  

Lampiran 13. Perhitungan penetapan peringkat dosis ekstrak metanol-air

biji Persea americana Mill. kelompok perlakuan

  Dasar penetapan peringkat dosis:  Bobot tertinggi tikus = 250 g = 0,25 kg  Konsentrasi ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. yang digunakan 7% = 70 mg/mL.

   Pemberian cairan secara per oral maksimal 5 ml Dengan dasar tersebut maka ditetapkan dosis tertinggi dengan rumus : V x C = BB x D

  Keterangan : V = volume pemberian (mL) C = konsentrasi (mg/mL)

  BB = Berat badan (kg) D = Dosis (mg/kg) Volume Pemberian x Konsentrasi = Berat badan x Dosis 5 mL x 70 mg/mL = 0,25 kg x Dosis Dosis = 1400 mg/kgBB (dosis tertinggi) Untuk dua peringkat dosis di bawahnya, dosis tertinggi ini dibagi 2 kemudian dibagi 2 lagi sehingga diperoleh 3 peringkat dosis : 1400 (dosis I), 700 (dosis II) dan 350 (dosis III) mg/kgBB.

  

Lampiran 14. Perhitungan konversi dosis untuk manusia

   Angka konversi Tikus 200 g ke Manusia 70 kg = 56,0  Dosis untuk manusia = Dosis untuk tikus 200 g x (angka konversi ke manusia)

  Maka ditetapkan dosis ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill. :

  1. Dosis I (1400 mg/kgBB tikus) ekstrak metanol-air biji Persea americana : 1400 mg/kgBB = 280 mg/200 gBB 280 mg/200 gBB x 56,0 = 15680 mg/70 kgBB manusia

  = 15,68 g/70 kgBB manusia

  2. Dosis II (700 mg/kgBB tikus) ekstrak metanol-air biji Persea americana : 700 mg/kgBB = 140 mg/200 gBB 140 m g/200 gBB x 56,0 = 7840 mg/70 kgBB manusia

  = 7,84 g/70 kgBB manusia

  3. Dosis III (350 mg/kgBB tikus) ekstrak metanol-air biji Persea americana : 350 mg/kgBB = 70 mg/200 gBB 70 mg/200 gBB x 56,0 = 3920 mg/70 kgBB manusia

  = 3,92 g/70 kgBB manusia

  

Lampiran 15. Perhitungan konversi hari untuk manusia

   1 Bulan untuk tikus = 34 bulan untuk manusia Maka 1 hari untuk tikus = 34 hari untuk manusia 6 hari untuk tiikus = 204 hari untuk manusia

  

Lampiran 16. Penetapan kadar air serbuk biji Persea americana Mill.

  Penetapan kadar air dilakukan menggunakan alat moisture balance dengan metode Gravimetri. Pemanasan serbuk biji Persea americana Mill. dilakukan pada suhu 105 C selama 15 menit.

  

Tabel XI. Hasil penetapan kadar air serbuk biji Persea americana Mill.

  Bobot Replikasi I Replikasi II Replikasi III Sebelum 5,000 g 5,000 g 5,000 g pemanasan

  Sesudah 4,624 g 4,636 g 4,630 g pemanasan Kadar air 7,52 % 7,28 % 7,40%

  Rata-rata kadar air 7,40 % Kadar air =

  Replik asi 1 = 7,52 %

  Replikasi 2 =

  7,28 %

  Replikasi 3 =

  7,40 %

Lampiran 17. Hasil rendemen ekstrak metanol-air biji Persea americana

Mill.

  

Tabel XII. Hasil rendemen ekstrak metanol-air Biji Persea americana Mill.

  

Keterangan (gram) Cawan 1 Cawan 2 Cawan 3 Cawan 4 Cawan 5

Cawan kosong 63,29 66,22 47,06 53,57 50,5

Cawan + ekstrak 66,18 69,09 49,93 56,31 53,03

Rendemen 2,89 2,87 2,87 2,74 2,53

  ∑ 1,2

  12.00

  0,6 0,36 31 0,4 0,16 31 0,4 0,16 31 0,4 0,16 30 0,6 0,36

  30 30,6

  2

  x ( U/L ) x - (x - )

  serum kontrol (range 26,2

  

Lampiran 19. Hasil pengukuran validitas dan reabilitas

Tabel XIV. Hasil validitas dan reabilitas pengukuran ALT dilihat dari

  3 47,06 80,52 70,65 57,23 50,11 49,93 49,93

  (g) 101,00 82,11 70,09 66,42 66,18 66,18 2 66,22 97,61 85,90 75,30 70,03 69,09 69,09

  13.00 1 63,29 Berat ekstrak

  5

  4

  % Rendemen ekstrak kental = x 100% = 26,55%

  11.00

  3

  10.00

  2

  09.00

  1

  08.00

  Cawan Berat cawan kosong (gram) Jam ke

  

Tabel XIII. Bobot pengeringan ekstrak metanol-air biji Persea americana Mill.

  

Lampiran 18. Bobot pengeringan ekstrak metanol-air biji Persea americana

Mill.

  Jumlah serbuk yang digunakan untuk pembuatan ekstrak kental sebanyak 200 g serbuk kering biji Persea americana Mill., pada tiap cawannya digunakan 10 g serbuk kering dalam 100 mL pelarut metanol-air 70%. Rata-rata rendemen setiap 10 g serbuk kering adalah sebesar 2,78 gram ekstrak kental. Pada pembuatan 200 g serbuk kering biji Persea americana Mill. menghasilkan 53,1 g ekstrak kental, dengan % rendemen 26,55 %.

  • – 41,8 U/L)

  ̄ ∑(

  ) SD = √

  ( ) SD = = 0,3 √ Range x D = 30,6 0,3 = 29,4

  • – 31,8 CV = x 100% =

  Tabel XV. Hasil validitas dan reabilitas pengukuran AST dilihat dari serum

  kontrol (range 35,4-56,6 U/L)

  2

x ( U/L ) x - (x - )

39 0,2 0,04

  

39 0,2 0,04

39 38,8 0,2 0,04

38 0,8 0,64

39 0,2 0,04

  ∑ 0,8 ̄

  ∑( ) SD = √

  ( ) SD = = 0,2 √ Range x D = 3 , 0,2 = 38,6 – 39,0

  CV = x 100% =

BIOGRAFI PENULIS

  Penulis skripsi dengan judul “Efek

  Hepatoprotektif Jangka Panjang Ekstrak Metanol-Air Biji Persea Americana Mill. Terhadap Aktivitas ALT- AST Serum Pada Tikus Jantan Wistar Terinduksi Karbon Tetraklorida” memiliki nama lengkap Robert Dwijantara Putra. Penulis lahir di Yogyakarta pada tanggal 02 Mei 1992, merupakan putra kedua dari empat bersaudara dalam keluarga pasangan Budi Kasno dan Nastiti Handayani. Penulis mengawali pendidikan di TK Kanisius Demangan Baru Yogyakarta (1997-1998) kemudian melanjutkan pendidikan tingkat Sekolah Dasar di SD Kanisius Demangan Baru Yogyakarta (1998-2004). Pendidikan Sekolah Menengah Pertama ditempuh oleh penulis di SMP Negeri 6 Yogyakarta (2004- 2007), kemudian melanjutkan pendidikan Sekolah Menengah Atas di SMA Bopkri 1 Yogyakarta (2007-2010). Penulis kemudian melanjutkan pendidikan sarjana di Fakultas Farmasi Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2010. Semasa menempuh kuliah, penulis aktif dalam beberapa kegiatan kepanitiaan dan organisasi antara lain sebagai anggota Unit Kegiatan Fakultas Bidang Olahraga Badminton (2012-2013), anggota PosKes Kota Baru (2010 - sekarang). Penulis pernah menjadi volunteer PIO ISMAFARSI (2011), anggota divisi Perlengkapan Pelepasan Wisuda Fakultas Farmasi (2012), koordinator Perlengkapan TITRASI (2012). Penulis pernah menjadi asisten praktikum Farmakologi Toksikologi

Dokumen baru

Tags

Dokumen yang terkait

Efek hepatoprotektif jangka panjang dekok biji Persea americana Mill. terhadap aktivitas ALT-AST serum pada tikus terinduksi karbon tetraklorida.
0
3
127
Efek hepatoprotektif jangka panjang dekokta kulit buah persea americana Mill. terhadap aktivitas ALT-AST pada tikus jantan galur wistar terinduksi karbon tetraklorida.
0
2
8
Efek nefroprotektif jangka pendek ekstrak metanol-air biji persea americana mill. terhadap kadar kreatinin dan gambaran histologis ginjal tikus jantan wistar terinduksi karbon tetraklorida.
0
3
121
Efek hepatoprotektif pemberian jangka panjang ekstrak etanol biji persea americana mill. terhadap aktivitas alt dan ast serum pada tikus terinduksi karbon tetraklorida.
1
2
117
Efek hepatoprotektif jangka panjang ekstrak metanol-air biji persea americana mill. terhadap aktivitas alt-ast serum pada tikus jantan wistar terinduksi karbon tetraklorida.
0
1
155
Efek hepatoprotektif jangka pendek dekok biji persea americana mill. terhadap aktivitas ALT-AST pada tikus terinduksi karbon tetraklorida.
0
0
115
Efek hepatoprotektif jangka pendek ekstrak metanol biji persea americana mill. terhadap tikus terinduksi karbon tetraklorida.
0
12
130
Efek nefroprotektif pemberian jangka panjang ekstrak metanol-air biji persea americana mill. terhadap kadar kreatinin dan gambaran histologis ginjal pada tikus terinduksi karbon tetraklorida.
0
13
122
Efek hepatoprotektif jangka panjang ekstrak etanol 70% biji atung (Parinarium glaberrimum Hassk.) pada tikus jantan galur wistar terinduksi karbon tetraklorida
0
0
52
Efek hepatoprotektif jangka panjang infusa biji atung (Parinarum glaberimum Hassk.) pada tikus jantan galur wistar terinduksi karbon tetraklorida
0
0
63
Efek nefroprotektif jangka pendek ekstrak metanol air biji persea americana mill. terhadap kadar kreatinin dan gambaran histologis ginjal tikus jantan wistar terinduksi karbon tetraklorida
2
12
119
Efek nefroprotektif pemberian jangka panjang ekstrak metanol-air biji persea americana mill. terhadap kadar kreatinin dan gambaran histologis ginjal pada tikus terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository
0
0
120
Efek nefroprotektif pemberian jangka panjang ekstrak etanol biji persea americana mill. terhadap kadar kreatinin dan gambaran histologis ginjal pada tikus terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository
0
0
115
Efek hepatoprotektif jangka pendek ekstrak metanol biji persea americana mill. terhadap tikus terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository
0
0
128
Efek hepatoprotektif jangka pendek dekok biji persea americana mill. terhadap aktivitas ALT-AST pada tikus terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository
0
0
113
Show more