Uji aktivitas antimikroba getah jarak tintir (jatropha multifida linn.) terhadap staphylococcus aureus ATCC 25923, escherichia coli ATCC 25922, dan candida albicans ATCC 10231 - USD Repository

Gratis

0
0
137
9 months ago
Preview
Full text
(1)PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI UJI AKTIVITAS ANTIMIKROBA GETAH JARAK TINTIR (Jatropha multifida Linn.) TERHADAP Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, dan Candida albicans ATCC 10231 Skripsi Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi Oleh: Puspita Sari NIM : 108114153 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2014

(2) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI UJI AKTIVITAS ANTIMIKROBA GETAH JARAK TINTIR (Jatropha multifida Linn.) TERHADAP Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, dan Candida albicans ATCC 10231 Skripsi Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi Oleh: Puspita Sari NIM : 108114153 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2014 i

(3) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI ii

(4) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI iii

(5) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI Hiduplah sedemikian rupa seolah-olah akan mati esok. Belajarlah seolah-olah kau hidup selamanya. Mahatma Gandhi Kupersembahkan karya sederhanaku ini untuk : Tuhan Yesus Kristus penolongku yang hebat. Bapak Partijo dan Ibu Lasmi Puji Asih,kedua orang tuaku yang hebat. Kakak – kakakku terkasih Darmiasih, Jati Nugroho, dan Sugianto. Semua orang yang telah mengisi hidupku, dan Almamaterku. iv

(6) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI PRAKATA Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Baik, karena atas penyertaan dan pertolonganNya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Uji Aktivitas Antimikroba Getah Jarak Tintir (Jatropha Staphylococcus aureus ATCC 25923, multifida Linn.) Terhadap Escherichia coli ATCC 25922, dan Candida albicans ATCC 10231”. Skripsi ini disusun sebagai syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. Penyusunan skripsi ini dapat terselesaikan karena bantuan dan kerja sama dari banyak pihak. Oleh karena itu, penulis ingin mengucapkan teima kasih yang mendalam kepada: 1. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. 2. Bapak Prof. Dr. C. J. Soegihardjo, Apt. selaku Dosen Pembimbing dan penguji yang telah rela meluangkan waktu untuk memberikan bimbingan, saran, dan dukungan hingga skripsi ini terselesaikan. 3. Damiana Sapta Candrasari, M.Sc. dan Dr. Erna Tri Wulandari M.Si., Apt. selaku Dosen Penguji yang telah meluangkan waktu untuk menguji selama ujian tertutup dan terbuka serta untuk kritik dan sarannya yang membangun. 4. Ibu C.M. Ratna Rini Nastiti, M. Pharm., Apt., selaku Ketua Program Studi dan Dosen Pembimbing Akademik atas bantuan yang telah diberikan selama perkuliahan dan penyusunan skripsi. 5. Ibu Maria Dwi Jumpowati, S.Si., yang telah bersedia meluangkan waktu untuk berdiskusi mengenai mikrobiologi. v

(7) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 6. Seluruh staf Dosen Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma karena telah membagikan ilmu kepada penulis. 7. Bapak Mukminin, Bapak Wagiran, Mas Andri, Mas Sigit, seluruh laboran dan karyawan Universitas Sanata Dharma. 8. Orang tuaku, dua orang luar biasa dalam hidupku, terima kasih atas cinta, semangat, dukungan, dan kepercayaannya sehingga semua terasa lebih indah. 9. Ketiga kakakku terkasih (Darmiasih, Jati Nugroho, dan Sugianto) atas segala dukungan, doa, dan penghiburan yang kalian berikan. 10. Sahabatku Trifonia Rosa, Ranny Oktaviani, Gilda Todingbua, Yohanes Ivan, dan Yeni Natalia atas kebersamaan, dan kebaikan kalian selama ini. 11. Teman – teman Kos Agatha : Liana Risha yang selalu mengingatkan tentang skripsi, Rosa Kurniasih, Rosalia Suryaningtyas, Gabriella Septiana, Maria Karina, Gracia Jenny, Maria Magdalena, terima kasih atas dukungan dan kebersamaannya selama ini. 12. Teman – teman FKK B 2010 atas kebersamaannya selama ini. 13. Semua pihak yang telah banyak membantu penyelesaian skripsi ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu. Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini masih jauh dari sempurna. Oleh karena itu, kritik dan saran yang membangun akan sangat membantu penulis dalam menyempurnakan skripsi ini. Penulis berharap semoga skripsi ini berguna dikemudian hari. Penulis vi

(8) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI vii

(9) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI viii

(10) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL ......................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING................................................. ii HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................ iii HALAMAN PERSEMBAHAN ........................................................................ iv PRAKATA ......................................................................................................... v PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ............................................................ vii LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS ........................................... viii DAFTAR ISI ...................................................................................................... ix DAFTAR TABEL .............................................................................................. xiii DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... xiv DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xv INTISARI ........................................................................................................... xvii ABSTRACT .........................................................................................................xviii BAB I. PENGANTAR ....................................................................................... 1 A. Latar Belakang ..................................................................................... 1 1. Perumusan masalah ......................................................................... 3 2. Keaslian penelitian .......................................................................... 3 3. Manfaat penelitian .......................................................................... 4 B. Tujuan Penelitian ................................................................................. 4 BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ............................................................... 5 ix

(11) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI A. Jarak tintir (Jatropha multifida Linn.) .................................................. 5 B. Kandungan Metabolit Sekunder Batang Jarak Tintir .......................... 6 1. Saponin ............................................................................................ 7 2. Tanin ............................................................................................... 8 3. Flavonoid ......................................................................................... 8 4. Alkaloid ........................................................................................... 9 C. Getah Jarak Tintir ................................................................................ 10 D. Bakteri Gram Positif dan Gram Negatif .............................................. 11 E. Staphylococcus aureus ......................................................................... 12 F. Escherichia coli ................................................................................... 14 G. Candida albicans ................................................................................. 15 H. Antijamur ............................................................................................. 17 I. Antibakteri ........................................................................................... 18 J. Pengukuran aktivitas antimikroba ....................................................... 20 K. Landasan Teori .................................................................................... 20 L. Hipotesis .............................................................................................. 22 BAB III. METODOLOGI PENELITIAN ......................................................... 23 A. Jenis Rancangan Penelitian ............................................................... 23 B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional ................................... 23 1. Variabel penelitian ........................................................................ 22 2. Definisi operasional ...................................................................... 24 C. Bahan Penelitian ................................................................................ 25 D. Alat atau Instrumen Penelitian .......................................................... x 25

(12) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI E. Tata Cara Penelitian .......................................................................... 26 1. Determinasi tanaman .................................................................... 26 2. Pengumpulan bahan ..................................................................... 26 3. Skrining Fitokimia Getah Jarak Tintir .......................................... 26 a. Uji pendahuluan ....................................................................... 26 b. Uji tanin .................................................................................... 27 c. Uji saponin ............................................................................... 27 d. Uji flavonoida .......................................................................... 28 e. Uji alkaloida ............................................................................. 28 f. Uji antrakinon .......................................................................... 28 4. Uji aktivitas antimikroba .............................................................. 29 a. Persiapan konsentrasi getah jarak tintir .................................... 29 b. Pembuatan kultur mikroba uji .................................................. 29 c. Pengukuran zona hambat ......................................................... 29 d. Penentuan KHM (Konsentrasi Hambat Minimum) ................. 30 F. Tata cara Analisis Hasil ..................................................................... 30 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................... 32 A. Determinasi tanaman ......................................................................... 32 B. Pengumpulan Getah Jarak Tintir ....................................................... 33 C. Skrining Fitokimia Getah Jarak Tintir .............................................. 33 1. Uji pendahuluan ............................................................................ 34 2. Uji tanin ........................................................................................ 34 3. Uji saponin .................................................................................... 36 xi

(13) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 4. Uji flavonoid ................................................................................. 38 5. Uji alkaloida .................................................................................. 38 6. Uji antrakinon ............................................................................... 39 D. Uji Potensi Antimikroba Getah Jarak Tintir Secara Difusi Sumuran 41 1. Uji potensi antibakteri getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 ..................................................................... 45 2. Uji potensi antibakteri getah jarak tintir terhadap Escherichia coli ATCC 25922 .......................................................................... 47 3. Uji potensi antibakteri getah jarak tintir terhadap Candida albicans ATCC 10231 .................................................................. 50 E. Penentuan Konsentrasi Hambat Miniman (KHM) Getah Jarak Tintir terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923, dan Escherichia coli ATCC 25922 secara Dilusi Cair ............................. 51 1. Penentuan KHM getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 ..................................................................... 52 2. Penentuan KHM getah jarak tintir terhadap Escherichia coli ATCC 25922 ................................................................................. 53 F. Mekanisme Antimikroba Golongan Senyawa yang Terkandung Dalam Getah Jarak Tintir .................................................................. 55 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................... 57 A. Kesimpulan .......................................................................................... 57 B. Saran .................................................................................................... 57 DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 58 LAMPIRAN ....................................................................................................... 62 BIOGRAFI PENULIS ....................................................................................... 118 xii

(14) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI DAFTAR TABEL Halaman Tabel I. Hasil uji tabung pada skrining fitokimia getah jarak tintir ........... 40 Tabel II. Diameter zona hambat getah jarak tintir terhadap bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 ........................................... 46 Tabel III. Diameter zona hambat getah jarak tintir terhadap Escherichia coli ATCC 25922 .......................................................................... 48 Tabel IV. Diameter zona hambat getah jarak tintir terhadap bakteri Candida albicans ATCC 10231 ................................................... 50 Tabel V. Kekeruhan media pada dilusi cair bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 ATCC 25923 .............................................. 52 Tabel VI. Kekeruhan media pada dilusi cair bakteri Escherichia coli ATCC 25922 ................................................................................. 54 xiii

(15) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI DAFTAR GAMBAR Halaman 6 Gambar 1. Tanaman jarak tintir ...................................................................... Gambar 2. Dinding sel bakteri Gram Positif dan Gram Negatif .................... 11 Gambar 3. Bakteri Staphylococcus aureus ..................................................... 13 Gambar 4. Bakteri Escherichia coli ................................................................ 14 Gambar 5. Jamur Candida albicans ............................................................... 16 Gambar 6. Tanaman jarak tintir ...................................................................... 32 Gambar 7. Ikatan antara tanin dengan protein ................................................ 35 Gambar 8. Reaksi terpenoid dengan pereaksi Liebermann-Burchard ............ 37 Gambar 9. Mekanisme reaksi antara flavonoid dengan magnesium .............. 38 Gambar 10. Mekanisme reaksi alkaloid dengan pereaksi Mayar ..................... 36 Gambar 11. Mekanisme reaksi alkaloid dengan pereaksi Dragendorff ........... 36 Gambar 12. BD PhoenixSpecTM Nephelometer ............................................... 43 xiv

(16) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1. Surat Determinasi Tanaman Jarak Tintir (Jatropha multifida Linn.) .......................................................................................... 63 Lampiran 2. Sertifikat Hasil Uji Staphylococcus aureus ATCC 25923 .......... 64 Lampiran 3. Sertifikat Hasil Uji Escherichia coli ATCC 25922 .................... 65 Lampiran 4. Sertifikat Hasil Uji Candida albicans ATCC 10231 .................. 66 Lampiran 5. Data diameter zona hambat (mm) getah jarak tintir terhadap Escherichia coli ATCC 25922..................................................... 67 Lampiran 6. Hasil uji statistik diameter zona hambat (mm) getah jarak tintir terhadap Escherichia coli ............................................................ 67 Lampiran 7. Hasil uji Mann-Whitney kelompok konsentrasi pada bakteri Escherichia coli ATCC 25922 .................................................... 80 Lampiran 8. Data diameter zona hambat (mm) getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 ......................................... 80 Lampiran 9 Hasil uji statistik diameter zona hambat getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 .......................... 81 Lampiran 10. Hasil uji Mann-Whitney kelompok konsentrasi pada bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 ......................................... 93 Lampiran 11. Data diameter zona hambat (mm) getah jarak tintir terhadap Candida albicans ATCC 10231 ................................................. 94 Lampiran 12. Hasil uji statistik diameter zona hambat (mm) getah jarak tintir terhadap Candida albicans ATCC 10231 ................................... 94 Lampiran 13. Hasil uji Mann-Whitney kelompok konsentrasi pada Candida albicans ATCC 10231 ................................................................ 107 Lampiran 14. Data pengukuran kekeruhan media pada dilusi cair bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 ......................................... 108 Lampiran 15. Data pengukuran kekeruhan media pada dilusi cair bakteri xv 109

(17) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI Escherichia coli ATCC 25922 .................................................... Lampiran 16. Foto Tanaman Jarak Tintir (Jatropha multifida Linn.) dan Getah Jarak Tintir ........................................................................ 110 Lampiran 17. Foto Hasil Skrining Fitokimia Getah Jarak Tintir (Jatropha multifida Linn.) ........................................................................... 111 Lampiran 18. Foto seri konsentrasi getah jarak tintir, kontrol positif, dan kontrol negatif ............................................................................. 113 Lampiran 19. Foto hasil uji aktivitas antibakteri getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus secara difusi sumuran ............................ 114 Lampiran 20. Foto hasil uji aktivitas antibakteri getah jarak tintir terhadap Escherichia coli secara difusi sumuran ...................................... 115 Lampiran 21. Foto hasil uji aktivitas antifungi getah jarak tintir terhadap Candida albicans secara difusi sumuran .................................... 116 Lampiran 22. Foto pengujian aktivitas antibakteri getah jarak jarak tintir secara dilusi cair terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli untuk mendapatkan KHM (Konsentrasi Hambat Minimal) ....................................................................... 117 xvi

(18) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI INTISARI Getah jarak tintir (Jatropha multifida Linn.) digunakan masyarakat sebagai penyembuh luka. Hasil penelitian yang dilakukan di Filipina oleh Ongtengco (1992) dan di Nigeria oleh Adelosa (2007) menyatakan bahwa getah jarak tintir memiliki aktivitas antimikroba terhadap Candida albicans, Proteus spp., Staphylococcus aureus, Citrobacter spp., Morganella morgani, Klebsiella, Serratia, Aeromonas, Acitobacter, Pseudomonas aeruginosa, dan Eschericia coli. Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans merupakan mikroba yang sering menimbulkan penyakit pada manusia. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antimikroba dari getah jarak tintir yang tumbuh di Indonesia terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans serta mengetahui senyawa golongan apa saja yang terkandung didalamnya. Uji aktivitas antimikroba ini dilakukan dengan metode difusi sumuran untuk mengetahui diameter zona hambat getah jarak tintir. Selanjutnya untuk menentukan KHM (Konsentrasi Hambat Minimal) digunakan metode dilusi cair dan dibaca kekeruhannya menggunakan Nephelometer. Data diameter zona hambat diolah menggunakan uji Shapiro-Wilk untuk mengetahui normalitas data dan diuji menggunakan Kruskal-Wallis dan dilanjutkan dengan analisis MannWhitney. KHM ditentukan berdasarkan konsentrasi terendah yang menunjukkan adanya penurunan kekeruhan media pada dilusi cair. Uji tabung digunakan untuk menentukan senyawa golongan apa saja yang terkandung dalam getah jarak tintir. Penentuan hasil positif dengan pengamatan perubahan warna dan adanya pengendapan. Hasil penelitian diketahui bahwa getah jarak tintir memiliki aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli dengan nilai KHM berturut – turut, yaitu 4% dan 7%, serta memiliki aktivitas antijamur terhadap Candida albicans dengan zona hambat iradikal. Senyawa yang diduga terkandung dalam getah jarak tintir, yaitu saponin triterpen, tanin, alkaloid, dan flavonoid. Kata kunci : getah jarak tintir, Jatropha multifida Linn., Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans xvii

(19) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI ABSTRACT Latex of jarak tintir (Jatropha multifida Linn.) has been used as a wound healer. The result of research that has been done by Ongtengco (1992) in Philippines and Adelosa (2007) in Negeria is that jarak tintir‟s latex have antimicrobiac activity against Candida albicans, Proteus spp., Staphylococcus aureus, Citrobacter spp., Morganella morgani, Klebsiella, Serratia, Aeromonas, Acitobacter, Pseudomonas aeruginosa, and Eschericia coli. Staphylococcus aureus, Escherichia coli, and Candida albicans are microbe that often cause disease to human. This study aims to determine the antimicrobial activity of jarak tintir;‟s latex against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, and Candida albicans, and as well to knowing what compounds contain in it. This antimicrobial activity test was carried out by the method of well diffusion to determine the inhibition zone diameter of jarak tintir‟s latex. Furthermore, to determine the MIC (Minimum Inhibitory Concentration) used broth dilution method and the turbidity was read by Nephelometer. Data of inhibition zone diameter were processed using Shapiro-Wilk to determine the normality of the data and tested using Kruskal-Wallis followed by Mann-Whitney. MIC os determined based on the lowest concentration that show decreases in turbidity on broth media. Phytochemical screening is used to determine what compounds were contained in jarak tintir‟s latext. Determination of positive results with observations of color change and precipitation. The result show thet jarak tintir‟s latex have antimicrobial activity against Staphylococcus aureus and Escherichia coli with MIC values 4% and 7%, and have antifungal activity against Candida albicans with iradikal zone inhibition. Compouns that contoined int the jarak tintir‟s latex are saponins (triterpene), tannins, alkaloids, and flavonoids. Keyword : latex of jarak tintir, Jatropha multifida Linn., Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans xviii

(20) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Dewasa ini, penyakit akibat infeksi bakteri maupun jamur telah banyak terjadi. Bakteri maupun jamur merugikan yang seringkali ditemukan tersebut antara lain Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans. Berbagai penelitian terkait senyawa antimikroba tersebut terus dilakukan karena sering terjadi resistensi terhadap senyawa yang telah digunakan sebelumnya. Menurut Priyanto (2010) resistensi antimikroba merupakan keadaan dimana mikroba tidak lagi dapat dihambat pertumbuhannya maupun dibunuh dengan antimikroba yang biasa digunakan. Indonesia memiliki banyak tanaman yang dapat dimanfaatkan sebagai antimikroba. Penelitian terhadap tanaman-tanaman tersebut telah banyak dilakukan. Jatropha multifida (jarak tintir) atau lebih dikenal sebagai pohon yodium telah banyak diteliti aktivitas antimikrobanya. Hasil penelitian terdahulu menyatakan bahwa jarak tintir memiliki aktivitas antimikroba yang diduga berasal dari kandungan senyawa saponin, alkaloid, flavonoid, dan tanin pada batangnya. Ekstrak metanol dari campuran daun, batang, biji, dan kulit jarak tintir mampu menghambat pertumbuhan Candida albicans, Staphylococcus aureus, dan Escherichia coli (Sari, 2011), sedangkan ekstrak metanol dari kulit batang memiliki aktivitas antimikroba terhadap Candida albicans, Staphylococcus aureus, Gardnerella vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Proteus mirabilis, dan 1

(21) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 2 Pseudomonas aeruginosa dengan nilai Konsentrasi Hambat Minimal (KHM) berturut-turut, yaitu 0,005%, 0,00125%, 0,0000625%, 0,01%, 0,000156%, 0,00125% (Aiyelaagbe, 2008). Getah jarak tintir sendiri telah dikenal sebagai penyembuh luka. Pengujian aktivitas antimikroba dari getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, dan Escherichia coli telah dilakukan di Filipina oleh Ongtengco (1992). Nilai KHM getah jarak tintir pada pengujian tersebut terhadap Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, dan Escherichia coli berturut – turut, yaitu 0,098%, 0,78%, dan 1,56%. Berdasarkan penelitian Adelosa (2007), getah Jarak tintir sendiri yang diujikan sebagai pengobatan lesi/luka pada mulut anak di Nigeria akibat infeksi Candida albicans memiliki efek pengeringan luka lebih cepat dari obat Nystatin. Faktor edafik atau faktor tanah tempat tumbuh yang berbeda dapat mempengaruhi kandungan senyawa suatu tanaman meskipun spesiesnya sama. Hal ini terbukti dari hasil penelitian Widyastuti (2003) yang menyatakan bahwa jenis tanah mempengaruhi kadar minyak atsiri pada tanaman ketumbar (Coriandrum sativum L.). Oleh karena itu, peneliti tertarik menguji aktivitas antimikroba getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans meskipun penelitian terhadap bakteri dan jamur yang sama pernah dilakukan sebelumnya di Filipina dan Nigeria. Selain itu, peneliti tertarik untuk mengetahui apakah getah jarak tintir juga memiliki kandungan senyawa golongan saponin, alkaloid, flavonoid, dan tanin seperti yang terkandung pada batang jarak tintir.

(22) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 3 1. Perumusan masalah a. Berapakah diameter zona hambat dan KHM getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, dan Candida albicans ATCC 10231? b. Senyawa golongan apa sajakah yang terkandung dalam getah jarak tintir? 2. Keaslian penelitian Sejauh pengetahuan penulis, uji aktivitas antimikroba getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans berbeda dari penelitian yang dilakukan oleh Delia C. Ongtengco di Manila, Filipina pada tahun 1992 yang berjudul „The In Vitro Antibacterial Activity of Jatropha multifida Linn. Latex Against Common Bacterial Wound Isolates‟. Perbedaan penelitian ini terdapat pada metode pengujian, mikroba uji yang digunakan dan tempat pengambilan bahan tanaman. Penelitian yang dilakukan Ongtengco menggunakan metode pengujian Kirby-Bauer Agar-Disk Diffusion, sedangkan pada penelitian aktivitas antimikroba yang peneliti lakukan menggunakan metode difusi sumuran. Mikroba uji pada penelitian Ongtengco, yaitu bakteri yang didapat dari isolat luka, sedangkan penelitian ini menggunakan strain bakteri yang didapat dari Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta. Getah jarak tintir yang digunakan oleh Ongtengco berasal dari Filipina, sedangkan pada penelitian ini berasal dari Yogyakarta, Indonesia. Penelitian ini juga berbeda dari pengujian „Daya Hambat Getah Jarak Cina (Jatropha multifida L.) terhadap Staphylococcus aureus Secara

(23) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 4 In Vitro‟ yang dilakukan oleh Darmawi (2013). Perbedaan tersebut terletak pada metode yang digunakan, yaitu Kirby-Bauer Agar-Disc Diffusion sedangan pada penelitian ini menggunakan metode difusi sumuran. 3. Manfaat penelitian a. Manfaat teoritis : penelitian ini dapat menambah informasi tentang aktivitas antimikroba dari getah jarak tintir yang tumbuh di Yogyakarta, Indonesia terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, dan Candida albicans ATCC 10231. b. Manfaat praktis : penelitian ini dapat digunakan sebagai acuan dalam penggunaan getah jarak tintir sebagai antimikroba terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans. B. Tujuan 1. Tujuan umum Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antimikroba getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, dan Candida albicans ATCC 10231. 2. Tujuan khusus a. Mengetahui diameter zona hambat dan KHM getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, dan Candida albicans ATCC 10231. b. Mengetahui senyawa golongan apa sajakah yang terkandung dalam getah jarak tintir.

(24) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Jarak tintir (Jatropha multifida Linn.) Klasifikasi jarak tintir, yaitu : Kerajaan : Plantae Subkerajaan : Tracheobionta Super Divisi : Spermatophyta Divisi : Magnoliophyta Kelas : Magnoliopsida Sub Kelas : Rosidae Bangsa : Euphorbiales Suku : Euphorbiaceae Marga : Jatropha Jenis : Jatropha multifida Linn. (Anonim, 2012). Jarak tintir biasanya memiliki tinggi 3-7 kaki, terkadang bisa mencapai 20 kaki. Daunnya berwarna hijau tua, menempel berselang seling pada batang, toreh berbagi sehingga terbentuk 9-11 lobus. Bunganya kecil berwarna merah, dengan kelopak sejumlah 5 berwarna merah 2-3 cm, benang sari 8 berwarna kuning. Buah berwarna kuning saat tua, berbelah tiga, dan tidak membuka sendiri jika sudah tua. Biji yang dihasilkan berwarna putih dan berminyak (Begg, 1994). 5

(25) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 6 Gambar 1. Tanaman jarak tintir Jarak tintir disebut juga jarak cina, pohon yodium, jarak gurita dan balacai batai. Tumbuhan ini memiliki senyawa kimia berupa α-amirin, kampesterol, 7α-diol, stigmaterol, β-sitosterol, dan HCN. Jarak tintir telah digunakan sebagai pengobatan untuk luka berdarah, penurun panas, dan antiinflamasi (Hariana, 2004). Hasil penelitian melaporkan bahwa ekstrak metanol dari kulit batang jarak tintir memiliki aktivitas antimikroba terhadap mikroba penyebab penyakit kelamin seperti Candida albicans, Staphylococcus aureus, Gardnerella vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Proteus mirabilis, dan Pseudomonas aeruginosa dengan nilai Konsentrasi Hambat Minimal (KHM) berturut-turut, yaitu 0,005%, 0,00125%, 0,0000625%, 0,01%, 0,000156%, 0,00125% (Aiyelaagbe, 2008). B. Kandungan Metabolit Sekunder Batang Jarak Tintir Batang jarak tintir mengandung saponin, tanin, flavonoid, dan alkaloid (Hariana, 2004). Golongan senyawa tersebut telah diketahui memiliki aktivitas

(26) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 7 antimikroba sehingga diharapkan getah jarak tintir juga mengandung saponin, tanin, flavonoid, dan alkaloid. 1. Saponin Saponin adalah glikosida dengan berat molekul besar yang terikat dengan aglikon triterpen atau steroid. Kebanyakan saponin bersifat sabun, bersifat hemolitik, memiliki rasa pahit dan toksik terhadap ikan (piscicidal). Berdasarkan jenis sapogeninnya (aglikon) saponin dibagi menjadi tiga kelas, yaitu triterpen, steroid, dan steroid alkaloid. Semua saponin mengikat satu atau lebih gula pada aglikonnya (Hostetmann, 2005). Mekanisme saponin sebagai antibakteri adalah dengan menurunkan tegangan permukaan sehingga mengakibatkan naiknya permeabilitas atau kebocoran sel dan mengakibatkan keluarnya senyawa intraseluler (Robinson (cit., Nuria, 2009)). Saponin triterpen memiliki aktivitas antifungi yang kuat tetapi aktivitas antibakterinya rendah. Aktivitas antibakteri dari saponin jenis ini lemah terhadap Gram positif dan tidak memiliki efek pada Gram negatif. Mekanisme aksi saponin terhadap fungi, yaitu dengan membentuk kompleks dengan sterol pada membran plasma yang akan merusak membran sel dan akan berujung pada kematian sel (Hostetmann, 2005). Saponin steroid sering digunakan sebagai starting material dalam sintesis cortisone, steroid diuretik, vitamin D, dan cardiac glycosides. Contoh saponin jenis ini yang sudah terkenal, yaitu digitoksin (Evans, 2009).

(27) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 8 2. Tanin Tanin adalah senyawa fenolik dengan berat molekul 500-3000 Da dan memiliki kemampuan mengendapkan protein dari suatu larutan. Tanin larut dalam air, alkohol, gliserol, dan aseton (Evans, 2009). Tanin dikategorikan dalam tiga grup yaitu tanin terkondensasi, tanin terhidrolisis, dan tanin kompleks. Tanin terkondensasi disebut juga proanthocyanidin dan merupakan flavonoid polimerik atau oligomerik yang terdiri dari unit flavan3-ol (catechin). Tanin kompleks adalah tanin yang unit catechinnya terikat pada unit gallotannin ataupun ellagitannin (Vermerris, 2008). Menurut Robinson (cit., Nuria, 2009) Sebagai antimikroba, tanin dapat menghambat enzim reverse transkriptase dan DNA topoisomerase sehingga sel bakteri tidak dapat terbentuk. Gilman (cit., Sari, 2011) menyebutkan bahwa tanin dan flavonoid merupakan senyawa fenol yang bekerja sebagai antibakteri dengan menyebabkan kerusakan pada dinding sel. Ion H+ dari senyawa fenol akan menyerang gugus polar (gugus fosfat) sehingga molekul fosfolipid akan terurai menjadi gliserol, asam karboksilat, dan asam fosfat. Hal ini mengakibatkan fosfolipid tidak mampu mempertahankan bentuk membran sel mengakibatkan membran sel bocor dan bakteri terhambat pertumbuhannya dan bahkah kematian. 3. Flavonoid Flavonoid adalah zat aktif yang terdapat pada tanaman dan memiliki struktur kimia C6-C3-C6 dengan tiap bagian C6 merupakan rantai alifatik (Rompas, 2012). Flavonoid merupakan golongan terbesar dari senyawa

(28) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 9 polifenol. Flavonoid dapat dikelompokkan berdasarkan keragaman pada rantai C3 menjadi flavonol, flavon, isoflavon, flavanon, flavanonol, katekin, leukoantosianidin, antosianin, khalkon, dan auron. Mekanisme kerja flavonoid sebagai antibakteri adalah dengan membentuk senyawa kompleks dengan protein ekstraseluler sehingga merusak membran sel bakteri yang diikuti dengan keluarnya senyawa intraseluler. (Robinson, 1995). 4. Alkaloid Alkaloid merupakan senyawa organik yang terdapat dalam tanaman, bersifat basa, dan struktur kimianya memiliki sistem lingkar heterosiklik dengan nitrogen sebagai hetero atomnya. Alkaloid tersusun atas karbon, hidrogen, nitrogen, dan oksigen, tetapi tidak semua alkaloid mengandung keempat unsur tersebut. Ada pula alkaloid lain yang mengandung unsur selain yang telah disebutkan (Sumardjo, 2009). Beberapa cara untuk mengidentifikasi alkaloid yaitu dengan mikroskopik kristal, kelarutan dalam berbagai jenih pelarut, spektrum absorbsi, sifat farmakologinya, maupun dengan reaksi warna. Beberapa pereaksi yang sering digunakan untuk mengendapkan alkaloid, yaitu pereaksi Mayer (merkuri kalium iodida), pereaksi Marme (kadmium kalium iodida), pereaksi Hager (asam pikrat pekat), pereaksi Wagner (larutan I2 dalam kalium iodida), pereaksi Dragendorff (bismut kalium iodida), pereaksi Sonnenschein (asam fosfomolibdat), (Sumardjo, 2009). dan pereaksi Scheiber (asam fosfotungstrat)

(29) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 10 Alkaloid bekerja sebagai antibakteri dengan cara menghambat sintesis protein bakteri, mengakibatkan terdenaturasinya protein dan asam nukleat sehingga sel bakteri rusak dan berujung pada kematian sel (Oktaviani, 2013). C. Getah Jarak Tintir Getah jarak tintir didapat dengan mematahkan maupun menyayat tangkai daun dan melukai kulit batang. Getah jarak tintir berwarna kuning sampai kuning kemerahan. Getah jarak tintir dikenal dapat membantu penyembuhan luka sayat dan beberapa penelitian telah dilakukan untuk membuktikannya secara ilmiah (Juniarti, 2012). Getah jarak tintir mengandung tioglikosida yang menghasilkan minyak bersifat iritan dan memiliki efek abortifacient Oleh karena itu, penggunaannya secara oral harus dihindari (Begg, 1994). Labaditin merupakan senyawa yang diisolasi dari getah jarak tintir dan memiliki efek antibakteri terhadap bakteri Gram positif tetapi tidak pada bakteri Gram negatif (Barbosa, 2010). Getah Jarak tintir sendiri telah diujikan sebagai pengobatan lesi/luka pada mulut anak di Nigeria akibat infeksi Candida albicans dan efeknya lebih cepat dari obat Nystatin (Adesola, 2007). Pengujian aktivitas antimikroba dari getah jarak tintir terhadap bakteri yang diisolasi dari luka telah dilakukan di Filipina tahun 1992 oleh Ongtengco. Hasilnya, getah jarak tintir memiliki daya hambat sedang terhadap Proteus spp., Staphylococcus aureus, dan Citrobacter spp. dan memiliki daya hambat lemah terhadap Morganella morgani, Klebsiella, Serratia, Aeromonas, Acitobacter, Pseudomonas aeruginosa, dan Escherichia coli. Kriteria yang digunakan untuk

(30) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 11 menentukan kekuatan daya hambat pada penelitian Ongtengco ini, yaitu daya hambat kuat jika diameter zona hambat ≥ 18 mm, sedang jika 12-16 mm, dan lemah jika 7-11 mm dengan diameter paper disk 6,35. D. Bakteri Gram Positif dan Gram Negatif Berdasarkan pewarnaan Gram, bakteri dibedakan menjadi dua golongan, tergantung dari reaksi dinding sel terhadap tinta safranin atau kristal violet, menjadi Gram positif dan Gram negatif. Bakteri yang tetap berwarna ungu dengan pewarnaan oleh kristal violet disebut bakteri Gram positif, sedangkan bakteri yang warna ungunya hilang jika dibilas dengan alkohol, dan berwarna merah muda setelah penambahan safranin disebut bakteri Gram negatif. Jamur dan ragi tidak dapat diwarnai dengan pewarnaan gram dan biasanya diidentifikasi dengan pewarnaan pada jaringan yang terinfeksi (James, 2006). Gambar 2. Dinding sel bakteri Gram positif dan Gram negatif (Generasibiologi, 2012)

(31) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 12 Bakteri Gram positif sebagian besar dinding selnya mengandung peptidoglikan yang menjerat warna violet. Bakteri Gram negatif memiliki lebih sedikit peptidoglikan yang terletak antara membran plasma dan suatu membran bagian luar. Zat warna violet yang digunakan dalam pewarnaan Gram dapat terbilas dari bakteri Gram negatif (Campbell, 2003). Contoh bakteri Gram positif, yaitu Staphylococcus aureus dan Clostridium perfringens, sedangkan contoh bakteri Gram negatif, yaitu Escherichia coli, dan Psuedomonas aeruginosa (James, 2006). E. Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus merupakan bakteri Gram positif dan diantara spesies Staphylococcus lain merupakan patogen utama bagi manusia. Staphylococcus aureus merupakan bentuk koagulase-positif dan hal ini yang membedakannya dengan spesies lain. Staphylococcus mudah menjadi resisten terhadap antibiotik sehingga menimbulkan masalah dalam pengobatannya. Bakteri Staphylococcus aureus dapat menyebabkan penyakit kulit (jerawat, pioderma, dan impetigo), pneunomia, meningitis, empidema, endokarditis, dan sepsis Staphylococcus aureus tumbuh paling cepat pada suhu 350 C dan membentuk pigmen pada suhu 20-250 C. Koloni yang dihasilkan berwarna abu – abu sampai kuning emas tua. Koloni Staphylococcus aureus berbentuk bundar, halus, menonjol dan berkilau (Jawetz, 1996).

(32) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 13 Gambar 3. Bakteri Staphylococcus aureus (Extension, 2010) Kemampuan patogenik strain Staphylococcus aureus merupakan gabungan dari faktor-faktor ekstraseluler, toksin – toksin yang dihasilkan, dan sifat invasif dari bakteri itu sendiri. Staphylococcus aureus menghasilkan koagulase yaitu suatu protein mirip enzim yang dapat menggumpalkan plasma yang telah diberi oksalat atau sitrat dengan bantuan suatu faktor yang terdapat dalam banyak serum. Koagulase ini terdapat pada permukaan dinding sel dan terikat secara nonenzimatik dengan fibrinogen sehingga bakteri dapat beragregasi. Selain itu, koagulasi dapat mengendapkan fibrin pada permukaan dinding sel sehingga mungkin mengubah pola fogositosis oleh sel – sel fagosit. Bakteri yang membentuk koagulase dianggap mempunyai potensi menjadi invasif (Jawetz, 1996). Staphylococcus aureus juga memiliki beberapa toksin seperti luekosidin, eksfoliatif, toksin sindroma syok toksin-1 (TSST-1), dan enterotoksin. Leukosidin dapat mematikan sel darah putih pada banyak hewan yang terkena, tetapi perannya dalam patogenesis pada manusia belum jelas karena mampu difagositosis. Toksin ini mengakibatkan deskuamasi pada

(33) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 14 sindroma lepuh kulit stafilokukus. TSST-1 menyebabkan demam, syok, dan ruam kulit deskuamatif. Enterotoksin bertanggung jawab pada keracunan makanan. Enterotoksin dihasilkan ketika Staphylococcus aureus tumbuh pada makanan yang mengandung karbohidrat dan protein. Efek muntah yang dihasilkan mungkin akibat perangsangan sistem saraf pusat (pusat muntah) setelah toksin bekerja pada reseptor – reseptor saraf dalam usus (Jawetz, 1996). F. Escherichia coli Escherichia coli adalah bakteri Gram negatif yang merupakan flora usus normal berperan terhadap fungsi dan nutrisi normal. Bakteri ini dapat menyebabkan diare dan mudah menjadi patogen jika berada di luar usus. Tempat yang sering terkena infeksi, yaitu saluran kemih dan tempat lain di rongga perut (Jawetz, 1996). Gambar 4. Bakteri Escherichia coli (Psmicrographs, 2010) Secara umum, mekanisme Escherichia coli menyebabkan diare yaitu dengan melekat pada reseptor glikoprotein atau glikolipid lalu memproduksi beberapa senyawa toksik yang merusak sel – sel usus dan mengganggu fungsi usus (Behrman, 1998).

(34) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 15 Escherichia coli digolongkan menjadi EPEC, ETEC, EHEC, EIEC, dan EAEC berdasarkan ciri khas sifat – sifat virulensinya dan setiap grup menimbulkan penyakit melalui mekanisme yang berbeda- beda. Berikut ini adalah penggolongan Escherichia coli menurut Jawetz (1996): a) EPEC (E. coli Enteropatogenik) adalah penyebab diare pada anak. EPEC melekat pada sel mukosa usus kecil dan infeksi tersebut mengakibatkan diare cair yang dapat sembuh sendiri tetapi dapat juga menjadi kronik. b) ETEC (E. coli Enterotoksigenik) adalah penyebab tersering dari traveler's diarrhea dan diare pada bayi di negara berkembang c) EHEC (E. coli Enterohemoragik) menghasilkan verotoksin karena memiliki efek sitotoksik pada sel Vero, yaitu suatu sel ginjal dari monyet hijau Afrika. EHEC berhubungan dengan kolitis hemoragik, suatu diare yang berat, anemia hemolitik mikroangiopatik, dan trombositopenia. Pencegahan dapat dilakukan dengan memasak daging sapi sampai matang. d) EIEC (E. coli Enteroinvasif) menyebabkan penyakit yang mirip dengan shigelosis. e) EAEC (E. coli Enteroagregatif) menyebabkan diare akut dan kronik pada negara berkembang. G. Candida albicans Kelompok jamur yang menyebabkan penyakit pada manusia, yaitu : 1. Mould (jamur filamentosa) tumbuh sebagai filamen panjang yang berjalin membentuk miselium. Contohnya, yaitu dermatofita yang mampu mencerna

(35) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 16 keratin dan menyebabkan beberapa penyakit seperti infeksi kuku, kulit, dan rambut. 2. Ragi sejati, merupakan jamur bulat atau oval uniseluler. Contohnya, yaitu Cryptococcus neoformans yang menyebabkan infeksi paru pada pasien immunocompromised. 3. Jamur menyerupai ragi. Contohnya adalah Candida albicans yang merupakan flora normal pada usus, mulut, dan vagina. Jamur ini dapat menyebabkan beberapa penyakit seperti sariawan mulut, vaginitis, endokarditis, dan septikemia (Neal, 2006). C. albicans merupakan jamur penyebab kandidiasis pada kulit, kuku, selaput lendir, dan organ dalam. Pada manusia sehat, C. albicans sering ditemukan pada rongga mulut, saluran cerna, saluran pernafasan bagian atas, mukosa vagina dan dibawah kuku sebagai saprofit atau komensal yang tidak menyebabkan penyakit. Jamur ini merupakan jamur oportunistik yang akan menyebabkan penyakit saat tubuh mengalami penurunan sistem imun (Susanto, 2008). Gambar 5. Jamur Candida albicans (Bioweb, 2008)

(36) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 17 Patogenesis Candida albicans terjadi dalam dua tahap, yaitu adhesi dan invasi. Tahap pertama infeksi Candida albicans pada tubuh manusia yaitu pelekatan (adhesi). Adhesi dilakukan dengan melekatkan dinding sel dengan sel inang yang selanjutnya mengaktivasi mitogen activated protein kinase (Mapkinase). Map-kinase diperlukan untuk pertumbuhna hifa invasif dan perkembangan biofilm pada tahap selanjutnya (Kusumaningtyas, 2005). Setelah adhesi selanjutnya tahap invasi. Hifa Candida albicans melakukan penetrasi ke dalam permukaan epitelium melewati cell junction. Invasi yang ditandai dengan kolonisasi tersebut dipercepat dengan keberadan serum atau saliva. Candida albicans lalu mensekresi proteinse aspartat (SAPs) yang bertanggung jawab terhadap perusakan pada kulit (Kusumaningtyas, 2005). C. albicans pada media SDA (Sabouraud Dextrose Agar) dan inkubasi suhu kamar akan berbentuk koloni lunak berwarna coklat dan berbau seperti ragi. C. albicans meragikan glukosa dan maltosa menghasilkan asam dan gas serta tidak bereaksi dengan laktosa (Jawetz, 1996). H. Antijamur Antijamur berdasarkan struktur kimianya dapat digolongkan menjadi golongan azol, golongan polien, dan golongan lain. Contoh antijamur golongan azol yaitu imidazol dan triazol, golongan polien yaitu amfoterisin B dan nystatin, dan golongan lain contohnya, yaitu flusitosin, griseofulfin dan terbinafin (Priyanto, 2010). Nystatin merupakan antijamur golongan polien yang digunakan sebagai terapi infeksi Candida albicans pada kulit dan membran mukosa. Nystatin tidak

(37) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 18 dipakai sebagai antijamur oral karena bersifat toksik. Pemakaian Nystatin untuk infeksi Candida albicans di usus tidak berbahaya karena Nystatin tidak dapat diabsorbsi di usus (Neal, 2006). Nystatin bekerja dengan mengikat ergosterol atau asam lemak penyusun membran sel pada dinding sel jamur. Terikatnya ergosterol menyebabkan sel jamur rusak dan lisis. Antijamur golongan ini hanya bersifat toksisitas selektif pada jamur saja karena manusia tidak memiliki ergosterol melainkan kolesterol (Priyanto, 2010). I. Antibakteri Spektrum antibakteri dibagi menjadi dua, yaitu berspektrum sempit (narrow spectrum) dan berspektrum luas (broad spectrum). Antibakberi berspektrum sempit jika hanya efektif melawan bakteri dalam jumlah terbatas atau satu golongan saja misalnya hanya Gram positif. Jika antibakteri efektif melawan beberapa jenis atau golongan bakteri, misalnya Gram positif dan negatif maka antibakteri tersebut berspektrum luas (Priyanto, 2010). Intensitas antibakteri dibedakan menjadi bakterisidal dan bakteriostatik. Bakterisidal jika antibakteri dapat membunuh bakteri, sedangkan bakteriostarik jika hanya bisa menghambat atau menghentikan pertumbuhan bakteri. Jika antibakteri yang diberikan bersifat bakteriostatik maka antibodi tubuh yang berperan membunuh bakteri (Priyanto, 2010). Mekanisme kerja antibakteri ada beberapa, yaitu : A. Penghambat sintesis dinding sel

(38) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 19 Dinding sel bakteri berfungsi melindungi membran sitoplasma, memelihara bentuk sel, dan mencegah lisis katrena tekanan osmosis. Jika dinding sel rusak atau tidak terbentuk sempurna maka sel dapat lisis atau tidak dapat membelah. Sel lisis terjadi karena cairan disekitar yang hipoosmosis berdifusi ke dalam sel menyebabkan pembengkakan dan diikuti lisis. Contoh antibakteri yang bekerja menghambat sintesis dinding bakteri, yaitu golongan penisilin, sefalosporin, dan polipeptida. B. Penghambat sintesis protein Proses sintesis protein bakteri terjadi di ribosom. Antibakteri penghambat sintesis protein biasanya bersifat toksisitas selektif karena ribosom bakteri dan manusia berbeda. Bakteri memiliki ribosom 30 S dan 50 S sedangkan manusia 40 S dan 60 S. Antibakteri ini akan mengikat ribosom 30 S atau 50 S atau keduanya sehingga sintesis protein bakteri terganggu. Contoh antibakteri yang sudah digunakan, yaitu golongan aminoglikosida, tetrasiklin, kloramfenikol, klindamisin, dan makrolida. C. Antagonis asam folat Asam folat digunakan bakteri untuk sintesis DNA atau RNA. Tidak seperti manusia, bakteri tidak dapat mengabsorpsi asam folat dari makanannya. Untuk mencukupi kebutuhannya asam folat disintesis sendiri menggunakan paraamino benzoic acid (PABA). Antibakteri antagonis asam folat memiliki struktur yang mirip dengan PABA sehingga dapat secara antagonis kompetitif menduduki tempat bergabungnya PABA dengan asam dihidropteroad dalam mensitesis asam terahidrofolat yang akan digunakan

(39) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 20 untuk membentuk asam folat. Contoh antibakteri yang sudah digunakan, yaitu golongan sulfonamid (Priyanto, 2010). Salah satu antibakteri yang berasal dari tanaman yaitu timol. Timol merupakan salah satu komponen minyak atsiri golongan fenol yang berkerja sebagai antibakteri dengan cara mendenaturasi protein sel bakteri, sehingga terjadi perubahan struktur sel dan dapat menyebabkan kebocoran membran sel. Akibatnya, komponen penting dalam sel akan keluar dan pertumbuhan sel terhambat bahkan sampai terjadi kematian sel (Nio, 2004). J. Pengukuran Aktivitas Antimikroba Pengukuran aktivitas antimikroba dapat dilakukan dengan dua cara, yaitu metode difusi dan dilusi. Metode difusi menggunakan kertas cakram atau sumuran. Senyawa yang akan diuji aktivitas antimikrobanya diteteskan ke kertas cakram atau ke dalam sumuran, kemudian dihitung luas zona hambat disekitar kertas cakram atau sumuran. Metode dilusi dilakukan dengan cara mencampur media pertumbuhan cair atau padat dengan mikroba dan senyawa antimikroba yang ingin diuji, lalu diamati tingkat kekeruhannya (Edber, 1986). K. Landasan Teori Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans merupakan mikroba penyebab penyakit yang sering terjadi. Beberapa penyakit yang diakibatkan Staphylococcus aureus, yaitu penyakit kulit, pneunomia, meningitis, empidema, endokarditis, dan sepsis. Escherichia coli menyebabkan penyakit seperti infeksi saluran kemih, dan diare. Candida albicans

(40) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 21 menyebabkan candidiasis yang bisa berkembang menjadi berbahaya. Penemuan antimikroba terhadap senyawa tersebut terus dilakukan karena adanya resistensi antimikroba. Jarak tintir merupakan tumbuhan yang getahnya digunakan masyarakat sebagai pengobatan luka bakar maupun iris. Batang jarak tintir mengandung senyawa saponin, alkaloid, flavonoid, dan tanin yang dapat berperan sebagai senyawa antimikroba. Penelitian terkait aktivitas antibakteri getah jarak tintir terhadap bakteri yang ditemukan pada luka telah dilakukan di Filipina oleh Ongtengco pada tahun 1992. Hasil penelitian menyatakan bahwa getah jarak tintir memiliki aktifitas antimikroba terhadap Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, dan Escherichia coli dengan nilai KHM berturutturut, yaitu 0,098%, 0,78%, dan 1,56%. Penelitian Adelosa (2007) di Nigeria menyatakan bahwa getah jarak tintir lebih cepat efeknya dalam mengobati lesi pada mulut anak akibat infeksi Candida albicans dibandingkan obat Nystatin. Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan sebelumnya getah jarak tintir terbukti merupakan zat yang potensial sebagai antimikroba. Faktor tempat tumbuh tanaman dapat mempengaruhi kadar kandungan senyawa suatu tanaman sehingga aktivitas antimikroba jarak tintir yang tumbuh di Indonesia mungkin saja berbeda dengan yang tumbuh di Nigeria dan Filipina. Hal ini terbukti dari hasil penelitian Widyastuti (2003) yang menyatakan bahwa jenis tanah mempengaruhi kadar minyak atsiri pada tanaman ketumbar (Coriandrum sativum L.).

(41) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 22 Pengujian aktivitas antimikroba dapat dilakukan dengan metode dilusi dan difusi. Metode difusi untuk mengetahui diameter zona hambat sedangkan metode dilusi untuk mengetahui KHM suatu senyawa antimikroba. L. Hipotesis Getah jarak tintir memiliki aktifitas antimikroba terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, dan Candida albicans ATCC 10231 serta dapat ditentukan diameter zona hambat dan KHM. Golongan senyawa yang diduga terkandung dalam getah jarak tintir, yaitu saponin, alkaloid, flavonoid, dan tanin.

(42) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI BAB III METODOLOGI PENELITIAN A. Jenis Rancangan Penelitian Penelitian tentang Uji Aktivitas Antimikroba getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, dan Candida albicans ATCC 10231 merupakan jenis penelitian eksperimental murni dengan menggunakan rancangan acak lengkap pola searah. B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional 1) Variabel penelitian a. Variabel utama 1) Variabel bebas : getah jarak tintir konsentrasi 12,5 % v/v, 25 % v/v, 50 % v/v, dan 100 % v/v. Seri konsentrasi pada penentuan KHM. 2) Variabel tergantung : diameter zona hambat getah jarak tintir terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans serta kekeruhan media pada dilusi cair. b. Variabel pengacau 1) Variabel pengacau terkendali : waktu inkubasi inkubasi 24 jam, suhu 350C, volume media dan suspensi mikroba, serta kekeruhan suspensi mikroba (setara dengan Standard Mac Farland II). 2) Variabel pengacau tak terkendali : umur tanaman jarak tintir 23

(43) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 24 2) Definisi operasional a. Getah jarak tintir adalah getah yang didapat pada pagi hari dengan melukai tangkai daun sampai getah tidak menetes pada tanaman jarak tintir yang tumbuh di Universitas Sanata Dharma. b. Diameter zona hambat adalah zona radikal (jernih) dan iradikal (masi ada pertumbuhan bakteri tetapi lebih sedikit dibandingkan pertumbuhan disekitarnya) disekitar lubang sumuran yang berisi getah jarak tintir dengan berbagai konsentrasi. c. Difusi sumuran adalah metode yang digunakan untuk mengetahui diameter zona hambat getah jarak tintir dengan cara melubangi media dengan pelubang sumuran diameter lima milimeter dan mengisinya dengan senyawa uji lalu diinkubasi selama 24 jam pada suhu 350C. d. Dilusi merupakan metode yang digunakan untuk menentukan KHM dengan cara memasukkan masing – masing satu mililiter senyawa uji dan bakteri pada media cair lalu diinkubasi selama 24 dan 48 jam pada suhu 350C lalu dibaca kekeruhannya menggunakan Nephelometer. e. KHM adalah konsentrasi terkecil getah jarak tintir yang masih bisa menghambat pertumbuhan mikroba uji. f. Media adalah tempat tumbuh mikroba dan untuk bakteri Staphylococcus aureus, dan Escherichia coli menggunakan media Mueller-Hinton Agar (MHA) dan Mueller-Hinton Broth (MHB), sedangkan untuk jamur Candida albicans menggunakan media Potato Dextrose Agar (PDA) dan Brain Heart Infusion (BHI).

(44) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 25 g. Kontrol positif adalah senyawa yang telah teruji memiliki efek antimikroba terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans. Timol 0,2 % digunakan sebagai kontrol positif untuk Staphylococcus aureus dan Escherichia coli, sedangkan Nystatin 100.000 IU sebagai kontrol positif untuk Candida albicans. h. Waktu inkubasi adalah waktu yang diperlukan Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans untuk tumbuh, yaitu 24 jam. i. Suhu inkubasi merupakan suhu optimum untuk pertumbuhan Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans, yaitu pada 350 C. C. Bahan Penelitian Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini, yaitu getah Jarak tintir yang diambil dari Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta, bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923, dan Escherichia coli ATCC 25922, serta jamur Candida albicans ATCC 10231 dari Balai Laboratorium Kesehatan, Yogyakarta, aquadest, Aquadest steril, timol 0,2 % dari Labotatorium Farmasi Biologi Universitas Gadjah Mada, Nystatin® 100.000 IU Lapi, media MuellerHinton Agar (MHA), Mueller-Hinton Broth (MHB) Oxoid, Potato Dextrose Agar (PDA) Oxoid, Brain Heart Infusion (BHI) Oxoid. D. Alat atau Instrumen Penelitian Alat yang digunakan dalam penelitian ini, yaitu alat – alat gelas (Pyrex) seperti erlemeyer, tabung reaksi, cawan petri, dan gelas beker, gelas ukur, labu ukur, Bunsen, flakon, ball pipet, pipet ukur, jarum ose, pelubang sumuran

(45) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 26 (diameter 5 mm), mikropipet (Pipetman), jangka sorong, autoklave (tipe STMN Y.222 100VAC), oven (Memmert), inkubator (Binder), class II BSC (Biological Safety Cabinet) ESCO, BD PhoenixSpecTM Nephelometer. E. Tata Cara Penelitian 1. Determinasi tanaman Determinasi tanaman dilakukan dengan menggunakan daun, bunga, dan buah/biji yang dilakukan secara benar menggunakan kunci determinasi berdasarkan acuan, di Laboratorium Kebun Tanaman Obat Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. 2. Pengumpulan bahan Getah jarak tintir didapat dari Universitas Sanata Dharma dengan melukai tangkai daun yang tidak terlalu muda dan tua, dan getah ditampung sampai tidak menetes lagi. Pengambilan getah jarak cina dilakukan pagi hari jam 7 sebelum pengujian. 3. Skrining fitokimia getah jarak tintir Larutan stok dibuat dengan melarutkan dua mililiter getah jarak tintir menggunakan aquadest hingga 10 ml. a. Uji pendahuluan Sebanyak dua mililiter larutan stok ditambah 10 ml aquadest, dipanaskan selama 30 menit di atas air mendidih. Larutan disaring melalui kapas. Suatu larutan berwarna kuning sampai merah menunjukkan adanya senyawa yang mengandung kromofor

(46) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 27 (flavonoida, antrakinon) dengan gugus hidrofilik (gula, asam, fenolat). Pada penambahan larutan kalium hidroksida LP (beberapa tetes) warna menjadi lebih intensif (Dwiatmaka, 2012). b. Uji tanin Sebanyak dua mililiter larutan stok ditambah 10 ml aquadest, dipanaskan 30 menit dalam penangas air mendidih dan disaring. Lima mililiter filtrat ditambahkan larutan natrium klorida 2% sebanyak satu mililiter, bila terjadi suspensi atau endapan disaring melalui kertas saring, kemudian filtrat ditambah larutan gelatin 1% sebanyak lima mililiter. Terbentuknya endapan menunjukkan adanya tanin (Dwiatmaka, 2012). c. Uji saponin Sebanyak dua mililiter larutan stok ditambah 10 ml aquadest, ditutup dan dikocok kuat – kuat selama 30 detik. Tabung dibiarkan dalam posisi tegak selama 30 menit. Terbentuknya buih setinggi lebih dari tiga centimeter dari permukaan cairan menunjukkan adanya saponin. Uji saponin tersebut jika didapat hasil positif dilanjutkan dengan menentukan jenis saponin. Dua mililiter larutan stok ditambah 10 ml kloroform, digojog dan diambil lapisan bawahnya. Lalu ditambah beberapa tetes asam asetat anhidrat dan asam sulfat pekat. Terbentuknya cincin warna merah sampai ungu menunjukkan adanya kandungan saponin triterpen sedangkan warna biru sampai hijau menunjukkan saponin steroid (Depkes RI, 1995).

(47) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 28 d. Uji flavonoida Sebanyak satu mililiter larutan stok ditambah satu mililiter etanol 95% P lalu ditambahkan lagi dengan 0,1 Gram serbuk magnesium P dan 10 ml asam klorida pekat P. Warna kuning menunjukkan senyawa flavon, kalkon, dan auron. Sedangkan warna jingga menunjukkan flavonoid (Depkes RI, 1995). e. Uji alkaloida Sebanyak dua mililiter larutan stok ditambah asam klorida 1% sebanyak 10 ml, panaskan selama 30 menit dalam penangas air mendidih. Suspensi disaring dengan kapas ke dalam tabung reaksi A dan B sama banyak. Larutan A ditambah pereaksi Dragendroff 3 tetes dan larutan B ditambahkan pereaksi Mayer 3 tetes. Terbentuknya endapan pada kedua larutan tersebut menunjukkan adanya alkaloida (Dwiatmaka, 2012). f. Uji antrakinon Sebanyak dua mililiter larutan stok ditambah 10 ml kalium hidroksida 0,5 N dan satu mililiter larutan hidrogen peroksida, lalu dididihkan 2 menit. Setelah dingin suspensi disaring melalui kapas. Filtrat sebanyak lima mililiter ditambah asam asetat glasial 10 tetes sampai pH 5, lalu ditambahkan toluena 10 ml. Lapisan atas sebanyak lima mililiter diambil menggunakan pipet dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi, kemudian ditambah 0,5 – satu mililiter kalium hidroksida 0,5 N. Warna merah pada lapisan air (basa) menunjukkan adanya senyawa antrakinon (Dwiatmaka, 2012).

(48) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 29 4. Uji aktivitas antimikroba a. Persiapan konsentrasi getah jarak tintir Getah jarak tintir diambil sesuai perhitungan dan dimasukkan ke dalam labu ukur lalu ditambahkan aquadest steril hingga tanda sehingga didapat konsentrasi 100%, 50%, 25%, dan 12,5%. Perlakuan tersebut dilakukan secara aseptis untuk mengurangi kemungkinan kontaminasi. b. Pembuatan kultur mikroba uji Kultur murni Staphylococcus aureus, Escherichia coli dan Candida albicans dalam media agar miring diambil satu ose dan diinokulasikan pada media cair yang sesuai. Media cair yang digunakan untuk Staphylococcus aureus dan Escherichia coli digunakan MHB, dan media yang digunakan untuk Candida albicans yaitu BHI. Selanjutnya media iinkubasi selama 24 jam pada suhu 350 C. Kekeruhan bakteri disamakan dengan Standard Mac Farland II (Kepadatan populasi bakteri 6.108 CFU/ml). c. Pengukuran diameter zona hambat 10 ml media agar dituang ke dalam cawan petri sebagai base. Setelah mengeras ditambahkan 20 ml media yang telah dicampur satu mililiter kultur mikroba uji dan biarkan mengeras. Cara tersebut untuk memudahkan pembuatan sumuran. Setelah mengeras media dilubangi dengan pelubang sumuran diameter 5 mm sebanyak 6 lubang. 1 untuk kontrol negatif, yaitu aquadest steril, 1 lubang kontrol positif, dan 4 untuk tingkatan konsentrasi getah jarak tintir. Senyawa uji yang

(49) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 30 dimasukkan ke dalam lubang sumuran sebanyak 50 µ l dan ditunggu kering. Selanjutnya media diinkubasi terbalik dan dihitung diameter zona hambat menggunakan jangka sorong. d. Penentuan KHM Satu mililiter kultur mikroba uji dan satu mililiter getah jarak tintir diinokulasikan pada 4 ml media cair lalu diukur kekeruhannya menggunakan Nephelometer. Media diinkubasi di dalam inkubator dan diukur kembali kekeruhannya pada jam ke 24 dan 48 jam. KHM ditentukan dari konsentrasi terendah yang tidak memperlihatkan adanya pertambahan kekeruhan media. F. Tata Cara Analisis Hasil Hasil positif uji tabung sebagai skrining fitokimia ditentukan dengan perubahan warna dan atau terjadinya endapan dan diamati secara visual. Data zona hambat yang didapat dalam satuan mm dan ditentukan normalitasnya menggunakan uji Shapiro-Wilk. Selain normalitas dihitung juga variansi datanya sebagai syarat uji one way ANOVA. Jika memiliki distribusi normal dan variansi data yang sama maka digunakan uji one way ANOVA untuk mengetahui apakah ada perbedaan antara dua kelompok atau lebih. Selanjutnya, diteruskan dengan uji Post Hoc untuk mengetahui kelompok mana saja yang memiliki perbedaan. Jika salah satu syarat uji one way ANOVA tidak terpenuhi maka digunakan uji Kruskal-Wallis dan dilanjutkan dengan analisis MannWhitney.

(50) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 31 Data pada uji dilusi cair untuk menentukan KHM dihitung rata-rata dan simpangan deviasinya (SD) lalu dilihat mulai konsentrasi ke berapa terjadi penurunan kekeruhan dan ditentukan sebagai KHM.

(51) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. Determinasi tanaman Determinasi tanaman dilakukan untuk meyakinkan bahwa tanaman yang getahnya digunakan dalam penelitian ini benar – benar jarak tintir. Determinasi tanaman dilakukan di Laboratorium Kebun Tanaman Obat Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta berdasarkan acuan Flora of Java (Backer, 1965 ). Ciri- ciri jarak tintir yaitu daun berbentuk bangun perisai (peltatus) atau bulat (orbicularis), lebar 15-35 cm, bertoreh berbagi sampai lebih dari setengah daun menjadi beberapa bagian. Tangkai daun (petiole) 15-35 cm, solid; daun penumpu (stipula) terbagi menjadi beberapa, panjang dan tidak mengeras. Calyx (kelopak) merah tua; daun mahkota (petalae) berbentuk oval, merah muda, panjang 6-7 mm; buah biasanya obovoid, dengan 3 belahan vertikal, 3 ruang, berwarna kuning ketika matang. Dari hasil determinasi diketahui bahwa tanaman yang getahnya digunakan dalam penelitian benar – benar jarak tintir (Jatropha multifida Linn.). Gambar 6. Tanaman jarak tintir 32

(52) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 33 B. Pengumpulan Getah Jarak Tintir Getah jarak tintir diambil dari tanaman jarak tintir di lingkungan Kampus III Universitas Sanata Dharma. Getah jarak tintir yang didapat berwarna orange cair (gambar getah dapat dilihat pada lampiran halaman 110). Pengambilan getah dilakukan pada pagi hari karena getah yang didapat lebih banyak. Ada beberapa cara pengambilan getah, yaitu mematahkan tangkai daun, melukai tangkai daun dan melukai batang daun. Peneliti menggunakan cara pematahan tangkai daun dan melukai tangkai daun. Pematahan tangkai daun digunakan jika ingin mendapatkan getah lebih banyak, tetapi cara ini tidak boleh terlalu sering digunakan karena daun tanaman bisa habis. Proses melukai tangkai daun dapat dilakukan dengan menggunakan pisau atau cutter sehingga getah mengalir dari luka goresan. Hasil yang didapat dengan cara ini lebih sedikit daripada mematahkan tangkai daun tetapi bisa dilakukan berkali – kali karena daun tanaman masih ada. Pada penelitian ini menggunakan cara melukai tangkai daun dan sesekali menggunakan cara mematahkan tangkai daun saat ingin mendapat getah dalam jumlah yang lebih banyak. C. Skrining Fitokimia Getah Jarak Tintir Batang jarak tintir sendiri mengandung senyawa tanin, saponin, flavonoid, dan alkaloid. Skrining fitokimia bertujuan untuk mengetahui apakah getah jarak tintir memiliki golongan senyawa yang sama dengan batangnya. Beberapa senyawa yang ingin diketahui keberadaannya antara lain tanin, saponin, flavonoid, dan alkaloid. Sebelum dilakukan uji tabung, getah jarak tintir

(53) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 34 diencerken menggunakan aquadest menjadi larutan stok. Getah jarak tintir dapat larut dalam aquadest sehingga digunakan aquades sebagai pelarut. Larutan stok dibuat dengan melarutkan dua mililiter getah jarak tintir menggunakan aquadest hingga 10 ml (gambar hasil skrining fitokimia dapat dilihat pada lampiran halaman 111). 1. Uji pendahuluan Uji pendahuluan bertujuan untuk mengetahui adanya senyawa yang mengandung kromofor seperti senyawa flavonoid dan antrakinon dengan gugus hidrofilik (gula, asam, fenolat). Hasil positif uji pendahuluan yaitu warna senyawa yang berubah menjadi kuning sampai merah dan dengan penambahan larutan KOH (kalium hidroksida) warna menjadi lebih intensif. Hasil uji pendahuluan yang peneliti lakukan yaitu terbentuk warna kuning kemerahan dari warna awal kuning bening dan setelah penambahan kalium hidroksida warna menjadi merah pekat (intensif). Hal tersebut berarti bahwa getah jarak tintir mengandung golongan senyawa seperti flavonoid dan antrakinon dengan gugus hidrofilik (gula, asam, fenolat). Oleh karena adanya kemungkinan adanya kandungan antrakinon dalam getah jarak tintir maka peneliti menguji juga kandungan antrakinon dalam getah jarak tintir. 2. Uji tanin Tanin merupakan pengkelat logam, dan dapat mengendapkan protein. Uji tanin dilakukan dengan menambahkan natrium klorida 2%, jika pada pengujian terjadi suspensi maka harus disaring. Filtrat yang didapat ditambah

(54) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 35 larutan gelatin 1% lalu didiamkan beberapa saat sampai terbentuk endapan yang menunjukkan adanya tanin. Gelatin merupakan senyawa yang mengandung protein sehingga jika ditambahkan pada larutan yang mengandung tanin maka tanin akan mengendapkan protein tersebut. Reaksi pengendapan ini lebih cepat dengan penambahan natrium klorida (Prasetyo, 2013). Tanin dapat mengikat atau mengendapkan protein melalui ikatan hidrogen, ikatan ionik, hidrofobik, dan ikatan kovalen, tetapi ikatan hidrogen merupakan ikatan yang paling dominan. Ikatan hidrogen terjadi antara gugus hidroksi fenol pada tanin dengan gugus amida dan asam amino bebas (Swain, 1965). Hasil uji tanin yaitu adanya endapan setelah penambahan gelatin sehingga disimpulkan bahwa getah jarak tintir mengandung tanin. Ikatan antara tanin dengan protein yang mengakibatkan terbentuknya endapan dapat dilihat pada gambar 7. Gambar 7. Ikatan antara tanin dengan protein (Lee, 2014).

(55) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 36 3. Uji saponin Uji saponin dilakukan dengan menambahkan aquadest ke dalam tabung berisi larutan stok lalu digojog kuat – kuat selama beberapa detik detik. Terbentuknya buih dengan tinggi lebih dari 3 cm yang bertahan selama lebih dari 30 menit menandakan adanya tanin. Sebelum penarikan kesimpulan ditunggu 30 menit supaya buih yang terbentuk murni karena saponin dan bukan karena penggojogan yang kuat. Saponin mempunyai gugus hidrofob dan hidrofil sehingga menyerupai surfaktan/sabun yang dapat menurunkan tegangan permukaan antara udara/gas dengan air sehingga terbentuk emulsi gas dalam air (Prasetyo, 2013). Uji tanin yang dilakukan terbentuk buih setinggi 4 cm yang bertahan selama 30 menit lebih berarti bahwa getah jarak tintir mengandung saponin. Uji saponin dilanjutkan untuk mengetahui jenis saponin yaitu triterpen atau steroid. Larutan stok ditambahkan kloroform untuk menyari triterpen dan steroid, hasilnya terbentuk dua lapisan dan kloroform akan berada dibagian bawah tabung reaksi. Lapisan bagian atas dipisahkan dengan asumsi tidak terkandung senyawa yang dituju lagi. Selanjutnya ditambahkan asam asetat anhidrat dan asam sulfat pekat (pereaksi Liebermann-Burchard) dan hasil positif ditandai dengan terbentuknya warna hijau sampai biru (steroid) dan merah sampai ungu (triterpen). Hasil uji triterpen/steroid menunjukkan terbentuknya warna merah jingga sehingga dapat disimpulkan bahwa getah jarak tintir mengandung saponin jenis triterpen.

(56) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 37 Mekanisme reaksi terpenoid dengan pereaksi Liebermann-Burchard diawali dengan proses asetilasi gugus hidroksil menggunakan asam asetat anhidrida. Gugus asetil akan lepas sehingga terbentuk ikatan rangkap. Selanjutnya, terjadi pelepasan hidrogen sehingga senyawa mengalami resonansi yang bertindak sebagai elektrofil atau karbokation. Serangan karbokation mengakibatkan adisi elektrofilik yang diikuti pelepasan hidrogen mengakibatkan perpanjangan konjugasi sehingga muncul warna merah – ungu. Reaksi terpenoid dengan pereaksi Liebermann-Burchard menghasilkan warna merah-ungu dapat dilihat pada gambar 8. Gambar 8. Reaksi terpenoid dengan pereaksi Liebermann-Burchard (Siadi, 2012)

(57) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 38 4. Uji flavonoid Pada uji flavonoid ditambahkan etanol untuk menyari flavonoid dari getah jarak tintir. Reaksi antara flavonoid yang merupakan senyawa fenol dengan magnesium dalam suasana asam membentuk warna kuning atau jingga. Hasil uji flavonoid menunjukkan warna kuning yang berangsur – angsur berubah menjadi jingga sehingga disimpulkan bahwa getah jarak tintir mengandung flavonoid. Mekanisme terbentuknnya warna ungu/jingga pada uji flavonoid dapat dilihat pada gambar 9. Gambar 9. Mekanisme reaksi antara flavonoid dengan magnesium (Raharjo, 2010) 5. Uji alkaloida Penambahan asam klorida pada uji alkaloid bertujuan untuk mengubah alkaloid menjadi garam alkaloid yang larut air. Pereaksi yang digunakan dalam uji alkaloid ini yaitu, Mayer, Dragendroff dan asam pikrat. Hasil positif jika terbentuk endapan. Pada uji alkaloid getah jarak tintir didapat hasil adanya endapan pada tabung dengan penambahan pereaksi Dragendroff dan asam pikrat sehingga disimpulkan bahwa getah jarak tintir mengandung alkaloid. Endapan

(58) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 39 pada penambahan pereaksi Dragendroff berwarna coklat bening sedangkan pada penambahan pereaksi asam pikrat terbentuk endapan coklat kehitaman. Alkaloid mengandung atom hidrogen yang dapat bereaksi dengan logam K+ pereaksi Mayer (kalium tertaiodomerkurat(II)) dan pereaksi Dragendorff (Kalium tertaiodobismutat) membentuk kompleks kalium - alkaloid yang mengendap. Mekanisme reaksinya dapat dilihat pada gambar 10 dan 11. Gambar 10. Mekanisme reaksi alkaloid dengan pereaksi Mayer (Marliana, 2005) Gambar 11. Mekanisme reaksi alkaloid dengan pereaksi Dragendorff (Marliana, 2005) 6. Uji antrakinon Uji antrakinon dilakukan dengan menambahkan 10 ml kalium hidroksida dan hidrogen peroksida lalu dididihkan. Setelah dingin ditambahkan asam asetat glasial dan toluen. Lapisan atas pada tabung uji diambil dan ditambahkan kalium hidroksida. Hasil positif yaitu adanya warna merah. Hasil

(59) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 40 uji antrakinon getah jarak tintir tidak memberikan warna merah sehingga dapat disimpulkan bahwa getah jarak tintir tidak mengandung antrakinon. Hasil keseluruhan uji tabung pada skrining fitokimia yang telah dilakukan dapat dilihat pada tabel I. Tabel I. Hasil uji tabung pada skrining fitokimia getah jarak tintir No. Pengujian Hasil 1 Uji pendahuluan + 2 Uji tanin + 3 Uji saponin + 4 Uji triterpen/steroid 5 Uji flavonoid + 6 Uji alkaloid + 7 Uji antrakinon - + (triterpen) Kelemahan penelitian ini, yaitu pada skrining fitokimia yang dilakukan hanya sebatas uji tabung dan tidak menggunakan standar sehingga tidak bisa langsung menyatakan bahwa benar-benar terkandung senyawa tersebut diatas pada getah jarak tintir. Untuk meyakinkan bahwa senyawa tersebut benar – benar terkandung dalam getah jarak tintir, peneliti menyarankan dilakukannya KLT (Kromatografi Lapis Tipis). Menurut Sudjadi (2010) kelebihan KLT yaitu senyawa yang dituju akan dipisahkan dahulu sebelum diidentifikasi sehingga senyawa yang teridentifikasi lebih spesifik. Indikasi pemisahan komponen dapat dilakukan dengan pereaksi warna, fluoresensi, atau dengan radiasi menggunakan sinar ultraviolet.

(60) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 41 D. Uji Potensi Antimikroba Getah Jarak Tintir Secara Difusi Sumuran Uji potensi antimikroba bertujuan untuk mengetahui apakah getah jarak tintir memiliki daya hambat terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans. Pengujian antimikroba ini menggunakan metode difusi sumuran dan teknik aseptis seperti penggunaan bunsen dan mengerjakan pengujian dalam BSC. Teknik aseptis dilakukan supaya mengurangi kemungkinan kontaminasi. Metode difusi untuk menentukan diameter zona hambat sendiri ada 2 yaitu sumuran dan paper disc. Prinsip metode difusi sumuran, yaitu senyawa uji yang berada di lubang sumuran akan berdifusi ke sekelilingnya dan menghambat pertumbuhan bakteri maupun jamur pada media. Prinsip metode paper disc, yaitu senyawa uji diserap oleh paper disc dan akan berdifusi ke sekelilingnya. Senyawa uji yang memiliki efek antibakteri maupun antifungi akan memberikan zona jernih disekitar lubang sumuran ataupun paper disc. Pemilihan metode yang digunakan yaitu berdasarkan kepolaran senyawa yang akan diuji. Metode sumuran dapat digunakan untuk senyawa polar maupun nonpolar, sedangkan paper disc hanya bisa untuk senyawa yang polar. Getah jarak tintir merupakan senyawa polar sehingga bisa menggunakan metode sumuran maupun paper disc. Penelitian mengenai aktivitas antibakteri getah jarak tintir terhadap bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 yang dilakukan oleh Darmawi (2013) menggunakan metode difusi paper disc, sedangkan pada penelitian ini menggunakan metode difusi sumuran. Peneliti menggunakan

(61) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 42 metode yang berbeda karena ingin membandingkan apakan dengan metode yang berbeda akan memberikan hasil yang berbeda. Mikroba uji yang digunakan yaitu Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, dan Candida albicans ATCC 10231. ATCC sendiri adalah kepanjangan dari American Type Culture Collection. Sistem penomoran ini berguna untuk membedakan strain mikroba pada jenis mikroba yang sama. Jenis mikroba yang sama bisa memiliki nomor ATCC yang berbeda karena memiliki gen yang berbeda. Strain ATCC pada bakteri maupun jamur ini digunakan sebagai referensi dengan mencocokkan sifat- sifat/ karakteristik mikrobanya. Bakteri Escherichia coli ATCC 25922 memiliki antigen serotype 06 biotype 1, Candida albicans ATCC 10231 memiliki antigen serotype A, sedangkan pada Staphylococcus aureus ATCC 25923 belum diketahui. Media yang digunakan pada uji antibakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli yaitu MHB (Mueller-Hinton Broth) dan MHA (Mueller-Hinton Agar), sedangkan media yang digunakan sebagai uji antifungi Candida albicans yaitu PDA (Potato Dextrose Agar) dan BHI (Brain Heart Infusion). Media uji yang digunakan harus bisa menumbuhkan bakteri atau jamur uji. Berdasarkan orientasi, bakteri dan jamur uji dapat tumbuh merata pada media uji. Langkah awal pengujian yaitu menumbuhkan bakteri pada media MHB dan jamur pada media BHI selama 24 jam. Media uji akan bertambah keruh dibandingkan semula karena adanya pertumbuhan mikroba. Kekeruhan media dibaca menggunakan alat Nephelometer dan disetarakan dengan Standard Mac

(62) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 43 Farland II (Kepadatan populasi bakteri 6.108 CFU/ml). Penyetaraan ini bertujuan supaya bakteri dan jamur yang ditambahkan selalu sama jumlahnya. Nephelometer merupakan alat yang digunakan untuk mengukur pertumbuhan mikroba melalui kekeruhan media. Satuan yang digunakan, yaitu CFU (colony forming unit) per ml. Prinsip alat tersebut hampir mirip dengan spektrofotometri di mana sinar yang datang akan mengenai objek dan sinar yang diteruskan akan dibaca oleh detektor dan diolah menjadi output data dalam satuan CFU/ml. Gambar 12. BD PhoenixSpecTM Nephelometer (Miclev, 2014) Suspensi bakteri dan jamur yang telah setara dengan Standard Mac Farland II diinokulasikan ke dalam media yang akan digunakan dalam difusi sumuran. Untuk bakteri uji digunakan media MHA sedangkan untuk jamur digunakan media PDA. Satu cawan petri berisi 10 ml agar base tanpa mikroba uji dan 20 ml media dengan penambahan satu mililiter suspensi mikroba uji. Penggunaan agar base ini bertujuan untuk memudahkan pembuatan lubang

(63) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 44 sumuran. Media dituang ke dalam cawan petri setelah agar base mengeras. Media yang telah mengeras kemudian dilubangi dengan pelubang sumuran. Pelubang sumuran yang digunakan berdiameter lima milimeter. Media pada setiap petri dilubangi sebanyak enam bagian. Satu lubang bagian tengah sebagai kontrol negatif, dan lima lubang disekeliling sebagai satu kontrol positif dan empat konsentrasi getah jarak tintir. Volume senyawa uji yang dimasukkan dalam lubang sumuran, yaitu 50 µl. Setelah media diinkubasi selama 24 jam diamati dan diukur zona jernih yang terbentuk disekeliling lubang sumuran. Diameter zona jernih diukur menggunakan jangka sorong. Pengujian potensi antimikroba ini menggunakan lima kali replikasi, satu kontrol media dan satu kontrol pertumbuhan mikroba. Kontrol media digunakan untuk melihat apakah media yang digunakan terkontaminasi atau tidak. Kontrol pertumbuhan mikroba ini untuk melihat apakah mikroba yang tumbuh pada perlakuan sama dengan pada kontrol. Hasil percobaan menunjukkan bahwa media yang digunakan tidak terkontaminasi dan bahwa mikroba yang tumbuh pada perlakuan sama dengan mikroba uji pada kontrol. Kontrol positif yang digunakan pada pengukuran diameter zona hambat getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli yaitu timol 0,2%. Penggunaan timol sebagai kontrol positif karena timol merupakan senyawa fenol dan getah jarak tintir telah diketahui mengandung senyawa golongan fenol seperti saponin, tanin dan flavonoid, sehingga diharapkan kontrol positif yang digunakan memiliki mekanisme antibakteri yang sama. Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Rakasiwi (2014), timol pada konsentrasi 0,2%

(64) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 45 memberikan diameter zona hambat yang lebih baik dibandingkan konsentrasi 1%, 0,8%, dan 0,4%. Diameter zona hambat timol 0,2% pada penelitian tersebut adalah 14,33 mm terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923, dan 12,33 mm terhadap Escherichia coli ATCC 25922. Kontrol positif yang digunakan pada pengukuran diameter zona hambat getah jarak tintir terhadap Candida albicans yaitu Nystatin 100.000 IU. Penggunaan kontrol positif ini karena pada penelitian yang dilakukan oleh Adelosa (2007) menggunakan Nystatin 100.000 IU sebagai pembanding. Menurut Priyanto (2010), nystatin bekerja dengan mengikat ergosterol pada dinding sel jamur. Terikatnya ergosterol menyebabkan sel jamur rusak dan lisis. 1. Uji potensi antibakteri getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 Getah jarak tintir memiliki efek antibakteri terhadap Staphylococcus aureus yang terlihat dari adanya zona jernih / zona hambat disekitar lubang sumuran (gambar dapat dilihat pada lampiran hal 114). Kontrol negatif aquadest yang digunakan sebagai pelarut getah jarak tintir tidak memiliki zona hambat sehingga zona hambat yang dihasilkan murni dari getah jarak tintir. Kontrol negatif diberi nilai 5 mm yang merupakan diameter sumuran sebagai faktor koreksi. Zona jernih yang terbentuk pada kontrol positif timol 0,2% pada uji ini tidak bulat sehingga untuk menentukan diameter zona hambatnya diukur dari 4 diameter yang berbeda lalu diambil rata – rata. Hasil pengukuran diameter zona hambat getah jarak tintir terhadap bakteri Staphylococcus aureus ditunjukkan pada tabel II.

(65) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 46 Tabel II. Diameter zona hambat getah jarak tintir terhadap bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 Konsentrasi (%) Diameter Zona Hambat (mm) terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 12,5 10,8 ± 0,447 25 12,4 ± 0,894 50 13,6 ± 0,548 100 17,4 ± 0,548 Kontrol positif Kontrol negatif 20,2 ± 0,837 5 ±0,000 a b c d e f Keterangan : Angka – angka yang diikuti huruf yang tidak sama menunjukkan perbedaan yang bermakna pada taraf kepercayaan 95% (n = 5) Dari data diameter zona hambat dapat diketahui bahwa dengan penambahan konsentrasi akan menambah diameter zona hambat. Menurut Sari (2011) kekuatan antibakteri dibagi menjadi beberapa tingkatan yaitu : diameter zona hambat lebih dari 20 mm berati sangat kuat, 10-20 mm berarti kuat, 5-10 mm berarti sedang dan kurang dari 5 mm berarti lemah. Zona hambat getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus pada konsentrasi 12,5%, 25%, 50%, dan 100% dapat digolongkan memiliki daya hambat kuat. Data diameter zona hambat ini hampir sama jika dibandingkan dengan hasil penelitian yang dilakukan Darmawi (2013). Rata-rata diameter zona hambat getah jarak tintir pada penelitian Darmawi (2013) dengan konsentrasi 25%, 50%, dan 100% berturut - turut yaitu 13 mm, 13,5 mm, dan 15,7 mm. Ketiga diameter zona hambat tersebut tergolong dalam daya hambat kuat.

(66) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 47 Hasil uji statistik menyatakan bahwa data diameter zona hambat pada bakteri Staphylococcus aureus memiliki variansi yang tidak sama dan sebaran data tidak normal sehingga selanjutnya diuji menggunakan uji Kruskal Wallis. Uji Kruskal Wallis diameter zona didapat p=0,000 (p<0,05) yang berarti bahwa paling tidak terdapat perbedaan diameter zona hambat antara dua kelompok. Untuk mengetahui kelompok mana saja yang memiliki perbedaan yang bermakna diuji menggunakan Mann-Whitney. Hasil uji Mann-Whitney menyatakan bahwa semua kelompok konsentrasi memiliki perbedaan yang bermakna satu dengan yang lain (data dapat dilihat pada lampiran hal 93). Hal ini berarti bahwa getah jarak tintir memiliki aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus. 2. Uji potensi antibakteri getah jarak tintir terhadap Escherichia coli ATCC 25922 Getah jarak tintir memiliki aktivitas antibakteri terhadap Escherichia coli yang terlihat dari adanya zona hambat disekitar lubang sumuran (gambar dapat dilihat pada lampiran hal 115). Aquadest steril sebagai kontrol negatif tidak memberikan zona jernih sehingga dipastikan bahwa zona hambat yang dihasilkan murni dari getah jarak tintir. Setelah inkubasi 24 jam, diameter zona hambat diukur menggunakan jangka sorong. Hasil pengukuran diameter zona hambat terhadap Escherichia coli dapat dilihat pada tabel III.

(67) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 48 Tabel III. Diameter zona hambat getah jarak tintir terhadap Escherichia coli ATCC 25922 Konsentrasi (%) Diameter Zona Hambat (mm) terhadap Escherichia coli ATCC 25922 12,5 11,4 ± 0,548 25 13,4 ± 0,578 50 15,8 ± 0,837 100 17,6 ± 0,894 Kontrol positif Kontrol negatif 14,2 ± 0,447 5 ±0,000 a b c d e f Keterangan : Angka – angka yang diikuti huruf yang tidak sama menunjukkan perbedaan yang bermakna pada taraf kepercayaan 95% (n = 5) Dari data diameter zona hambat ini juga dapat disimpulkan bahwa dengan penambahan konsentrasi akan menambah diameter zona hambat. Diameter zona hambat getah jarak tintir konsentrasi 12,5% sampai 100% memiliki rentang dari 11,4 mm sampai 17,6 mm sehingga dapat digolongkan sebagai daya hambat kuat menurut penggolongan Sari (2011). Data diameter zona hambat pada bakteri Escherichia coli juga memiliki variansi yang tidak sama, sebaran data tidak normal dan nilai p=0,000 pada uji Kruskal Wallis seperti pada data diameter zona hambat Staphylococcus aureus. Hasil uji Mann-Whitney menyatakan bahwa semua kelompok konsentrasi memiliki perbedaan yang bermakna satu dengan yang lain dan terhadap kontrol positif dan kontrol negatif. Hal ini berarti bahwa getah jarak tintir memiliki aktivitas antibakteri terhadap Escherichia coli. Hasil uji Mann-Whitney ditunjukkan pada lampiran halaman 80.

(68) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 49 3. Uji potensi antifungi getah jarak tintir terhadap Candida albicans ATCC 10231 Pengujian potensi antifungi ini menggunakan lima kali replikasi, satu kontrol media dan satu kontrol pertumbuhan bakteri. Hasil percobaan menunjukkan bahwa media yang digunakan tidak terkontaminasi dan bahwa jamur yang tumbuh pada perlakuan sama dengan jamur pada kontrol. Hasil pengukuran diameter zona hambat dapat dilihat pada tabel IV. Tabel IV. Diameter zona hambat getah jarak tintir terhadap bakteri Candida albicans ATCC 10231 Konsentrasi (%) Diameter Zona Hambat (mm) terhadap Candida albicans ATCC 10231 12,5 9,6 ± 0,245 25 11,2 ± 0,200 50 13,6 ± 0,245 100 15,8 ± 0,200 Kontrol positif 18,8 ± 0,200 Kontrol negatif 5 ±0,000 a b c d e f Keterangan : Angka – angka yang diikuti huruf yang tidak sama menunjukkan perbedaan yang bermakna pada taraf kepercayaan 95% (n = 5) Zona hambat ada dua, yaitu zona radikal dan iradikal. Zona radikal merupakan zona yang jernih tanpa terlihat pertumbuhan mikroba uji sedangkan zona iradikal merupakan zona dimana masih terdapat pertumbuhan mikroba uji tetapi terlihat lebih jernih jika dibandingkan dengan daerah sekitarnya (Yulianti, 2011). Zona hambat getah jarak tintir yang teramati pada Candida albicans merupakan zona iradikal (gambar dapat dilihat pada lampiran hal 116). Pada saat pengamatan terlihat bahwa

(69) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 50 pertumbuhan Candida albicans pada daerah disekeliling difusi getah jarak tintir lebih sedikit dibandingkan sekitarnya. Data diameter zona hambat pada Candida albicans memiliki variansi yang tidak sama, sebaran data tidak normal dan nilai p=0,000 pada uji Kruskal Wallis sehingga selanjutnya diuji menggunakan Mann-Whitney. Hasil uji Mann-Whitney menyatakan bahwa semua kelompok konsentrasi memiliki perbedaan yang bermakna satu dengan yang lain dan terhadap kontrol positif dan kontrol negatif. Hal ini berarti bahwa getah jarak tintir memiliki aktivitas antifungi terhadap Candida albicans meskipun kecil. Hasil uji Mann-Whitney ditunjukkan pada lampiran halaman 106. Getah Jarak tintir telah diujikan langsung sebagai pengobatan oral candidiasis pada anak di Nigeria dan efek penyembuhan lesi akibat infeksi Candida albicans lebih cepat dari Nystatin (Adesola, 2007), sedangkan pada penelitian ini getah jarak tintir kurang dapat menghambat pertumbuhan jamur Candida albicans jika dibandingkan kontrol positif Nystatin. Hal ini dapat terjadi karena perbedaan tempat tumbuh (faktor edafik). Penelitian Widyastuti (2003) menyatakan bahwa faktor tanah dapat mempengaruhi kadar kandungan metabolit sekunder tanaman dengan jenis yang sama. E. Penentuan KHM Getah Jarak Tintir terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923, dan Escherichia coli ATCC 25922 secara Dilusi Cair Getah jarak tintir memiliki daya hambat terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli sehingga penelitian dapat dilanjutkan untuk mengetahui berapa nilai KHM. Konsentrasi terkecil yaitu 12,5% memiliki daya

(70) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 51 hambat terhadap kedua bakteri, sehingga penentuan KHM menggunakan konsentrasi tersebut sebagai acuan untuk menentukan seri konsentrasi yang akan diuji. Seri konsentrasi yang digunakan harus mencakup konsentrasi di bawah dan di atas 12,5%. Seri konsentrasi tersebut yaitu, 1% ; 4% ; 7% ; 10% ; 13% ; 16% ; 19% ; 21% ; dan 25% dengan tiga kali replikasi. Pengujian ini menggunakan empat mililiter MHB, satu mililiter kultur bakteri, dan satu mililiter getah jarak tintir. Kekeruhan media diukur pada jam ke 0, 24 dan 48 jam. Media yang bertambah keruh setelah inkubasi 24 ataupun 48 jam menandakan bahwa senyawa uji tidak dapat menghambat pertumbuhan bakteri sedangkan media yang bertambah jernih berarti bahwa senyawa uji mampu menghambat bakteri uji. Pada penelitian ini, kekeruhan media sangat pekat dan Nephelometer tidak dapat membaca kekeruhannya sehingga dilakukan pengenceran. Cara pengenceran tersebut, yaitu dengan mengambil setengah mililiter media yang sudah divortex lalu diencerkan menggunakan aquadest steril hingga 5 ml pada tabung lain. Nilai kekeruhan yang didapat lalu dikalikan dengan faktor pengenceran. KHM merupakan konsentrasi terendah senyawa antimikroba yang menghambat pertumbuhan bakteri setelah inkubasi sehari, sedangkan KBM merupakan konsentrasi terendah senyawa antimikroba yang dapat mencegah pertumbuhan bakteri saat disubkulturkan pada media tanpa senyawa antimikroba (Andrews, 2001).

(71) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 52 1. Penentuan KHM getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 Kultur Staphylococcus aureus yang ditambah dengan berbagai konsentrasi getah jarak tintir diinkubasi selama 48 jam dan diukur kekeruhannya pada 0 jam, 24 jam, dan 48 jam. Kekeruhan media pada uji dilusi cair bakteri Staphylococcus aureus ditunjukkan dalam tabel V. Tabel V. Kekeruhan media pada dilusi cair bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 Konsentrasi (%) 1 4 7 10 13 16 19 22 25 Sebelum inkubasi (0 jam) 2,473 ± 0,050 15,533 ± 0,757 22,900 ± 0,700 28,600 ± 0,818 35,967 ± 0,945 43,200 ± 1,664 46,833 ± 0,666 50,600 ± 1,452 52,950 ± 0,071 Inkubasi 24 jam Inkubasi 48 jam 2,853 ± 0,040 13,533 ± 0,850 19,933 ± 0,750 24,867 ± 0,850 31,700 ± 0,954 37,933 ± 1,457 40,633 ± 0,416 43,933 ± 1,662 45,750 ± 0,353 3,177 ± 0,050 12,667 ± 0,115 19,5333 ± 0,757 24,400 ± 0,700 31,399 ± 0,793 37,800 ± 1,646 40,400 ± 0,264 43,233 ± 1,721 45,767 ± 0,503 Pada tabel V terlihat bahwa pengurangan kekeruhan media mulai terjadi pada konsentrasi 4% dengan waktu inkubasi 24 dan 48 jam. Artinya pada konsentrasi 4% pertumbuhan Staphylococcus aureus mulai dapat dihambat. Setelah inkubasi 48 jam, pada konsentrasi 4% ke atas kekeruhan medianya tetap berkurang yang menandakan bahwa daya hambat dapat bertahan selama 48 jam. Intensitas antibakteri getah jarak tintir juga perlu diketahui bersifat bakteriostatik ataukah bakterisidal. Cara mengetahuinya dengan uji penegasan, yaitu dengan mengambil satu ose dari media uji yang mengalami penurunan kekeruhan lalu diinokulasikan secara streak plate pada media agar yang baru. Adanya pertumbuhan bakteri menunjukkan bahwa senyawa uji bersifat

(72) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 53 baktriostatik, yaitu hanya menghambat pertumbuhan bakteri tanpa mematikannya sehingga ketika bakteri ditanam dalam media yang baru maka dapat berkembang biak kembali. Bakteri yang tidak tumbuh setelah diinokulasikan ke media yang baru menunjukkan bahwa senyawa uji bersifat bakteriostatik, yaitu dapat membunuh bakteri. Pada penelitian ini konsentrasi getah jarak tintir yang akan diuji penegasan diambil secara random dimulai dari konsentrasi 4% (sebagai konsentrasi terkecil yang sudah memberikan penghambatan pertumbuhan bakteri), 16% dan 22%. Hasil penegasan yang dilakukan menunjukkan bahwa bakteri Staphylococcus aureus dapat tumbuh kembali membentuk koloni (gambar penegasan dapat dilihat pada lampiran halaman 117) sehingga dapat disimpulkan konsentrasi 4% merupakan KHM. Nilai KHM getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus pada penelitian Ongtengco (1992) yaitu 0,098%. Nilai KHM tersebut lebih kecil jika dibandingkan dengan KHM yang didapat pada penelitian ini, yaitu 4%. Semakin besar KHM maka aktivitas antimikrobanya semakin kecil karena diperlukan lebih banyak senyawa antimikroba untuk menghambat pertumbuhan mikroba. 2. Penentuan KHM getah jarak tintir terhadap Escherichia coli ATCC 25922 Penentuan KHM getah jarak tintir terhadap Escherichia coli dilakukan menggunakan metode dilusi cair. Media yang telah ditambahkan bakteri Escherichia coli dan getah jarak tintir berbagai konsentrasi diinkubasi dan

(73) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 54 diukur kekeruhannya pada jam ke 0, 24, dan 48 jam. Data kekeruhan media pada dilusi cair bakteri Escherichia coli dapat dilihat dalam tabel VI. Tabel VI. Kekeruhan media pada dilusi cair bakteri Escherichia coli ATCC 25922 Konsentrasi (%) 1 4 7 10 13 16 19 22 25 Sebelum inkubasi (0 jam) 4,100 ± 0,264 14,333 ± 0,152 24,800 ± 0,259 33,400 ± 0,557 37,967 ± 0,737 39,867 ± 0,665 41,800 ± 0,400 42,933 ± 0,750 44,140 ± 0,353 Inkubasi 24 jam Inkubasi 48 jam 7,533 ± 0,321 17,533 ± 1,137 24,000 ± 0,557 30,133 ± 0,321 34,267 ± 0,665 35,700 ± 0,436 36,967 ± 0,404 37,767 ± 0,814 38,733 ± 0,251 8,833 ± 0,115 20,533 ± 0,208 26,600 ± 0,721 42,733 ± 0,665 52,433 ± 0,404 61,133 ± 0,757 65,600 ± 0,721 67,100 ± 0,721 69,333 ± 0,209 Pada tabel IV terlihat bahwa kekeruhan media mulai berkurang pada konsentrasi 7% dengan waktu inkubasi 24 jam yang menunjukkan adanya penghambatan pertumbuhan bakteri pada media. Namun pada inkubasi 48 jam kekeruhan medianya bertambah dibandingkan sebelum inkubasi pada semua konsentrasi yang menandakan bahwa daya hambat getah jarak tintir tidak sampai 48 jam. Uji penegasan dilakukan untuk mengetahui apakah konsentrasi 7% merupakan KHM atau KBM. Konsentrasi getah jarak tintir yang akan diuji penegasan diambil secara random dimulai dari konsentrasi 7% (sebagai konsentrasi terkecil yang sudah memberikan penghambatan pertumbuhan bakteri), 19% dan 25%. Hasil uji penegasan yaitu bakteri Escherichia coli masih dapat tumbuh pada media yang baru (gambar penegasan dapat dilihat pada lampiran halaman 117) sehingga dapat disimpulkan bahwa konsentrasi 7% merupakan nilai KHM getah jarak tintir terhadap bakteri Escherichia coli.

(74) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 55 Nilai KHM getah jarak tintir terhadap Escherichia coli berdasarkan penelitian Ongtengco (1992) yaitu 1,56%. Nilai ini lebih kecil dibandingkan nilai KHM hasil penelitian ini yaitu 7%. Hal ini dapat terjadi karena perbedaan tempat tumbuh dapat mempengaruhi kadar senyawa dari tanaman dengan spesies yang sama. F. Mekanisme Antimikroba Golongan Senyawa yang Terkandung Dalam Getah Jarak Tintir Hasil skrining fitokimia dengan menggunakan uji tabung diketahui bahwa getah jarak tintir kemungkinan mengandung tanin, flavonoid, saponin, dan alkaloid. Golongan senyawa tersebut telah diketahui dapat berperan sebagai antimikroba. Hal ini terbukti dalam penelitian ini karena getah jarak tintir memiliki aktivitas antimikroba terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, dan Candida albicans ATCC 10231. Aktivitas antimikroba tersebut ditunjukkan dengan adanya diameter zona hambat getah jarak tintir dan penghambatan pertumbuhan bakteri uji pada penentuan nilai KHM. Senyawa golongan tanin, flavonoid, saponin, dan alkaloid memiliki mekanisme antimikroba yang berbeda- beda. Menurut Robinson (cit., Nuria, 2009), tanin dapat berperan sebagai antimikroba dengan cara menghambat pembentukan sel bakteri dengan cara menghambat enzim reverse transkriptase dan DNA topoisomerase, sedangkan mekanisme saponin sebagai antibakteri, yaitu dengan menurunkan tegangan permukaan sehingga terjadi kebocoran sel yang dapat berujung pada kematian.

(75) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 56 Saponin triterpen menurut Hostetmann (2005) memiliki aktivitas antifungi dengan cara membentuk kompleks dengan sterol pada membran plasma yang dapat merusak membran sel. Gilman (cit., Sari, 2011) menyebutkan bahwa flavonoid bekerja dengan cara menyerang fosfolipid penyusun dinding sel bakteri sehingga menyebabkan kematian bakteri. Mekanisme alkaloid sebagai antibakteri yaitu dengan mengganggu komponen penyusun peptidoglikan sehingga dinding sel tidak terbentuk secara utuh dan mengakibatkan kematian sel (Juliantina, 2009).

(76) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI BAB V KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan 1. Getah jarak tintir memiliki aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 dan Escherichia coli ATCC 25922 dengan zona hambat radikal, serta aktivitas antifungi terhadap Candida albicans ATCC 10231 dengan zona hambat iradikal. 2. Konsentrasi Hambat Minimun (KHM) getah jarak tintir pada bakteri Staphylococcus aureus, yaitu 4% sedangkan pada bakteri Escherichia coli, yaitu 7%. 3. Golongan senyawa mungkin terkandung dalam getah jarak tintir, yaitu golongan saponin jenis triterpen, tanin, alkaloid, dan flavonoid. B. Saran 1. Perlu dilakukan pengujian aktivitas antimikroba getah jarak tintir terhadap bakteri dan jamur lain. 2. Perlu dilakukan uji KLT untuk menegaskan kandungan senyawa pada getah jarak tintir. 57

(77) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 58 DAFTAR PUSTAKA Adesola, A.T., and Adetunji, O.O., 2007, The Efficacy of Jatropha multifida in the Management of Oral Candidiasis : A Preliminary Study, The Internet Journal of Alternative Medicine, volume 4. Aiyelaagbe, O.O., Oguntuase, B.J., Arimah, B.D., and Adeniyi, B.A., 2008, The Antimicrobial Activity of Jatropha multifida Extracts and Chromatographic Fractions Against Sexually Transmitted Infections, J.Med.Sci., 8(2), 143-147. Andrews, J.M., 2001, Determination of Minimum Inhibitory Concentrations, JAC, 47, 5-16. Anonim, 2012, Jarak Tintir, http://www.plantamor.com/index.php? plant=729, diakses pada 01 Mei 2013. Backer, C.A., and Brink, R.C.B.V.D., 1965, Flora of Java (Spermatophytes only), N.V.P. Noordhoff-Groningen, Netherlands, pp. 441, 449, 494. Begg, J., and Gaskin, T., 1994, Jatropha multifida, http://www.inchem.Org /documents/pims /plant/jmulti .htm# SectionTitle:3.1Description of the plant, diakses pada 01 Mei 2013. Behrman, Kliegman, and Arvin, 1998, Ilmu Kesehatan Anak, Edisi 15, diterjemahkan oleh Wahab, S.S., EGC, Jakarta, pp. 976. Bioweb, 2008, Papilio Xuthus, https://bioweb.uwlax.edu/bio203/s2014/ekhoff_ bria/facts.htm, diakses pada 24 Juni 2014. Campbell, N.A., and Reece, J.B., 2003, Biologi, Erlangga, Jakarta, 108. Dahlan, M.,S., 2009, Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan, Edisi 4, Penerbit Salemba Medika, Jakarta. Darmawi, Manaf, Z.H., dan Putranda, F., 2013, Daya Hambat Getah Jarak Cina (Jatropha multifida L.) terhadap Staphylococcus aureus Secara In Vitro, Jurnal Medika Veterinaria, 7. Depkes RI. 1995, Materia Medika Indonesia, Jilid VI, Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta, hal. 333-337. Dwiatmaka, Y., 2012, Petunjuk Praktikum Farmakognosi Fitokimia, Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta, hal.11-12. Edber, S.C., 1986, Antibiotik dan Infeksi, EGC, Jakarta, 15-20.

(78) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 59 Evans, W. C., 2009, Trease and Evans Pharmacognosy, 15th Edition, W.B. Saunders, Philadelphia, pp. 287-288. Extension, 2010, Staphylococcus aureus, http://www.extension.org /pages /28432/ staphylococcus-aureus#.U3uL1vl_u9Q, diakses pada 20 Mei 2014. Generasibiologi, 2012, Dinding Sel Bakteri, http://www.generasibiologi.com/ 2012 /09/dinding-sel-bakteri.html, diakses pada 26 Juni 2014. Gilman, A.G., Rall, A.N., and Taylor, P., (cit., Sari, 2011), The Pharmalogical Basic of the Raupetics, Pengamon Press Inc. Hariana, H.A., 2004, Tumbuhan Obat dan Khasiatnya, Penebar Swadaya, Bogor, hal. 138-139. Harmita, and Radji, M., 2008, Buku Ajar Analisis Hayati, Edisi III, EGC, Jakarta, hal. 4. Hostetmann and Marson, A., 2005, Saponins, Cambridge University Press, New York, pp. 1-5, 224. James, J., Baker, C., and Swain, H., 2006, Prinsip-prinsip Sains untuk Keperawatan, Erlangga, Jakarta, hal. 115. Jawetz, E., Melnick, J.L., dan Adelberg, E.A., 1996, Mikrobiologi Kedokteran, Edisi 20, EGC, Jakarta, hal. 211-217, 238-240, 627-629. Juliantina, F., Citra, D.A., Nirwani, B., Nurmasitoh, T., and Bowo, E.T., 2009, Manfaat Sirih Merah (Piper crocatum) sebagai Agen Anti Bakterial terhadap Bakteri Gram Positif dan Gram Negatif, JKKI, 1,1. Juniarti, et al., 2012, Effects of Methanolic Jatropha multifida L. Extract in Wound Healing Assessed by the Total Number of PMN Leukocytes and Fibroblasts, Makara Journal of Science, 16(3), 178-182. Kusumaningtyas, E., 2005, Mekanisme Infeksi Candida albicans pada Permukaan Sel, Lokakarya Nasional Penyakit Zoonosis, Bogor. Lee, J.A., 2014, The Life and Times of a Tannin Molecule, https://sites.stanford. edu/winesociety/life-and-times-tannin-molecule, diakses pada 01 Juli 2014. Marliana, S.D., Suryanti, V., dan Suyono, 2005, Skrining Fitokimia dan Analisis Kromatografi Lapis Tipis Komponen Kimia Buah Labu Siam (Sechium edule Jacq. Swarts) dalam Ekstrak Etanol, Biofarmasi, 3(1), 26-31.

(79) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 60 Miclev, 2014, Instrument PhoenixSpec, http://shop.miclev.se/sv/Produkter /BD_ Identification / BD_Phoenix / Instrument _ Phoenix_Spec_? id=BD40910, diakses pada 15 April 2014. Neal, M.J., 2006, At a Glance Farmakologi Medis, Edisi V, Erlangga, Jakarta, hal. 81, 86-87. Nio, E. R., 2004, Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Petroleum Eter dan Fraksi Kloroform Biji Jintan Hitam (Nigellae sativae Semen) terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli, Skripsi, 32, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Nuria, M.C., Faizatun, A., dan Sumantri, 2009, Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Jarak Pagar (Jatropha curcas L) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, dan Salmonella typhi ATCC 1408, MEDIAGRO, 5, 26-35. Oktaviani, W., 2013, Perbedaan Efektivitas Daya Antibakteri Antara Klorheksidin Diglukonat 2% dengan Berbagai Konsentrasi Etanol Buah Mahkota (Phaleria macrocarpa [Scheff.] Boerl), Skripsi, Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Yogyakarta. Ongtengco, D.,C., 1992, The In Vitro Antibacterial Activity of Jatropha multifida Linn. Latex Against Common Bacterial Wound Isolates, Acta Manila, 40(1992), pp. 25-28. Prasetyo, H., D., 2013, Aktivitas Antimikroba Fraksi Petroleum Eter, Kloroform, Etanol Bunga Pulu (Chartamus tinctorius L.) terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans, Skripsi, 47-50, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Priyanto, 2010, Farmakologi Dasar untuk Mahasiswa Farmasi & Keperawatan, Leskonfi, Jakarta, hal. 84-96. Psmicrographs, 2010, Escherichia coli (E.coli) Bacteria Science Image, http:// www.psmicrographs.co.uk/escherichia-coli--e--coli--bacteria/ science -image /80013959, diakses pada 20 Mai 2014. Raharjo, R.A., 2010, Uji Fitokimia, Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Haluoleo, Kendari. Rakasiwi, B.L., 2014, Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Kulit Buah Buni (Antidesma bunius (L.) Spreng) terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 dan Escherichia coli ATCC 25922, skripsi, 68, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

(80) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 61 Robinson (cit., Nuria, 2009), 1995, Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi, Edisi Keenam, ITB, Bandung, hal. 72, 157, 198. Rompas, A.A., Edy, H.J., dan Yudistira, A., 2012, Isolasi dan Identifikasi Flavonoid dalam Daun Lamun (Syringodium isoetifolium), Pharmacon, 1(2), 59-63. Sari, F.P., dan Sari, S.M., 2011, Ekstraksi Zat Aktif Antimikroba dari Tanaman Yodium (Jatropha multifida) sebagai Bahan Baku Alternatif Antibiotik Alami, Laporan Penelitian, Fakultas Teknik Universitas Diponegoro, Semarang. Siadi, K., 2012, Ekstrak Bungkil Biji Jarak Pagar (Jatropha curcas) Sebagai Biopestisida yang Efektif dengan Penambahan Larutan NaCl, Jurnal MIPA, 35(1), 77-83. Sudjadi, 2010, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar, Yogyakarta, hal. 354. Sumardjo, D., 2009, Pengantar Kimia, EGC, Jakarta, hal. 438-439. Susanto, I., Ismid, I.S., Sjarifuddin, P.K., dan Sungkar, S., 2008, Parasitologi Kedokteran, Edisi 4, FKUI, Jakarta, hal.356-357. Swain, T., 1965, Tannin in Tea : Plant Biochemistry, Academic Press, New York. Vermerris, W., and Nicholson, R., 2008, Phenolic Compound Biochemistry, Springer, USA, pp. 23-24. Widyastuti, Y., dan Sugiarso, S., 2003, Pengaruh Beberapa Tingkat Dosis Pupuk Organik dan Tiga Jenis Tanah pada Pertumbuhan dan Kandungan Minyak Atsiri Ketumbar (Coriandrum sativum L.), JBAI, 2(3), 105108. Yulianty, R., Rente, H., Alam, G., and Tahir, A., 2011, Skrining dan Analisis KLT-Bioautografi Senyawa Antimikroba Beberapa Ekstrak Spons Asal Perairan Laut Pulau Barrang Lompo, Sulawesi Selatan, Majalah Obat Tradisional, 16(2), 88-94.

(81) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 62 LAMPIRAN

(82) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 63 Lampiran 1. Surat Determinasi Tanaman Jarak Tintir (Jatropha multifida Linn.)

(83) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 64 Lampiran 2. Sertifikat Hasil Uji Staphylococcus aureus ATCC 25923

(84) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 65 Lampiran 3. Sertifikat Hasil Uji Escherichia coli ATCC 25922

(85) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 66 Lampiran 4. Sertifikat Hasil Uji Candida albicans ATCC 10231

(86) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 67 Lampiran 5. Data diameter zona hambat (mm) getah jarak tintir terhadap Escherichia coli ATCC 25922 Diameter Zona Hambat (mm) Konsentrasi (%) Rata- SD rata 1 2 3 4 5 12,5 12 11 12 11 11 11.4000 0.54772 25 14 13 14 13 13 13.4000 0.54772 50 17 15 16 16 15 15.8000 0.83666 100 19 17 18 17 17 17.6000 0.89443 Kontrol positif 14 14 14 15 14 14.2000 0.44721 Kontrol negatif 5 5 5 5 5 5.00 0.00000 Diameter sumuran = 5 mm Lampiran 6. Hasil uji statistik diameter zona hambat (mm) getah jarak tintir terhadap Escherichia coli Uji Normalitas Menggunakan Shapiro-Wilk kelompok Case Processing Summary Cases Valid Diameter zona hambat Percent Missing N Total kelompok N Percent N Percent konsentrasi 12,5% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% konsetrasi 25% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% konsentrasi 50% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% konsentrasi 100% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% kontrol positif 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% kontrol negatif 5 100.0% 0 .0% 5 100.0%

(87) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 68 b Tests of Normality Shapiro-Wilk kelompok Diameter zona hambat Statistic df Sig. konsentrasi 12,5% .684 5 .006 konsetrasi 25% .684 5 .006 konsentrasi 50% .881 5 .314 konsentrasi 100% .771 5 .046 kontrol positif .552 5 .000 b. diameter_zona_hambat is constant when kelompok = kontrol negatif. It has been omitted. Oneway Descriptives diameter_zona_hambat 95% Confidence Interval for Mean Std. Deviation Std. Error Lower Upper Bound Bound N Mean konsentrasi 12,5% 5 11.4000 .54772 .24495 10.7199 12.0801 11.00 12.00 konsetrasi 25% 5 13.4000 .54772 .24495 12.7199 14.0801 13.00 14.00 konsentrasi 50% 5 15.8000 .83666 .35417 14.7611 16.8389 15.00 17.00 konsentrasi 100% 5 17.6000 .89443 .40000 16.4894 18.7106 17.00 19.00 kontrol positif 5 14.2000 .44721 .20000 13.6447 14.7553 14.00 15.00 kontrol negatif 5 5.0000 .00000 .00000 5.0000 5.0000 5.00 5.00 Total 30 12.9000 4.13021 .75407 11.3578 14.4422 5.00 19.00 Test of Homogeneity of Variances diameter_zona_hambat Levene Statistic 4.536 df1 df2 5 Sig. 24 .005 Minimum Maximum

(88) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 69 ANOVA diameter_zona_hambat Sum of Squares Between Groups Mean Square 485.500 5 97.100 9.200 24 .383 494.700 29 Within Groups Total df F 253.304 Sig. .000 Terdapat kelompok dengan varian data yang tidak sama berdasarkan test of Homogeneity of variance (p<0,05) dan data yang tidak normal (p<0,005) sehingga uji ANOVA tidak dapat digunakan, sebagai gantinya menggunakan uji Kruskal Wallis. Kruskal-Wallis Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat 5 8.00 konsetrasi 25% 5 13.80 konsentrasi 50% 5 23.10 konsentrasi 100% 5 27.70 kontrol positif 5 17.40 kontrol negatif 5 3.00 a,b Test Statistics diameter_zona_ hambat 27.949 df Asymp. Sig. Mean Rank konsentrasi 12,5% Total Chi-Square N 5 .000 a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: kelompok 30

(89) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 70 Uji Kruskal Wallis didapat p=0,000 (p<0,05) sehingga dapat diambil kesimpulan bahwa paling tidak terdapat perbedaan diameter zona hambat antara dua kelompok. Untuk mengetahui kelompok mana saja yang memiliki perbedaan dilanjutkan dengan analisis Post Hoc. Analisis Post Hoc untuk uji Kruskal Wallis adalah dengan uji Mann-Whitney. Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 12,5% 5 3.00 15.00 konsetrasi 25% 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.694 Asymp. Sig. (2-tailed) .007 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 12,5% 5 3.00 15.00 konsentrasi 50% 5 8.00 40.00 Total 10

(90) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 71 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.668 Asymp. Sig. (2-tailed) .008 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 12,5% 5 3.00 15.00 konsentrasi 100% 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.685 Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok .007 .008 a

(91) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 72 Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 12,5% 5 3.00 15.00 kontrol positif 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.739 Asymp. Sig. (2-tailed) .006 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 12,5% 5 8.00 40.00 kontrol negatif 5 3.00 15.00 Total 10

(92) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 73 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.835 Asymp. Sig. (2-tailed) .005 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsetrasi 25% 5 3.00 15.00 konsentrasi 50% 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.668 Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok .008 .008 a

(93) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 74 Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsetrasi 25% 5 3.00 15.00 konsentrasi 100% 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.685 Asymp. Sig. (2-tailed) .007 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsetrasi 25% 5 3.80 19.00 kontrol positif 5 7.20 36.00 Total 10

(94) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 75 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U 4.000 Wilcoxon W 19.000 Z -2.032 Asymp. Sig. (2-tailed) .042 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .095 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsetrasi 25% 5 8.00 40.00 kontrol negatif 5 3.00 15.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.835 Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok .005 .008 a

(95) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 76 Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 50% 5 3.30 16.50 konsentrasi 100% 5 7.70 38.50 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U 1.500 Wilcoxon W 16.500 Z -2.386 Asymp. Sig. (2-tailed) .017 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .016 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 50% 5 7.80 39.00 kontrol positif 5 3.20 16.00 Total 10

(96) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 77 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U 1.000 Wilcoxon W 16.000 Z -2.520 Asymp. Sig. (2-tailed) .012 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .016 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 50% 5 8.00 40.00 kontrol negatif 5 3.00 15.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.805 Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok .005 .008 a

(97) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 78 Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 100% 5 8.00 40.00 kontrol positif 5 3.00 15.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.730 Asymp. Sig. (2-tailed) .006 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 100% 5 8.00 40.00 kontrol negatif 5 3.00 15.00 Total 10

(98) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 79 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.825 Asymp. Sig. (2-tailed) .005 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks kontrol positif 5 8.00 40.00 kontrol negatif 5 3.00 15.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.887 Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok .004 .008 a

(99) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 80 Lampiran 7. Hasil uji Mann-Whitney kelompok konsentrasi pada bakteri Escherichia coli Konsentrasi Konsentrasi 12,5% Konsentrasi 25% Konsentrasi 50% Konsentrasi 100% Kontrol positif Kontrol negatif Konsentrasi 25% Konsentrasi 50% Konsentrasi 100% Kontrol positif Kontrol negatif Konsentrasi 50% Konsentrasi 100% Kontrol positif Kontrol negatif Konsentrasi 100% Kontrol positif Kontrol negatif Kontrol positif Kontrol negatif BB (Berbeda Bermakna) jika p<0,05 Kebermaknaan BB BB BB BB BB BB BB BB BB BB BB BB BB BB BB Sig. (p<0,05) 0,007 0,008 0,007 0,006 0,005 0,008 0,007 0,042 0,005 0,017 0,012 0,005 0,006 0,005 0,004 Lampiran 8. Data diameter zona hambat (mm) getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus Diameter Zona Hambat (mm) Konsentrasi (%) Ratarata SD 1 2 3 4 5 12,5 11 11 10 11 11 10.8000 0.44721 25 13 12 11 13 13 12.4000 0.89443 50 14 14 13 13 14 13.6000 0.54772 100 17 17 18 17 18 17.4000 0.54772 Kontrol positif 21 19 21 20 20 20.2000 0.83666 Kontrol negatif 5 5 5 5 5 5.0000 0.00000 Diameter sumuran = 5 mm

(100) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 81 Lampiran 9. Hasil uji statistik diameter zona hambat getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus Uji Normalitas menggunakan Shapiro-Wilk kelompok Case Processing Summary Cases Valid kelompok Diameter zona hambat N Missing Percent N Total Percent N Percent konsentrasi 12,5% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% konsentrasi 25% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% konsentrasi 50% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% konsentrasi 100% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% kontrol positif 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% kontrol negatif 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% b Tests of Normality Shapiro-Wilk kelompok Diameter zona hambat Statistic df Sig. konsentrasi 12,5% .552 5 .000 konsentrasi 25% .771 5 .046 konsentrasi 50% .684 5 .006 konsentrasi 100% .684 5 .006 kontrol positif .881 5 .314 b. diameter_zona_hambat is constant when kelompok = kontrol negatif. It has been omitted. Test of Homogeneity of Variances diameter_zona_hambat Levene Statistic 4.536 df1 df2 5 Sig. 24 .005

(101) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 82 Oneway ANOVA diameter_zona_hambat Sum of Squares Between Groups Mean Square 702.167 5 140.433 9.200 24 .383 711.367 29 Within Groups Total df F Sig. 366.348 .000 Terdapat kelompok dengan varian data yang tidak sama berdasarkan test of Homogeneity of (p<0,05) variance dan data yang tidak normal (p<0,005)sehingga uji ANOVA tidak dapat digunakan, sebagai gantinya menggunakan uji Kruskal Wallis. Kruskal-Wallis Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat 5 8.40 konsentrasi 25% 5 13.20 konsentrasi 50% 5 17.40 konsentrasi 100% 5 23.00 kontrol positif 5 28.00 kontrol negatif 5 3.00 a,b Test Statistics diameter_zona_ hambat 28.060 df Asymp. Sig. Mean Rank konsentrasi 12,5% Total Chi-Square N 5 .000 a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: kelompok 30

(102) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 83 Uji Kruskal Wallis didapat p=0,000 (p<0,05) sehingga dapat diambil kesimpulan bahwa paling tidak terdapat perbedaan diameter zona hambat antara dua kelompok. Untuk mengetahui kelompok mana saja yang memiliki perbedaan dilanjutkan dengan analisis Post Hoc. Analisis Post Hoc untuk uji Kruskal Wallis adalah dengan uji Mann-Whitney. Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 12,5% 5 3.40 17.00 konsentrasi 25% 5 7.60 38.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U 2.000 Wilcoxon W 17.000 Z -2.353 Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok .018 .032 a

(103) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 84 Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 12,5% 5 3.00 15.00 konsentrasi 50% 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.739 Asymp. Sig. (2-tailed) .006 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 12,5% 5 3.00 15.00 konsentrasi 100% 5 8.00 40.00 Total 10

(104) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 85 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.739 Asymp. Sig. (2-tailed) .006 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 12,5% 5 3.00 15.00 kontrol positif 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.712 Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok .007 .008 a

(105) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 86 Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 12,5% 5 8.00 40.00 kontrol negatif 5 3.00 15.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.887 Asymp. Sig. (2-tailed) .004 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 25% 5 3.60 18.00 konsentrasi 50% 5 7.40 35.00 Total 10

(106) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 87 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U 3.000 Wilcoxon W 18.000 Z -2.147 Asymp. Sig. (2-tailed) .032 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .056 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 25% 5 3.00 15.00 konsentrasi 100% 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.685 Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok .007 .008 a

(107) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 88 Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 25% 5 3.00 15.00 kontrol positif 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.660 Asymp. Sig. (2-tailed) .008 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 25% 5 8.00 40.00 kontrol negatif 5 3.00 15.00 Total 10

(108) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 89 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.825 Asymp. Sig. (2-tailed) .005 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 50% 5 3.00 15.00 konsentrasi 100% 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.694 Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok .007 .008 a

(109) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 90 Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 50% 5 3.00 15.00 kontrol positif 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.668 Asymp. Sig. (2-tailed) .008 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 50% 5 8.00 40.00 kontrol negatif 5 3.00 15.00 Total 10

(110) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 91 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.835 Asymp. Sig. (2-tailed) .005 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 100% 5 3.00 15.00 kontrol positif 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.668 Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok .008 .008 a

(111) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 92 Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 100% 5 8.00 40.00 kontrol negatif 5 3.00 15.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.835 Asymp. Sig. (2-tailed) .005 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks kontrol positif 5 8.00 40.00 kontrol negatif 5 3.00 15.00 Total 10

(112) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 93 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.805 Asymp. Sig. (2-tailed) .005 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Lampiran 10. Hasil uji Mann-Whitney kelompok konsentrasi pada bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 Konsentrasi Konsentrasi 12,5% Konsentrasi 25% Konsentrasi 50% Konsentrasi 100% Kontrol positif Kebermaknaan Sig. (p<0,05) Konsentrasi 25% BB 0,018 Konsentrasi 50% BB 0,006 Konsentrasi 100% BB 0,006 Kontrol positif BB 0,007 Kontrol negatif BB 0,004 Konsentrasi 50% BB 0,032 Konsentrasi 100% BB 0,007 Kontrol positif BB 0,008 Kontrol negatif BB 0,005 Konsentrasi 100% BB 0,007 Kontrol positif BB 0,008 Kontrol negatif BB 0,005 Kontrol positif BB 0,008 Kontrol negatif BB 0,005 Kontrol negatif BB 0,005 BB (Berbeda Bermakna) jika p<0,05

(113) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 94 Lampiran 11. Data diameter zona hambat (mm) getah jarak tintir terhadap Candida albicans ATCC 10231 Diameter Zona Hambat (mm) Konsentrasi (%) Rata- SD 1 2 3 4 5 rata 12,5 9 10 9 10 10 9,6 .24495 25 11 11 11 11 11 11,2 .2000 50 13 13 14 14 14 13,6 .24495 100 16 15 16 16 16 15,8 .2000 Kontrol positif 19 19 19 18 19 18,8 .2000 Kontrol negatif 5 5 5 5 5 5 0 Diameter sumuran = 5 mm Lampiran 12. Hasil uji statistik diameter zona hambat (mm) getah jarak tintir terhadap Candida albicans ATCC 10231 Uji Normalitas Menggunakan Shapiro-Wilk kelompok Case Processing Summary Cases Valid kelompok diameter_zona_ha konsentrasi 12,5% mbat N Percent Missing N Total Percent N Percent 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% konsentrasi 25% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% konsentrasi 50% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% konsentrasi 100% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% kontrol positif 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% kontrol negatif 5 100.0% 0 .0% 5 100.0%

(114) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 95 b Tests of Normality Shapiro-Wilk kelompok diameter_zona_hambat Statistic df Sig. konsentrasi 12,5% .684 5 .006 konsentrasi 25% .552 5 .000 konsentrasi 50% .684 5 .006 konsentrasi 100% .552 5 .000 kontrol positif .552 5 .000 a. Lilliefors Significance Correction b. diameter_zona_hambat is constant when kelompok = kontrol negatif. It has been omitted. Oneway Descriptives diameter_zona_hambat 95% Confidence Interval for Mean Std. N Mean Deviation Std. Error Lower Upper Bound Bound Minimum Maximum konsentrasi 12,5% 5 9.6000 .54772 .24495 8.9199 10.2801 9.00 10.00 konsentrasi 25% 5 11.2000 .44721 .20000 10.6447 11.7553 11.00 12.00 konsentrasi 50% 5 13.6000 .54772 .24495 12.9199 14.2801 13.00 14.00 konsentrasi 100% 5 15.8000 .44721 .20000 15.2447 16.3553 15.00 16.00 kontrol positif 5 18.8000 .44721 .20000 18.2447 19.3553 18.00 19.00 kontrol negatif 5 5.0000 .00000 .00000 5.0000 5.0000 5.00 5.00 30 12.3333 4.52833 .82676 10.6424 14.0242 5.00 19.00 Total Test of Homogeneity of Variances diameter_zona_hambat Levene Statistic 3.840 df1 df2 5 Sig. 24 .011

(115) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 96 ANOVA diameter_zona_hambat Sum of Squares Between Groups Mean Square 589.867 5 117.973 4.800 24 .200 594.667 29 Within Groups Total df F 589.867 Sig. .000 Terdapat kelompok dengan varian data yang tidak sama berdasarkan test of Homogeneity of variance (p<0,05) dan data yang tidak normal (p<0,005) sehingga uji ANOVA tidak dapat digunakan, sebagai gantinya menggunakan uji Kruskal Wallis. Kruskal-Wallis Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat 5 8.00 konsentrasi 25% 5 13.00 konsentrasi 50% 5 18.00 konsentrasi 100% 5 23.00 kontrol positif 5 28.00 kontrol negatif 5 3.00 a,b Test Statistics diameter_zona_ hambat 28.608 df Asymp. Sig. Mean Rank konsentrasi 12,5% Total Chi-Square N 5 .000 a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: kelompok 30

(116) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 97 Uji Kruskal Wallis didapat p=0,000 (p<0,05) sehingga dapat diambil kesimpulan bahwa paling tidak terdapat perbedaan diameter zona hambat antara dua kelompok. Untuk mengetahui kelompok mana saja yang memiliki perbedaan dilanjutkan dengan analisis Post Hoc. Analisis Post Hoc untuk uji Kruskal Wallis adalah dengan uji Mann-Whitney. Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 12,5% 5 3.00 15.00 konsentrasi 25% 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.739 Asymp. Sig. (2-tailed) .006 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 12,5% 5 3.00 15.00 konsentrasi 50% 5 8.00 40.00 Total 10

(117) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 98 Test Statistics b diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.694 Asymp. Sig. (2-tailed) .007 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 12,5% 5 3.00 15.00 konsentrasi 100% 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.739 Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok .006 .008 a

(118) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 99 Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 12,5% 5 3.00 15.00 kontrol positif 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.739 Asymp. Sig. (2-tailed) .006 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 12,5% 5 8.00 40.00 kontrol negatif 5 3.00 15.00 Total 10

(119) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 100 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.835 Asymp. Sig. (2-tailed) .005 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 25% 5 3.00 15.00 konsentrasi 50% 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.739 Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok .006 .008 a

(120) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 101 Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 25% 5 3.00 15.00 konsentrasi 100% 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.785 Asymp. Sig. (2-tailed) .005 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 25% 5 3.00 15.00 kontrol positif 5 8.00 40.00 Total 10

(121) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 102 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.785 Asymp. Sig. (2-tailed) .005 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 25% 5 8.00 40.00 kontrol negatif 5 3.00 15.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.887 Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok .004 .008 a

(122) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 103 Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 50% 5 3.00 15.00 konsentrasi 100% 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.739 Asymp. Sig. (2-tailed) .006 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 50% 5 3.00 15.00 kontrol positif 5 8.00 40.00 Total 10

(123) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 104 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.739 Asymp. Sig. (2-tailed) .006 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 50% 5 8.00 40.00 kontrol negatif 5 3.00 15.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.835 Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok .005 .008 a

(124) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 105 Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 100% 5 3.00 15.00 kontrol positif 5 8.00 40.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.785 Asymp. Sig. (2-tailed) .005 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks konsentrasi 100% 5 8.00 40.00 kontrol negatif 5 3.00 15.00 Total 10

(125) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 106 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.887 Asymp. Sig. (2-tailed) .004 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok Mann-Whitney Test Ranks kelompok diameter_zona_hambat N Mean Rank Sum of Ranks kontrol positif 5 8.00 40.00 kontrol negatif 5 3.00 15.00 Total 10 b Test Statistics diameter_zona_ hambat Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.887 Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] a. Not corrected for ties. b. Grouping Variable: kelompok .004 .008 a

(126) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 107 Lampiran 13. Hasil uji Mann-Whitney kelompok konsentrasi pada Candida albicans ATCC 10231 Konsentrasi Konsentrasi 12,5% Konsentrasi 25% Konsentrasi 50% Konsentrasi 100% Kontrol positif Kebermaknaan Sig. (p<0,05) Konsentrasi 25% BB 0,006 Konsentrasi 50% BB 0,007 Konsentrasi 100% BB 0,006 Kontrol positif BB 0,006 Kontrol negatif BB 0,005 Konsentrasi 50% BB 0,006 Konsentrasi 100% BB 0,005 Kontrol positif BB 0,005 Kontrol negatif BB 0,004 Konsentrasi 100% BB 0,006 Kontrol positif BB 0,006 Kontrol negatif BB 0,005 Kontrol positif BB 0,005 Kontrol negatif BB 0,004 Kontrol negatif BB 0,004 BB (Berbeda Bermakna) jika p<0,05

(127) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 108 Lampiran 14. Data pengukuran kekeruhan media pada dilusi cair bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 Konsentrasi (%) 1 4 7 10 13 16 19 22 25 Replikasi 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 Sebelum inkubasi (0 jam) 2,48 2,42 2,52 15 15,2 16,4 22,6 23,7 22,4 28,8 29,3 27,7 34,9 36,3 36,7 41,3 43,9 44,4 47,6 46,5 46,4 49,2 52,1 50,5 52,9 53 54,3 Inkubasi 24 jam Inkubasi 48 jam 2,86 2.81 2,89 12,9 13,2 14,5 19,5 20,8 19,5 25,2 25,5 23,9 30,7 31,8 32,6 36,3 38,4 39,1 41,1 40,3 40,5 42,4 45,7 43,7 46,0 45,5 47,1 3,17 3,13 3,23 12,6 12,6 12,8 19,2 20,4 19 24,4 25,1 23,7 30,4 31,6 31,9 35,9 38,7 38,8 40,7 40,2 40,3 42 45,2 43,5 45,7 45,3 46,3

(128) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 109 Lampiran 15. Data pengukuran kekeruhan media pada dilusi cair bakteri Escherichia coli ATCC 25922 Konsentrasi (%) 1 4 7 10 13 16 19 22 25 Replikasi 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 Sebelum inkubasi (a) 3,8 4,3 4,2 14,3 14,5 14,2 24,4 24,6 25,4 34 32,9 33,3 37,4 38,8 37,7 39,7 39,3 40,6 41,4 42,2 41,8 43,7 42,4 42,9 43,9 44,4 44,6 Inkubasi Inkubasi 24 jam (b) 48 jam (c) 7,4 7,9 7,3 16,8 17,2 16,6 23,5 23,9 24,6 30,5 29,9 30 33,7 35 34,1 35,5 35,4 36,2 36,6 37,4 36,9 38,7 37,2 37,4 38,5 38,7 39 8,9 8,7 8,9 20,6 20,3 20,7 26 26,4 27,4 43,3 42 42,9 52 52,8 52,5 60,8 60,6 62 64,8 66,2 65,8 67,7 66,3 67,3 69,4 69,1 69,5

(129) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 110 Lampiran 16. Foto Tanaman Jarak Tintir (Jatropha multifida Linn.) dan Getah Jarak Tintir Tanaman jarak tintir Daun jarak tintir Bunga jarak tintir Buah jarak tintir Getah jarak tintir

(130) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 111 Lampiran 17. Foto Hasil Skrining Fitokimia Getah Jarak Tintir (Jatropha multifida Linn.) Keterangan gambar : A : Getah jarak tintir + aquadest B : Getah jarak tintir + aquadest + KOH Uji Pendahuluan Keterangan Gambar : Getah jarak tintir + NaCl 2% + Gelatin 1% Uji Tanin Keterangan gambar : Terbentuk buih 4 cm yang tidak menghilang setelah 30 menit Uji saponin

(131) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 112 Keterangan gambar : A : Sebelum penambahan LiebermanBurchard B : Setelah penambahan LiebermanBurchard Uji saponin steroid/triterpenoid Keterangan gambar : A : Getah jarak tintir + etanol 95% + serbuk magnesium + asam klorida pekat B : Larutan A setelah 5 menit C : Larutan A setelah 30 menit Uji flavonoid Keterangan gambar : A : Getah jarak tintir + asam klorida 1% + Mayer B : Getah jarak tintir + asam klorida 1% + Dragendorff C : Getah jarak tintir + asam klorida 1% + Asam Pikrat Uji alkaloid

(132) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 113 Keterangan gambar : A : Getah jarak tintir + toluena B : Setelah penambahan kalium hidroksida Uji antrakinon Lampiran 18. Foto seri konsentrasi getah jarak tintir, kontrol positif, dan kontrol negatif Keterangan gambar : A : Getah jarak tintir konsentrasi 12,5% B : Getah jarak tintir konsentrasi 25% C : Getah jarak tintir konsentrasi 50% D : Getah jarak tintir konsentrasi 100% E : Kontrol negatif (aquadest steril) F : Kontrol positif (Timol 0,2 %) Seri konsentrasi pada pengujian aktivitas antibakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli Keterangan gambar : A : Kontrol negatif (aquadest steril) B : Kontrol positif (Nystatin 100.000 IU/ml) C : Getah jarak tintir konsentrasi 100% D : Getah jarak tintir konsentrasi 50% E : Getah jarak tintir konsentrasi 25% F : Getah jarak tintir konsentrasi 12,5% Seri konsentrasi pada pengujian aktivitas antifungi Candida albicans

(133) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 114 Lampiran 19. Foto hasil uji aktivitas antibakteri getah jarak tintir terhadap Staphylococcus aureus secara difusi sumuran Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 Replikasi 4 Replikasi 5 Kontol pertumbuhan Staphylococcus aureus Keterangan gambar: A : Getah jarak tintir konsentrasi 100% B : Getah jarak tintir konsentrasi 50% C : Getah jarak tintir konsentrasi 25% D : Getah jarak tintir konsentrasi 12,5% E : Kontrol positif Timol 0,2 % F : Kontrol negatif aquadest steril

(134) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 115 Lampiran 20. Foto hasil uji aktivitas antibakteri getah jarak tintir terhadap Escherichia coli secara difusi sumuran Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 Replikasi 4 Replikasi 5 Kontol pertumbuhan Escherichia coli Keterangan gambar: A : Getah jarak tintir konsentrasi 100% B : Getah jarak tintir konsentrasi 50% C : Getah jarak tintir konsentrasi 25% D : Getah jarak tintir konsentrasi 12,5% E : Kontrol positif Timol 0,2 % F : Kontrol negatif aquadest steril

(135) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 116 Lampiran 21. Foto hasil uji aktivitas antifungi getah jarak tintir terhadap Candida albicans secara difusi sumuran Kontrol pertumbuhan candida albicans Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 Replikasi 4 Replikasi 5 Keterangan gambar : A :Getah jarak tintir konsentrasi 100% D : Getah jarak tintir konsentrasi 12,5% B : Getah jarak tintir konsentrasi 50% E : Kontrol positif Nystatin 100.000 IU/ml C : Getah jarak tintir konsentrasi 25% F : Kontrol negatif aquadest steril

(136) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 117 Lampiran 22. Foto pengujian aktivitas antibakteri getah jarak jarak tintir secara dilusi cair terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli untuk mendapatkan KHM(Konsentrasi Hambat Minimal) Tabung pengujian Escherichia coli Tabung pengujian Staphylococcus aureus Penegasan Escherichia coli inkubasi 48 jam Penegasan Staphylococcus aureus inkubasi 48 jam

(137) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 118

(138)

Dokumen baru

Tags

Dokumen yang terkait

BAB 1 Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Kayu Secang (Caesalpinia sappan L.) Terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923, Shigella sonnei ATCC 9290, Dan Escherichia coli ATCC 25922.
0
2
9
DAFTAR PUSTAKA Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Kayu Secang (Caesalpinia sappan L.) Terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923, Shigella sonnei ATCC 9290, Dan Escherichia coli ATCC 25922.
0
11
4
Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol Bunga Petai (Parkia speciosa) terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 dan Escherichia coli ATCC 25922.
2
22
145
Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol Daun Petai (Parkia speciosa Hassk.) terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 dan Escherichia coli ATCC 25922.
2
18
141
Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol kulit buah buni (Antidesma bunius (L.) Spreng) terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 dan Escherichia coli ATCC 25922.
0
1
11
Uji aktivitas antibakteri ekstrak jarak tintir (jatropha multifida l.) terhadap pertumbuhan staphylococcus aureus secara in vitro.
3
27
151
Uji aktivitas antibakteri ekstrak jarak tintir (jatropha multifida l.) terhadap pertumbuhan staphylococcus aureus secara in vitro.
2
23
151
Uji potensi antibakteri ekstrak etanol umbi binahong [Anredera cordifolia [Tenore] steen] terhadap staphylococcus aureus ATCC 25923 dan pseudomonas aeruginos ATCC 27853.
0
4
99
Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol kulit buah buni (Antidesma bunius (L.) Spreng) terhadap Staphylococcus aureus ATCC 25923 dan Escherichia coli ATCC 25922
0
0
9
Uji aktivitas antibakteri ekstrak jarak tintir (jatropha multifida l.) terhadap pertumbuhan staphylococcus aureus secara in vitro
2
21
149
AKTIVITAS ANTIBAKTERI SENYAWA KOPOLI-(EUGENOL–N,N’-METILEN BIS(AKRILAMIDA)) TERHADAP Staphylococcus aureus ATCC 25923 DAN Escherichia coli ATCC 25922.
0
0
14
UJI DAYA ANTIMIKROBA EKSTRAK ETANOL DAUN SIRIH MERAH (Piper Crocatum Ruiz Pav.) TERHADAP PERTUMBUHAN Staphylococcus aureus ATCC 6538, Eschericia coli ATCC 11229 DAN Candida albicans ATCC 10231 SECARA IN VITRO
0
0
8
SKRINING AKTIVITAS ANTIMIKROBA EKSTRAK ETANOL 80% TANAMAN Ardisia sp., Psychotria sp., DAN Piper sp. TERHADAP Staphylococcus aureus ATCC 25923, Eschericia coli ATCC 25922, DAN Candida albicans Repository - UNAIR REPOSITORY
0
0
117
Uji aktivitas antimikroba ekstrak etanol daun cayratia trifolia terhadap staphylococcus aureus dan candida albicans - Widya Mandala Catholic University Surabaya Repository
0
0
9
Uji potensi antibakteri ekstrak etanol umbi binahong [Anredera cordifolia [Tenore] steen] terhadap staphylococcus aureus ATCC 25923 dan pseudomonas aeruginos ATCC 27853 - USD Repository
0
1
97
Show more