Uji antiinflamasi ekstrak etanol Daun Kemangi (Ocimum basilicum L.) topikal pada edema punggung mencit betina Galur Swiss terinduksi karagenin - USD Repository

Gratis

0
0
74
9 months ago
Preview
Full text
(1)PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI UJI ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL DAUN KEMANGI (Ocimum basilicum L.) TOPIKAL PADA EDEMA PUNGGUNG MENCIT BETINA GALUR SWISS TERINDUKSI KARAGENIN SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) Program Studi Farmasi Diajukan oleh: Yohanes Ivan Kristian Santoso NIM : 108114154 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2013

(2) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI UJI ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL DAUN KEMANGI (Ocimum basilicum L.) TOPIKAL PADA EDEMA PUNGGUNG MENCIT BETINA GALUR SWISS TERINDUKSI KARAGENIN SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) Program Studi Farmasi Diajukan oleh: Yohanes Ivan Kristian Santoso NIM : 108114154 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2013 i

(3) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

(4) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI Pengesahan Skripsi Berjudul UJI ANTIINFLAMASI EKSTRAK ETANOL DAUN KEMAI\GI (Ocimum basilieum L.) TOPIKAL PADA EDEMA PUNGGUNG MENCIT BETINA GALUR SWISS TERINDUKSI KARAGENIN Oleh: Yohanes Ivan Kristian Santoso MM : 108114154 Dipertahankan dihadapan Panitia Penguj Fakultas Farmasi i Skripsi Universitas Sanata Dharma Pada tanggal 25 September 2014. Mengetahui Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Panitia Penguji 1. : drh. Sitarina Widyarini MP, PhD 2. Yohanes Dwiatmaka S.Si.,M.Si 3. Phebe Hendra, M.Si, Ph.D., Apt. 4.Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. lll

(5) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI “I can do all things through HIM who strengthens me.” (Philippians 4:13) YESHUA loves me, HE will stay close beside me all the way If I love HIM, when I die HE will take me home on high Dedicated to : The one and only, Yeshua Hamasiach, AiKei, Happy Line Tree, iPine Family, all ma bros, And for my family. iv

(6) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

(7) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI PRAKATA Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala hal yang telah dilimpahkan, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Uji Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Kemangi (Ocimum basilicum L.) Topikal pada Edema Punggung Mencit Betina Galur Swiss Terinduksi Karagenin”. Skripsi ini dibuat guna memenuhi salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S. Farm) Program Studi Farmasi di Universitas Sanata Dharma. Proses penyusunan skripsi ini telah melibatkan banyak pihak secara langsung maupun tidak langsung. Oleh karena itu, penulis menyampaikan terima kasih kepada: 1. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. 2. Ibu drh. Sitarina Widyarini MP, PhD selaku dosen pembimbing yang telah membimbing dan membantu penulisan dari awal hingga selesainya skripsi ini. 3. Bapak Yohanes Dwiatmaka S.Si.,M.Si selaku dosen pembimbing yang telah membimbing dan membantu penulisan dari awal hingga selesainya skripsi ini. 4. Dosen, Kepala Laboratorium, serta Laboran Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah membimbing dan membantu penulis selama studi. 5. Happy Line Tree (Milka, Cha-cha, Jopie, Upit, Retta), Fani, koh Benny, koh Adi, jie Yovita, dan kedua orang yang memberi warna dalam hidup (Filbert dan Kevin) untuk semua waktu, kesempatan, tenaga, pikiran, dan semangat vi

(8) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

(9) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

(10) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL.................................................................................................i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING......................................................ii HALAMAN PENGESAHAN................................................................................iii HALAMAN PERSEMBAHAN.............................................................................iv LEMBAR PERSETUJUAN PUBLIKASI...............................................................v PRAKATA..............................................................................................................vi PERNYATAAN KEASLIAN KARYA...............................................................viii DAFTAR ISI...........................................................................................................ix DAFTAR GAMBAR.............................................................................................xii DAFTAR TABEL.................................................................................................xiv DAFTAR LAMPIRAN..........................................................................................xv INTISARI..............................................................................................................xvi ABSTRACT...........................................................................................................xvii BAB. I PENGANTAR.............................................................................................1 A. Latar Belakang...........................................................................................1 1. Rumusan masalah..............................................................................2 2. Keaslian penelitian............................................................................3 3. Manfaat penelitian.............................................................................3 B. Tujuan Penelitian.......................................................................................4 BAB. II PENELAAHAN PUSTAKA......................................................................5 A. Inflamasi....................................................................................................5 1. Definisi..............................................................................................5 ix

(11) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 2. Klasifikasi inflamasi..........................................................................5 3. Mekanisme........................................................................................6 B. Karagenin...................................................................................................6 C. Anti Inflamasi............................................................................................7 D. Kulit...........................................................................................................8 E. Kemangi...................................................................................................10 1. Sistematika......................................................................................10 2. Morfologi tanaman..........................................................................11 3. Kandungan......................................................................................11 4. Kegunaan.........................................................................................12 F. Maserasi....................................................................................................12 G. Flavonoid.................................................................................................13 H. Landasan Teori........................................................................................15 I. Hipotesis....................................................................................................16 BAB. III METODE PENELITIAN.......................................................................17 A. Jenis dan Rancangan Penelitian...............................................................17 B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional..........................................17 1. Variabel penelitian..........................................................................17 2. Definisi operasional.........................................................................18 C. Bahan Penelitian......................................................................................19 D. Alat Penelitian..........................................................................................20 1. Alat pembuat ekstrak kental............................................................20 2. Alat pengukuran tebal kulit.............................................................20 x

(12) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI E. Tata Cara Penelitian.................................................................................21 1. Determinasi tanaman.......................................................................21 2. Pengumpulan bahan........................................................................21 3. Pembuatan simplisia........................................................................21 4. Pembuatan ekstrak etanol daun kemangi........................................21 5. Penyiapan hewan uji........................................................................22 6. Pembuatan larutan karagenin..........................................................22 7. Orientasi pemberian karagenin........................................................23 8. Pengujian ekstrak etanol daun kemangi..........................................23 F. Tata Cara Analisis Hasil...........................................................................24 BAB. IV HASIL DAN PEMBAHASAN..............................................................25 A. Determinasi Tanaman dan Ekstraksi Daun Kemangi..............................25 B. Orientasi Konsentrasi Pemberian Karagenin...........................................26 C. Efek Antiinflamasi Ekstrak Daun Kemangi.............................................27 BAB. V KESIMPULAN DAN SARAN................................................................34 A. Kesimpulan..............................................................................................34 B. Saran.........................................................................................................34 DAFTAR PUSTAKA............................................................................................36 LAMPIRAN...........................................................................................................38 BIOGRAFI PENULIS...........................................................................................56 xi

(13) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Anatomi Kulit Normal.....................................................................8 Gambar 2. Skema Penghantaran Berbagai Jenis Obat Secara Topikal..............9 Gambar 3. Berbagai Macam Mekanisme Aksi Flavonoid Sebagai Antioksidan dan Antiinflamasi.......................................................14 Gambar 4. Selisih Tebal Lipat Kulit Dari Berbagai Konsentrasi Karagenin...27 Gambar 5. Grafik Penurunan Edema Punggung Mencit Terinduksi Karagenin dan Diberi Ekstrak Etanol Daun Kemangi Dari Berbagai Konsentrasi......................................................................28 Gambar 6. Diagram Rata-rata AUC Total Dari Berbagai Kelompok Perlakuan........................................................................................32 Gambar 7. Diagram Nilai %PI Dari Berbagai Kelompok Perlakuan...............33 Gambar 8. Struktur Kulit..................................................................................49 Gambar 9. Tanaman Kemangi.........................................................................50 Gambar 10. Daun Kemangi Kering...................................................................50 Gambar 11. Maserasi Daun Kemangi................................................................50 Gambar 12. Ekstrak Kental Daun Kemangi.......................................................50 Gambar 13. Biocream®......................................................................................51 Gambar 14. Calacort®........................................................................................51 Gambar 15. Spuit Injeksi...................................................................................51 Gambar 16. Mencit Betina.................................................................................51 Gambar 17. Punggung Mencit yang Telah Dicukur Bulunya............................52 Gambar 18. Pengukuran Tebal Kulit.................................................................52 xii

(14) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI Gambar 19. Pengambilan Sampel Kulit.............................................................52 Gambar 20. Sampel Kulit...................................................................................52 Gambar 21. Sampel Kulit yang Disimpan Dalam Formalin 10%......................53 xiii

(15) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI DAFTAR TABEL Tabel I. Nilai Rata-rata AUC Total dan Hasil Uji Scheffe Masingmasing Kelompok Perlakuan..........................................................30 Tabel II. Nilai %PI dan Hasil Uji Scheffe Masing-masing Kelompok Perlakuan......................................................................31 xiv

(16) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Data Perhitungan Statistik..............................................................39 Lampiran 2. Gambar Struktur Kulit Dengan Pengecatan HE dan Perbesaran200x...............................................................................49 Lampiran 3. Tanaman Kemangi dan Ekstrak.....................................................50 Lampiran 4. Alat dan Bahan...............................................................................51 Lampiran 5. Cara Kerja......................................................................................52 Lampiran 6. Ethical Clearance...........................................................................54 Lampiran 7. Determinasi Tanaman....................................................................55 xv

(17) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI INTISARI Inflamasi merupakan respon tubuh terhadap adanya gangguan atau kerusakan di dalam jaringan. Dari penelitian yang telah dilakukan sebelumnya, senyawa flavonoid terkandung dalam daun kemangi (Ocimum basilicum L.) dapat berperan sebagai antiinflamasi. Peneltian ini bertujuan untuk menguji adanya aktivitas antiinflamasi topikal, dan mengukur seberapa besar efek antiinflamasi dari ekstrak etanol daun kemangi terhadap kulit punggung mencit betina galur Swiss. Penelitian ini termasuk eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. Subjek uji yang digunakan adalah mencit betina galur Swiss berumur 2-3 bulan, bobot 20-25 gram. Dalam penelitian ini terdapat 6 kelompok perlakuan, yaitu kelompok kontrol negatif karagenin 1,5%; kelompok kontrol Biocream®; kelompok kontrol positif Calacort ®; kelompok ekstrak etanol daun kemangi 1,67%; 2,5%; dan 3,75%. Senyawa uji dioleskan setelah injeksi karagenin diberikan. Tebal kulit punggung mencit diukur menggunakan jangka sorong setiap satu jam selama enam jam. Data dianalisis dengan uji Shapiro-Wilk kemudian dilanjutkan dengan One-Way ANOVA dengan taraf kepercayaan 95% dan uji Scheffe. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun kemangi tidak memiliki efek antiinflamasi terhadap edema kulit punggung yang terinduksi karagenin. Kata kunci : antiinflamasi, daun kemangi, Ocimum basilicum L., ekstrak etanol xvi

(18) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI ABSTRACT Inflamation is a body response to substance interference or damaged body tissue. From the previous study, flavonoid contained in Kemangie leaf (Ocimum basilicum L.) can role as antiinflamation. This study’s purposes are to test the topical antiinflamation activity and to measure how much the antiinflamation activity from kemangi leaf ethanolic extract against the backside skin of female Swiss strain mice. This study is a pure experimental with randomized one-way pattern design. The tested subject that used is female Swiss stranded mice that 2-3 months old and it has 20-25 grams of weight. In this study, there are 6 intervention group, 1.5% carageenan negative control group; Biocream ® control group; Calacort® positive control group; 1.67; 2.5; and 3.75% ethanolic extract kemangie leaf groups. The tested substance will be smeared after the carrageenan injection was given. The mice backside skinfold measured using a digital caliper every one hour for six hours respectively. These data were analyzed using Shapiro-Wilk test and then continued with One-Way ANOVA with 95% of confidence level and Scheffe test. The result of this study showed that ethanolic extract of kemangie leaf doesn’t have any antiinflammation effect againts to carrageenan induced oedema of mice backside skin. Keyword : antiinflamation, kemangie leaf, Ocimum basilicum L., ethanol extract xvii

(19) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI BAB 1 PENGANTAR A. Latar Belakang Inflamasi adalah suatu respon proteksi dari tubuh untuk mengeliminasi benda asing yang menyebabkan kerusakan sel dan sel-sel atau jaringan yang telah rusak. Tanda-tanda terjadinya inflamasi ada lima, yaitu panas, merah, bengkak, nyeri, dan kehilangan fungsi (Weller, 1997). Radikal bebas juga berperan dalam memicu keluarnya mediator inflamasi dari dalam sel, sehingga proses inflamasi dapat terjadi. Tanda-tanda inflamasi biasanya disertai dengan rasa tidak nyaman, sehingga penderita menggunakan obat antiinflamasi baik secara oral maupun topikal sesuai dengan kebutuhannya untuk menghilangkan rasa tidak nyaman tersebut. Obat antiinflamasi dibagi dalam dua golongan, yaitu golongan kortikosteroid dan antiinflamasi non-steroid. Antiinflamasi non-steroid lebih banyak digunakan dalam pengobatan inflamasi daripada kortikosteroid karena obat antiinflamasi non-steroid memiliki risiko efek samping yang lebih kecil dibandingkan dengan kortikosteroid (Tjay dan Rahardja, 2002). Sediaan obat antiinflamasi yang paling sering digunakan adalah sediaan oral dan topikal. Sediaan topikal digunakan untuk memberikan efek obat pada daerah tertentu saja dan tidak memberikan efek sistemik seperti sediaan oral. Kemangi (Ocimum basilicum L.) digunakan oleh masyarakat dalam berbagai jenis masakan dan sebagai pelengkap makanan (lalapan). Kandungan daun kemangi antara lain: alkaloid, flavonoid, saponin, glikosida, tanin, tiol, 1

(20) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 2 terpenoid, dan senyawa fenolik, namun tidak ditemukan senyawa steroid pada daun kemangi (Ramesh dan Satakopan, 2010). Penelitian yang dilakukan oleh Kaurinovic, Popovic, Vlaisavljevic, dan Trivic pada tahun 2011 menunjukkan senyawa fenolik dan flavonoid pada Ocimum basilicum L. lebih banyak terkandung pada ekstrak air dibandingkan dengan pelarut lainnya yang bersifat lebih non-polar. Penelitian Ramesh dan Satakopan pada tahun 2010 juga menunjukan bahwa flavonoid dan senyawa fenolik banyak terkandung dalam ekstrak etanol daun kemangi dan terbukti sebagai antioksidan yang kuat, sehingga pemilihan pelarut yang cenderung polar menjadi pilihan peneliti. Pelepasan mediator inflamasi juga dipicu oleh radikal bebas. Adanya kandungan flavonoid sebagai antioksidan pada ekstrak etanol dan ekstrak air daun kemangi diduga juga memiliki aktivitas antiinflamasi. Model percobaan edema kaki tikus dan luka insisi kulit punggung kelinci telah dilakukan sebelumnya untuk mengetahui adanya efek antiinflamasi, sehingga peneliti tertarik untuk melakukan penelitian tentang aktivitas antiinflamasi dari ekstrak etanol daun kemangi secara topikal pada punggung mencit yang terinduksi karagenin. 1. Rumusan masalah Apakah ekstrak etanol daun kemangi memiliki efek antiinflamasi pada edema kulit punggung mencit yang terinduksi dengan karagenin?

(21) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 2. 3 Keaslian penelitian Penelitian mengenai kemangi yang pernah dilakukan antara lain : a. Penelitian Ramdani, Mambo, dan Wuisan (2014) menunjukkan bahwa daun kemangi mempercepat penyembuhan luka insisi kulit punggung kelinci. b. Penelitian Kaurinovic, Popovic, Vlaisavljevic, dan Trivic (2011) menunjukan bahwa ekstrak air daun kemangi memiliki aktivitas antioksidan yang kuat. c. Penelitian Ramesh dan Satakopan (2010) menunjukkan bahwa adanya aktivitas antioksidan pada ekstrak etanol daun kemangi. d. Penelitian Haryanti dan Katno (2011) menunjukkan bahwa daun kemangi memiliki aktivitas dalam menghambat pertumbuhan dan menginduksi kematian sel WiDr dan berpotensi sebagai agen kemopreventif. Sepanjang penelusuran penulis, penelitian tentang efek antiinflamasi ekstrak etanol daun kemangi secara topikal pada edema kulit punggung mencit terinduksi karagenin belum pernah dilakukan. 3. Manfaat penelitian a. Manfaat teoritis Hasil penelitian ini dapat memberikan informasi tentang efek antiinflamasi dari ekstrak etanol daun kemangi pada edema kulit punggung mencit yang diinduksi dengan karagenin.

(22) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 4 b. Manfaat praktis Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi tentang efek antiinflamasi dari ekstrak etanol daun kemangi dan nantinya dapat diterapkan sebagai pilihan alternatif dalam pengobatan inflamasi secara topikal. B. Tujuan Penelitian 1. Tujuan umum Penelitian ini bertujuan untuk memberikan informasi bahwa ekstrak etanol daun kemangi memiliki aktivitas antiinflamasi secara topikal. 2. Tujuan khusus Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui adanya efek antiinflamasi dari ekstrak etanol daun kemangi secara topikal.

(23) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Inflamasi 1. Definisi Inflamasi adalah salah satu bentuk respon dari tubuh terhadap suatu infeksi. Adanya ikatan antara antigen dengan antibodi, menimbulkan pelepasan mediator inflamasi dan kerusakan jaringan (Rhen dan Cidlowski, 2005). Gejala yang ditimbulkan oleh inflamasi adalah kemerahan (rubor), pembengkakan (edema), panas (kolor), nyeri (dolor), dan hilangnya fungsi (fuctio laesa) (Kee, 1996). 2. Klasifikasi inflamasi Inflamasi dibagi menjadi dua, yaitu akut dan kronis. Inflamasi akut merupakan respon cepat terhadap kerusakan sel yang berlangsung cepat dalam beberapa jam hingga hari. Inflamasi akut dapat dipacu oleh beberapa penyebab seperti terpapar bahan kimia berbahaya, infeksi dan alergi. Manifestasi lokal dari inflamasi akut adalah hasil dari perubahan vaskular yang berhubungan dengan proses inflamasi, termasuk vasodilatasi dan peningkatan permeabilitas kapiler. Manifestasi sistemik dari inflamasi akut berupa demam dan peningkatan sirkulasi leukosit dan protein plasma (McCane, 2008). Inflamasi kronis merupakan lanjutan dari inflamasi akut yang terjadi selama 2 minggu atau lebih. Inflamasi kronis dikarakteristikkan dengan banyaknya jumlah limfosit dan makrofag (McCane, 2008). 5

(24) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 6 3. Mekanisme Inflamasi diawali dari rusaknya membran sel secara mekanis, fisik, maupun kimia dan menyebabkan teraktivasinya enzim fosfolipase yang mengubah fosfolipid pada membran sel menjadi asam arakidonat (Tjay dan Rhardja, 2002). Kejadian vaskuler melibatkan beberapa mediator dan sel inflamasi. Hal tersebut diawali dengan dilatasi pada artiola-artiola kecil yang menyebabkan meningkatnya aliran darah menuju daerah yang mengalami gangguan. Vasodilatasi terjadi karena terlepasnya mediator inflamasi seperti prostaglandin E1 dan I2 serta histamin akibat dari interaksi antara jaringan dengan mikroorganisme. Kemudian diikuti dengan peningkatan permeabilitas pembuluh kapiler yang menyebabkan eksudasi cairan. (Rang, Dale, Ritter, dan Moore, 2007). Senyawa yang berperan dalam pelepasan mediator inflamasi adalah asam arakidonat. Asam arakidonat merupakan substrat utama pada jalur siklooksigenase maupun jalur lipooksigenase. Jalur siklooksigenase (COX) terdiri dari dua, yaitu COX-1 dan COX-2, yang mengawali biosintesis prostaglandin dan tromboksan. Jalur lipooksigenase akan mengawali sintesis leukotrien, lipoksin dan komponen penyebab inflamasi lainnya (Rang, Dale, Ritter, dan Moore, 2007). B. Karagenin Karagenin adalah suatu turunan dari polisakarida yang di dalam tubuh dikenali sebagai suatu benda asing yang dapat menginduksi terjadinya inflamasi melalui berbagai macam mekanisme. Pada jaringan ikat, fosfolipid membran sel mast akan dirangsang oleh karagenin untuk menghasilkan asam arakidonat yang

(25) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 7 dibantu dengan enzim fosfolipase A2 yang nantinya akan menghasilkan berbagai macam mediator-mediator inflamasi dengan bantuan dari Reactive Oxygen Species (ROS) (Walidah, 2014). Pelepasan mediator inflamasi akibat karagenin akan menyebabkan terjadinya edema yang dapat bertahan hingga 6 jam dan akan berkurang dalam waktu 24 jam setelah injeksi (Handayani, 2008). Uji aktivitas antiinflamasi dengan metode induksi karagenin merupakan pilihan metode yang sederhana, sering digunakan, mudah untuk dilakukan, dan tidak merusak jaringan (Fitriyani, Winarti, Muslichah, dan Nuri, 2011). C. Anti Inflamasi Obat Anti-Inflamasi Non Steroid (OAINS) biasa digunakan untuk menghambat sistem enzim siklooksigenase maupun lipooksigenase intraseluler yang berpengauh pada respon inflamasi dan produksi berbagai agen inflamasi (Babb,1992). Kortikosteroid adalah obat yang digunakan untuk mengurangi peradangan yang terjadi akibat dari reaksi alergi atau iritasi. Krim Hidrokortison asetat adalah kortikosteroid ringan yang dapat diaplikasikan pada kulit untuk mengobati berbagai macam reaksi inflamasi pada kulit, seperti reaksi alergi dari tanaman, gigitan serangga, perhiasan,parfum, sabun, dan deterjen. Hidrokortison asetat juga dapat mengobati eksim ringan (Netdoctor, 2014).

(26) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 8 D. Kulit Gambar 1. Anatomi kulit normal (WebMD, 2009). Kulit merupakan salah satu organ terbesar dari tubuh. Lebih dari sepuluh persen massa tubuh adalah kulit. Fungsi dari kulit antara lain sebagai perlindungan tubuh dari lingkungan luar, homeostasis (menjaga keseimbangan di dalam tubuh), dan sebagai indera perasa (Walters, 2002). Kulit (Gambar 1) terdiri dari tiga lapisan, yaitu: epidermis, dermis, dan hipodermis. Epidermis atau lapisan terluar dari kulit memiliki pertahanan yang tahan air dan terdapat pigmen yang memberikan warna pada kulit. Dermis adalah sebuah lapisan dibawah epidermis yang memiliki jaringan ikat, folikel rambut, dan kelenjar lemak. Lapisan hypodermis (subkutan) terdiri dari jaringan ikat, lemak, dan pembuluh darah (WebMD, 2009).

(27) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 9 Skema rute peneterasi secara topikal untuk berbagai jenis obat dapat dilihat pada gambar 2. Gambar 2. Skema penghantaran berbagai jenis obat secara topikal (Gunani, 2009). Secara umum, sediaan topikal yang diaplikasikan pada kulit melewati tiga bagian, yaitu: permukaan kulit, stratum korneum, dan dermis. Awalnya, sediaan topikal yang mengandung zat aktif yang telah dioleskan akan melewati permukaan kulit dan tertahan pada stratum korneum sebelum zat aktif dilepaskan

(28) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 10 dari pembawanya menuju lapisan dermis. Karena kemampuan reservoir dari stratum korneum, maka sediaan topikal tersebut akan tertahan pada kulit meskipun tergosok atau terkena pakaian (Yanhendri dan Yenny, 2012). Absorbsi sediaan topikal secara umum terbagi menjadi tiga fase, yaitu: Lag phase, dimana sediaan berada di permukaan kulit dan belum melewati stratum korneum; Rising phase, saat dimana sebagian sediaan mulai masuk melewati stratum korneum menuju lapisan dermis; dan Falling phase, merupakan fase pelepasan zat aktif dari pembawanya dan terserap di pembuluh kapiler pada dermis (Yanhendri dan Yenny, 2012). E. Kemangi 1. Sistematika Tanaman Kemangi menurut Plantamor (2012) diklasifikasikan sebagai berikut: Kerajaan : Plantae Anak kerajaan : Tracheobionta Super Divisi : Spermatophyta Divisi : Magnoliophyta Kelas : Magnoliopsida Sub Kelas : Asteridae Ordo : Lamiales Famili : Lamiaceae Genus : Ocimum Spesies : Ocimum basilicum L.

(29) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 11 2. Morfologi tanaman Tanaman kemangi memiliki: Perawakan: herba tegak atau semak, tajuk membulat, bercabang banyak, sangat harum, tinggi 0,3-1,5 meter. Batang: batang pokok tidak jelas, bercabang banyak, hijau sering keunguan, berambut atau tidak. Daun: tunggal, berhadapan, tangkai daun 0,25-3 cm, helaian daun, bulat telur – elip – memanjang, ujung, meruncing-runcing, atau tumpul, pangkal bangun pasak sampai membulat, di kedua permukaan berambut halus, berbinti-bintik kelenjar rapat 0,75-7,5 x 0,5-2,75 cm, tepi daun; bergerigi lemah-bergelombang-rata. Bunga: susunan majemuk berkarang atau tandan, terminal, 2,5-14 cm, di ketiak daun ujung, daun pelindung elip atau bulat telur, panjang 0,5-1 cm. Kelopak: 5, berlekatan berbentuk bibir, 1 membentuk bibir atas, bentuk bulat telur 2-3,5 mm, 1 bibir bawah membentuk 4 gigi, sisi luar berambut kelenjar, ungu atau hijau. Mahkota: berbibir 3 bibir atas 2 bibir bawah, panjang tabung 1,5-2 mm, cuping mahkota 3-5 mm, putih. Benang sari: 4, tersisip di dasar mahkota, 2 panjang. Putik: kepala putik bercabang dua, tidak sama. Buah: kelopak ikut menyusun buah, buah tegak dan tertekan, ujung bentuk kait melingkar, panjang kelopak buah 6-9 mm. Biji: tipe keras, coklat tua, gundul, waktu dibasahi segera membengkak (Backer, 1963). 3. Kandungan Kandungan yang terdapat didalam daun kemangi antara lain senyawa flavonoid, saponin, glikosida, fenol, tannin, tiol, dan terpenoid (Ramesh dan Satakopan, 2010).

(30) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 12 4. Kegunaan Daun kemangi berguna sebagai obat batuk, ekspektoran, anti emetik, penurun panas, pereda kejang, dan penambah nafsu makan (Direktorat Pengawas Obat dan Makanan RI, 1985). Kegunaan kemangi lainnya antara lain sebagai antiinflamasi, antiinfeksi, kolik, dan sakit pada telinga (Rotblatt, 2002). F. Maserasi Maserasi adalah salah satu metode penyarian simplisia kering yang dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari. Cairan penyari yang direkomendasikan untuk metode ini adalah etanol atau campuran antara etanol dengan air. Keuntungan dari metode maserasi adalah peralatannya yang murah dan sederhana serta pengerjaan yang mudah. Kekurangannya antara lain waktu yang dibutuhkan untuk mengekstraksi cukup lama, penyarian yang kurang sempurna, dan memerlukan jumlah pelarut yang banyak jika harus dilakukan remaserasi (Badan POM RI, 2013). Maserasi adalah salah satu metode ekstraksi yang dilakukan dengan cara merendam simplisia yang telah dipotong-potong atau diserbukkan dengan cairan pengekstraksi dan sesekali dilakukan pengkocokan. Prinsip ekstraksi dengan metode maserasi adalah adanya gerak kinetik dari pelarut pada suhu ruangan walaupun tanpa adanya pengocokan. Pengocokan dilakukan untuk mempercepat proses perpindahan zat dari sel tanaman kedalam pelarut (Hamdani, 2013).

(31) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 13 G. Flavonoid Senyawa flavonoid terkandung dalam tumbuhan. Senyawa tersebut berada pada bagian vegetatif maupun bagian bunga. Senyawa flavonoid ini memiliki beragam aktivitas, salah satunya sebagai inhibitor lipooksigenase yang merupakan jalur pada hormon eikosanoid seperti prostaglandindan tromboksan (Robinson, 1995). Flavonoid tidak hanya menghambat proses inflamasi dari jalur lipooksigenase, namun jalur siklooksigenase juga dapat dihambat aktivitas enzimnya. Cara penghambatan jalur lipooksigenase dan siklooksigenase yaitu menghambat pelepasan asam arakidonat yang merupakan komponen kemotaktik (Winarsi, 2007). Senyawa flavonol (quercetin, rutin, dan morin) dan flavonon (hesperetin dan hesperidin) telah diteliti pada model inflamasi akut dan kronis pada hewan uji. Rutin hanya efektif pada inflamasi kronis seperti adjuvant arthritis, flavonon efektif pada inflamasi sub-kronik dan inflamasi neurogenik terinduksi xylene, sedangkan quercetin adalah senyawa penting yang efektif terhadap inflamasi edema kaki terinduksi karagenin (Lafuente, Guillamon, Villares, Rostagno, dan Martinez, 2009). Selain sebagai antioksidan, senyawa flavonoid juga memiliki bermacammacam mekanisme aksi dalam menghambat inflamasi yang dapat dilihat pada skema gambar 3.

(32) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 14 Gambar 3. Berbagai macam mekanisme aksi flavonoid sebagai antioksidan dan antiinflamasi (Lafuente, Guillamon, Villares, Rostagno, dan Martinez, 2009). Jaringan dan sel di dalam tubuh akan mengalami kerusakan yang disebabkan oleh radikal bebas dan ROS yang dihasilkan dari proses metabolisme oksigen atau terinduksi faktor eksogen. Meningkatnya produksi ROS dapat memicu kerusakan pada jaringan. Secara in vitro, senyawa flavonoid dapat berperan sebagai antioksidan dengan cara mengikat berbagai macam radikal bebas

(33) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 15 dan menghambat pembentukannya (Lafuente, Guillamon, Villares, Rostagno, dan Martinez, 2009). Rangsangan sel makrofag oleh endotoksin bakteri atau sitokin meningkatkan ekspresi gen inducible nitric oxide synthase (iNOS) dan meningkatkan produksi nitrit oksida (NO) dalam jumlah yang besar, sehingga terjadi kerusakan oksidatif pada jaringan. Flavonoid dan polifenol alami lainnya dapat menghambat aktivitas iNOS pada makrofag dengan cara menangkap radikal NO, dan menurunkan pengekspresian enzim iNOS (Lafuente, Guillamon, Villares, Rostagno, dan Martinez, 2009). H. Landasan Teori Inflamasi adalah bentuk respon proteksi tubuh akibat adanya benda asing yang masuk kedalam tubuh, infeksi bateri atau virus, maupun kerusakan pada sel atau jaringan di dalam tubuh. Rusaknya membran sel secara kimia, mekanis, maupun fisik akan mengaktivasi enzim fosfolipase dan dibantu oleh radikal bebas yang mengubah fosfolipid menjadi asam arakidonat. Adanya ikatan antigen dengan antibodi menyebabkan pelepasan mediator inflamasi yang menginduksi terjadinya inflamasi. Asam arakidonat adalah subsrat utama dari mediator-mediator inflamasi yang dihasilkan dari jalur lipooksigenase dan siklooksigenase. Prostaglandin dan tromboksan dihasilkan dari jalur siklooksigenase, sedangkan jalur lipooksigenase menghasilkan leukotriene, lipoksin, dan komponen penginduksi inflamasi lainnya.

(34) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 16 Flavonoid telah diketahui memiliki aktivitas antiinflamasi dan antioksidan. Salah satu aktivitas flavonoid sebagai antiinflamasi adalah dengan menghambat pembentukan asam arakidonat sehingga produksi mediator inflamasi dari jalur lipooksigenase dan siklooksigenase juga terhambat. Flavonoid sebagai antioksidan juga turut berperan dalam mengurangi respon inflamasi dengan cara menangkap radikal bebas, sehingga pembentukan asam arakidonat yang dipicu oleh radikal bebas juga dapat dihambat. Kemangi mengandung senyawa flavonoid dan fenolik yang terdapat pada bagian daunnya. Penelitian pada daun kemangi sebelumnya menunjukkan bahwa ekstrak air dan etanol daun kemangi memiliki kandungan flavonoid lebih banyak dibandingkan dengan ektrak daun kemangi dengan pelarut yang cenderung lebih non-polar. I. Hipotesis Ekstrak etanol daun kemangi memiliki aktivitas antiinflamasi topikal terhadap edema punggung mencit betina galur Swiss yang terinduksi oleh karagenin.

(35) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis dan Rancangan Penelitian Penelitian ini merupakan jenis penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional 1. Variabel penelitian a. Variabel utama 1) Variabel bebas : konsentrasi ekstrak etanol daun kemangi (1,67; 2,5; dan 3,75%) 2) Variabel tergantung : tebal lipatan edema kulit punggung mencit (mm) b. Variabel pengacau : 1) Variabel pengacau terkendali a) Subjek uji : mencit betina galur Swiss b) Umur : 6 – 8 minggu (2 – 3 bulan) c) Berat badan : 20 – 25 gram d) Keadaan subjek : sehat 2) Variabel pengacau tak terkendali : kondisi patofisiologis mencit yang digunakan dalam penelitian 17

(36) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 18 2. Definisi operasional a. Inflamasi merupakan respon tubuh karena adanya paparan benda asing dengan tubuh. Respon inflamasi dapat berupa merah, nyeri, bengkak, perubahan fungsi, dan panas. Dalam hal ini, yang diamati berupa edema (bengkak). b. Ekstrak etanol daun kemangi adalah ekstrak yang dihasilkan dengan cara memaserasi 10 gram serbuk kering daun kemangi yang dilarutkan dalam 100 ml etanol 70% selama enam hari. Kemudian dengan jumlah pelarut yang sama dilakukan remaserasi selama tiga hari, disaring dengan kertas saring dan diuapkan menggukanan oven hingga didapatkan bobot tetap. c. Konsentrasi ekstrak etanol daun kemangi merupakan berat ekstrak kental etanol kemangi (gram) dalam setiap bobot basis (gram) satuan yang digunakan b/b. Konsentrasi ekstrak kental kemangi yang digunakan adalah 1,67; 2,5; dan 3,75%. d. Pemberian topikal dilakukan dengan cara mengoleskan secara merata pada kulit punggung mencit yang telah dicukur rambutnya terlebih dahulu pada area seluas 2,25 cm2. e. Inflammation-associated oedema merupakan tebal kulit punggung mencit yang meningkat dibandingkan dengan kulit normal. Diukur dengan menggunakan jangka sorong digital setiap satu jam selama enam jam setelah diinjeksikan karagenin (Tanko, Kamba, Saleh, Musa, dan Mohammed, 2008).

(37) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 19 C. Bahan Penelitian 1. Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini sebagai berikut : a. Hewan uji yang digunakan yaitu mencit betina galur Swiss, dengan umur 2-3 bulan, berat badan 20-30 gram yang diperoleh dari Laboratorium Hayati Imono USD Yogyakarta. Prosedur penelitian ini telah mendapatkan kelayakan etik dari Ministry of National Education Faculty of Medicine UGM dan Medical and Health Research Ethics Committee (MHREC) dengan nomor KE/FK/908/EC. b. Bahan uji yang digunakan adalah daun kemangi yang dipanen pada bulan Juli dan diperoleh dari pasar Mataram, Magelang. c. Inflamatogen yang digunakan adalah karagenin tipe I (Sigma Chemical Co.) yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi Fakultas Farmasi USD Yogyakarta. d. Etanol 70% diperoleh dari PT. Brataco Yogyakarta e. NaCl 0,9% yang digunakan sebagai pelarut karagenin diperoleh dari Laboratorium Biofarmasetika Fakultas Farmasi USD Yogyakarta. f. Akuades diperoleh dari Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi Fakultas Farmasi USD Yogyakarta. g. Biocream® diproduksi oleh Merck, diperoleh dari apotek K-24 Seturan, Sleman. h. Calacort® diproduksi oleh Galenium, diperoleh dari apotek K-24 Seturan, Sleman.

(38) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 20 i. Veet® diproduksi oleh Reckitt Benckiser, diperoleh dari Alfamart Seturan, Sleman. D. Alat Penelitian Alat yang digunakan dalam penelitian ini terdiri dari: 1. Alat pembuat ekstrak kental: a. Oven b. Mesin penyerbuk c. Ayakan no.40 mesh d. Alat-alat gelas seperti gelas Beaker, Erlenmeyer, gelas ukur, cawan porselin, pipet tetes, batang pengaduk 2. Alat pengukuran tebal kulit: a. Jangka sorong digital merk Mitutoyo b. Neraca analitik merk Wipro c. Gunting d. Gelas arloji e. Stopwatch f. Spuit injeksi 1ml g. Pinset h. Toples plastik (tempat menyimpan kulit) i. Stamper dan Mortir

(39) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 21 E. Tata Cara Penelitian 1. Determinasi tanaman Determinasi tanaman menggunakan ciri-ciri yang terdapat pada tanaman yang dilakukan secara benar menurut Sudarsono (2002) dan WHO (2004). 2. Pengumpulan bahan Daun kemangi didapatkan dari pasar Mataram Magelang yang dipanen pada bulan Juli. Daun yang digunakan adalah daun yang berwarna hijau segar, tidak berlubang, dan tidak terdapat kotoran binatang kecil. 3. Pembuatan simplisia Tanaman kemangi dicuci, lalu dipetik daunnya. Daun yang telah bersih kemudian dijemur dibawah sinar matahari dengan ditutup kain hitam. Selanjutnya daun dikeringkan kembali menggunakan oven dengan suhu 40-50˚C hingga kering. Daun yang telah kering terlihat berwarna hijau kecoklatan dan mudah dihancurkan. Selanjutnya daun yang telah kering diserbuk menggunakan mesin penyerbuk di Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. Kemudian serbuk simplisia diayak menggunakan ayakan ukuran empat puluh mesh. 4. Pembuatan ekstrak etanol daun kemangi Seberat sepuluh gram serbuk simplisia daun kemangi direndam dalam 100 ml etanol 70% dalam Erlenmeyer bersumbat. Kemudian dimaserasi selama enam

(40) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 22 hari pada temperatur kamar. Selama proses maserasi, dilakukan pengadukan dan penggantian cairan penyari setiap tiga hari sekali. Sebelum dilakukan penguapan ekstrak, cawan porselin ditimbang terebih dahulu agar diketahui berat filtrat sebenarnya. Filtrat dipisahkan dari endapannya kemudian dikentalkan dengan cara diuapkan pada cawan porselin diatas waterbath dengan suhu 50-60°C sambil diaduk hingga didapatkan ekstrak kental. 5. Penyiapan hewan uji Hewan uji yang dibutuhkan sebanyak 33 ekor mencit betina galur Swiss, berumur 2-3 bulan, dan berbobot 20-30 gram. Hewan uji dibagi secara acak menjadi dua kelompok. Kelompok untuk pra-perlakuan sebanyak tiga ekor dan kelompok perlakuan sebanyak 30 ekor mencit. Kelompok perlakuan terdiri dari enam kelompok yang masing-masing kelompok terdiri dari lima ekor mencit. Hewan uji terlebih dahulu dicukur bulu punggungnya dengan gunting, kemudian dioleskan Veet® untuk merontokkan bulu yang belum tercukur sempurna. Kulit punggung yang telah tercukur bulunya dibiarkan selama 2 hari untuk menghindari adanya inflamasi yang disebabkan oleh pencukuran dan pemberian Veet®. 6. Pembuatan larutan karagenin Karagenin 1,5 % dibuat dengan melarutkan 1,5 g karagenin dalam larutan NaCl 0,9% hingga 100 ml, sehingga diperoleh larutan karagenin 1,5% b/v.

(41) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 23 7. Orientasi pemberian karagenin Hewan uji yang digunakan sebanyak enam ekor lalu dibagi menjadi tiga kelompok. Masing-masing kelompok terdiri dari dua ekor. Tiap kelompok diberi injeksi subkutan karagenin dengan konsentrasi 0,5%; 1%; dan 1,5%. Tebal kulit punggung mencit diukur terlebih dahulu sebelum pemberian karagenin dan setelah pemberian karagenin setiap 1 jam selama 6 jam. Edema pada kulit punggung dari pemberian karagenin yang mengalami peningkatan tebal kulit sebesar 2-3 kali dari tebal awal dipilih sebagai konsentrasi penginduksi inflamasi. 8. Pengujian ekstrak etanol daun kemangi Sebanyak 30 ekor mencit betina dibagi secara acak menjadi enam kelompok perlakuan: a. Kelompok 1 terdiri dari lima ekor mencit sebagai kontrol negatif (karagenin). Mencit diinjeksi secara subkutan karagenin dengan konsentrasi 1,5% dan diukur edema yang muncul dengan jangka sorong setiap satu jam selama enam jam. b. Kelompok 2, 3, 4, 5, dan 6 masing-masing terdiri dari lima ekor mencit sebagai perlakuan Biocream®, Calacort®, ekstrak etanol daun kemangi 1,67%, 2,5%, dan 3,75% b/b. Ekstrak seberat 1,67; 2,5; dan 3,75 gram masing-masing dicampur dengan basis krim (Biocream®) seberat 10 gram, sehingga didapatkan konsentrasi 1,67; 2,5; dan 3,75% b/b. Biocream®, Calacort®, dan masing-masing konsentrasi ekstrak dalam basis krim diambil sebanyak 0,1

(42) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 24 gram untuk dioleskan seluas 2,25 cm2 disekitar suntikan dan diukur tebal kulit punggung dengan jangka sorong setiap satu jam selama enam jam. F. Tata Cara Analisis Hasil 1. Pengambilan data dilakukan dengan mengukur ketebalan edema kulit punggung mencit menggunakan jangka sorong. 2. Nilai selisih edema tiap jam diukur dan dihitung nilai AUC total masingmasing perlakuan dengan menggunakan rumus berikut: ∑[ ] (Ikawati, Supardjan, dan Asmara, 2007) Keterangan : = area di bawah kurva dari jam ke-0 hingga jam ke-6 (mm.jam) = tebal lipatan kulit pada jam ke-(n-1) (mm) = tebal lipatan kulit pada jam ke-n (mm) = jam ke-(n-1) (jam) 3. Nilai persen penghambatan inflamasi dihitung dengan rumus berikut: (Ikawati, Supardjan, dan Asmara, 2007) Keterangan : = rata-rata AUC total kontrol negatif (mm.jam) = nilai AUC total pada kelompok perlakuan replikasi ke- (mm.jam) 4. Nilai AUC total masing-masing perlakuan di analisis dengan uji Shapiro-Wilk. Kemudian dilanjutkan dengan analisis One-Way ANOVA dengan taraf kepercayaan 95% dan uji Scheffe.

(43) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN Tujuan dari dilakukannya penelitian ini adalah untuk mengetahui apakah ekstrak etanol daun kemangi memiliki efek antiinflamasi dan seberapa besar efek antiinflamasinya pada punggung mencit betina yang terinduksi oleh karagenin. A. Determinasi Tanaman dan Ekstraksi Daun Kemangi Tanaman kemangi yang didapatkan peneliti kemudian dideterminasi di Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia Fakultas Farmasi Universtas Sanata Dharma. Hasil determinasi yang dicantumkan pada lampiran 7, menunjukkan kebenaran dari tanaman yaitu Ocimum basilicum L. Tujuan dilakukannya determinasi sebelum melakukan penelitian ini untuk memastikan kebenaran tanaman yang digunakan oleh peneliti. Tanaman kemangi yang telah di cuci kemudian dipetik daunnya dan dipisahkan dari batang dan bagian lainnya. Daun kemangi yang dipilih adalah daun yang masih segar dan berwarna hijau, tidak berlubang, dan tidak ada binatang kecil atau kotorannya. Daun kemangi yang telah terkumpul, dijemur di bawah sinar matahari dengan ditutup kain hitam. Lalu dikeringkan kembali di dalam oven dengan suhu 40-50 ˚C hingga kering. Keringnya daun ditandai dengan perubahan warna daun menjadi hijau kecoklatan dan mudah dihancurkan. Daun kemangi kering kemudian diserbukan dengan mesin penyerbuk dan kemudian diayak dengan ayakan nomor 40 mesh. 25

(44) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 26 Serbuk daun kemangi yang telah diayak kemudian di ekstraksi menggunakan metode maserasi agar kandungan di dalam daun kemangi yang mudah menguap tidak hilang atau rusak pada saat diekstraksi. Serbuk daun kemangi ditimbang seberat 10 gram dan dicampur dengan etanol 70% sebanyak 100 ml dalam Erlenmeyer bersumbat, didiamkan selama enam hari. Kemudian hasil rendaman disaring dengan kertas saring sehingga didapatkan ekstrak etanol cair. Ekstrak etanol cair tersebut diuapkan di atas waterbath menggunakan cawan porselin pada suhu 50-60°C hingga bobotnya tetap sehingga didapatkan ekstrak kental. Pada penelitian ini, didapatkan ekstrak kental daun kemangi seberat 1,79 gram. B. Orientasi Konsentrasi Pemberian Karagenin Sebelum uji terhadap ekstrak dilakukan, peneliti melakukan orientasi konsentrasi karagenin terlebih dahulu. Tujuan dari orientasi ini untuk mengetahui konsentrasi karagenin optimal yang dapat digunakan dalam model penelitian ini. Hasil yang diharapkan dari orientasi adalah terjadi selisih penebalan lipat kulit punggung sebesar dua hingga tiga kali lipat dari tebal kulit normal dan mampu mempertahankan ketebalan kulit hingga enam jam. Dari orientasi ini, konsentrasi karagenin 1,5% menunjukkan hasil yang diharapkan oleh peneliti, dengan puncak tebal kulit hingga tiga kali kulit normal pada jam ke-1 dan mampu mempertahankan ketebalannya hingga jam ke-6. Sehingga karagenin dengan konsentrasi 1,5% digunakan oleh peneliti dalam menginduksi edema pada kulit punggung mencit.

(45) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 27 Hasil dari orientasi konsentrasi pemberian karagenin pada hewan uji dapat dilihat pada gambar 4. Selisih tebal lipat kulit (mm) 3,50 3,00 2,50 subkutan 0,5 % 2,00 1,50 subkutan 1 % 1,00 subkutan 1,5 % 0,50 0,00 1 2 3 4 5 6 Waktu pengamatan (jam) Gambar 4. Selisih tebal lipat kulit dari berbagai konsentrasi karagenin. C. Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Kemangi Setelah melakukan orientasi terhadap konsentrasi karagenin, maka dilakukan uji efek antiiflamasi ekstrak etanol daun kemangi terhadap edema kulit punggung mencit. Hasil dari penelitian ini berupa data selisih tebal lipat kulit punggung yang didapatkan dari tebal lipat kulit pada jam ke-n setelah perlakuan dikurangi dengan tebal lipat kulit normal. Selanjutnya dapat dilihat seberapa besar penurunan tebal lipat kulit pada masing-masing kelompok perlakuan dari jam ke-1 hingga jam ke-6. Apabila terdapat efek antiinfamasi dari senyawa uji, maka akan terjadi penurunan tebal lipat kulit yang signifikan hingga jam ke-6 dimana ketebalannya sedapat mungkin mendekati tebal lipat kulit normal.

(46) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 28 Hasil data yang ditampilkan berupa grafik penurunan tebal lipat kulit pada Rata-rata selisih tebal lipat kulit (mm) setiap kelompok perlakuan dapat dilihat pada gambar 5. 2,5 karagenin 2 biocream 1,5 calacort kemangi 1,67% 1 kemangi 2,5% 0,5 kemangi 3,75% 0 1 2 3 4 5 6 Waktu pengamatan (jam) Gambar 5. Grafik penurunan edema punggung mencit terinduksi karagenin dan diberi ekstrak etanol daun kemangi dari berbagai konsentrasi. Grafik yang ditampilkan pada gambar 5 diatas, dapat dilihat bahwa terjadi penebalan lipat kulit pada jam ke-1 setelah pemberian injeksi subkutan karagenin pada semua kelompok perlakuan. Tebal lipat kulit paling tinggi ditunjukan oleh kelompok kontrol negatif (karagenin) dan kelompok kontrol biocream. Pada kelompok kontrol positif (Calacort®) dan ketiga kelompok konsentrasi ekstrak etanol daun kemangi pada jam ke-1 menunjukkan tebal lipat kulit yang lebih kecil dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif dan kontrol biocream. Pada jam-jam berikutnya hingga jam ke-6 dapat dilihat bahwa kelompok kontrol positif menunjukkan penurunan selisih tebal lipat kulit yang mendekati kulit normal dibandingkan dengan kelompok lainnya. Sedangkan kelompok

(47) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 29 perlakuan ekstrak etanol daun kemangi konsentrasi 1,67% dan 3,75% memiliki selisih tebal lipat kulit yang tidak berbeda jauh dari kelompok kontrol negatif dan biocream. Selisih tebal lipat kulit pada kelompok konsentrasi 2,5% cenderung lebih kecil dari konsentrasi 1,67% dan 3,75% namun lebih besar dibandingkan dengan kontrol positif. Setelah melihat grafik penurunan selisih tebal lipat kulit pada tiap jam, selanjutnya dilakukan analisis data lanjutan dengan cara menghitung rata-rata AUC total dari masing-masing kelompok perlakuan. Nilai rata-rata AUC total adalah luas daerah di bawah kurva yang menunjukan rata-rata selisih tebal lipat kulit dari jam ke-0 hingga jam ke-6. Semakin besar nilai rata-rata AUC totalnya, maka semakin kecil penurunan selisih tebal lipat kulitnya, sehingga diharapkan senyawa yang memiliki efek antiinflamasi memiliki nilai rata-rata AUC total yang kecil dan berbeda secara signifikan terhadap kontrol negatif maupun kontrol biocream. Data diuji juga menggunakan uji Scheffe untuk melihat adanya perbedaan antar kelompok perlakuan satu dengan yang lainnya.

(48) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 30 Hasil analisis data berupa tabel rata-rata AUC total dan uji Scheffe dapat dilihat pada tabel I di bawah ini. Tabel I. Nilai rata-rata AUC total dan hasil uji Scheffe masing-masing kelompok perlakuan Perlakuan I II III IV V VI Keterangan: Perlakuan I Perlakuan II Perlakuan III Perlakuan IV Perlakuan V Perlakuan VI SE X B TB Mean AUC selisih tebal lipat kulit (mm.jam) (X ± SE) 9,27 ± 0,82 8,18 ± 1,18 2,54 ± 1,27 5,93 ± 1,28 4,55 ± 0,65 5,06± 1,78 I II III IV V VI TB B TB TB TB TB TB TB TB TB B TB TB TB TB TB TB TB TB TB TB TB TB TB TB TB TB TB TB TB - = kelompok kontrol negatif (karagenin) = kelompok kontrol Biocream® = kelompok kontrol positif (Calacort®) = kelompok ekstrak daun kemangi 1,67% = kelompok ekstrak daun kemangi 2,5% = kelompok ekstrak daun kemangi 3,75% = standar error = rata-rata AUC total = Berbeda bermakna = Tidak berbeda bermakna Dari hasil uji Scheffe terhadap rata-rata AUC total yang ditampilkan pada tabel I, dapat dilihat bahwa kelompok negatif dan kelompok biocream memiliki perbedaan yang tidak bermakna, sehingga disimpulkan bahwa kelompok kontrol biocream secara statistik tidak memiliki efek antiinflamasi. Perbedaan yang bermakna ditunjukan pada perbandingan antara kelompok kontrol positif dengan kelompok kontrol negatif, maka hal tersebut membuktikan bahwa secara statistik kontrol positif (Calacort®) memiliki efek antiinflamasi. Masing-masing kelompok konsentrasi ekstrak memiliki perbedaan yang tidak bermakna satu sama lain.

(49) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 31 Kelompok konsentrasi 1,67% berbeda tidak bermakna terhadap kelompok konsentrasi 2,5 dan 3,75%. Begitu juga dengan kelompok konsentrasi 2,5% yang juga berbeda tidak bermakna dengan kelompok konsentrasi 3,75%. Ketiga kelompok perlakuan ekstrak juga berbeda tidak bermakna terhadap kelompok kontrol negatif, biocream, maupun kontrol positif. Dari hasil tersebut, dapat disimpulkan bahwa ketiga kelompok konsentrasi ekstrak etanol daun kemangi tidak memiliki efek antiinflamasi topikal terhadap edema kulit punggung mencit terinduksi karagenin. Berikutnya adalah hasil analisis data berupa tabel persen penurunan inflamasi (%PI) yang dapat dilhat pada tabel II di bawah ini. Tabel II. Nilai %PI dan hasil uji Scheffe masing-masing kelompok perlakuan Perlakuan I II III IV V VI Keterangan: Perlakuan I Perlakuan II Perlakuan III Perlakuan IV Perlakuan V Perlakuan VI SE B TB %PI (X ± SE) 0,00 ± 8,88 11,72 ± 12,68 72,58 ± 13,74 36,05 ± 13,84 50,93 ± 7,06 45,40 ± 19,14 I TB B TB TB TB II TB TB TB TB TB III B TB TB TB TB IV TB TB TB TB TB V TB TB TB TB TB VI TB TB TB TB TB - = kelompok kontrol negatif (karagenin) = kelompok kontrol Biocream® = kelompok kontrol positif (Calacort®) = kelompok ekstrak daun kemangi 1,67% = kelompok ekstrak daun kemangi 2,5% = kelompok ekstrak daun kemangi 3,75% = standar error = Berbeda bermakna = Tidak berbeda bermakna Hasil uji Scheffe terhadap %PI juga menunjukan hal yang serupa dengan hasil uji Scheffe terhadap rata-rata AUC total. Perbedaan yang bermakna hanya di

(50) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 32 tunjukan dari perbandingan antara kelompok kontrol positif dengan kelompok kontrol negatif. Kelompok kontrol negatif dengan kelompok kontrol biocream juga memiliki perbedaan yang tidak bermakna satu sama lain. Ketiga kelompok konsentrasi ekstrak juga menunjukan adanya perbedaan tidak bermakna terhadap kelompok kontrol negatif, kontrol biocream, kontrol positif, maupun antar kelompok konsentrasi satu sama lain. Dari grafik penurunan selisih tebal lipat kulit, disebutkan bahwa ekstrak dengan konsentrasi 1,67 dan 3,75% tidak memiliki efek antiiflamasi dan ekstrak pada konsentrasi 2,5% memiliki efek antiinflamasi. Tetapi adanya perbedaan tidak bermakna antar ketiga kelompok konsentrasi maupun terhadap ketiga kelompok kontrol pada uji Scheffe rata-rata AUC total dan persen penurunan inflamasi (%PI) menunjukan bahwa secara statistik ketiga konsentrasi ekstrak daun kemangi tidak memiliki efek antiinflamasi topikal terhadap edema punggung mencit terinduksi karagenin. Hasil rata-rata AUC total dan nilai persen penurunan inflamasi (%PI) dalam bentuk diagram batang dapat dilihat pada gambar 6 dan 7 berikut ini. Gambar 6. Diagram rata-rata AUC total dari berbagai kelompok perlakuan.

(51) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 33 Gambar 7. Diagram nilai %PI dari berbagai kelompok perlakuan. Rentang standar error yang cukup luas yang ditampilkan pada diagram diatas dapat disebabkan karena adanya variasi data yang cukup besar. Tidak adanya efek antiinflamasi dari percobaan ini dimungkinkan karena senyawa flavonoid yang berfungsi sebagai antiinflamasi tidak masuk ke dalam penyari etanol 70% atau senyawa yang terkandung dalam daun kemangi hanya berperan sebagai antioksidan saja dan tidak memiliki efek antiinflamasi, sehingga dapat disarankan untuk penelitian lebih lanjut menggunakan penyari yang bersifat lebih polar seperti akuades dan dilakukan pengujian jumlah kandungan flavonoid sebagai parameter kualitas ekstrak.

(52) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI BAB V KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan Ekstrak etanol daun kemangi tidak memiliki efek antiinflamasi terhadap edema kulit punggung mencit yang terinduksi karagenin. B. Saran 1. Dapat dilakukan penelitian lanjutan menggunakan penyari akuades apakah memiliki efek antiinflamasi topikal. 2. Menguji jumlah kandungan flavonoid sebagai parameter kualitas ekstrak. 34

(53) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 35 DAFTAR PUSTAKA Babb, R. R., 1992, Gastrointestinal Complications of Nonsteroidal Antiinflamatory Drugs, The Western Journal of Medicine, 157 (2), 444-447. Backer, C. A., 1963, Flora of Java, vol. II, NVP, Groningen, Netherland, pp. 639. Badan POM RI, 2013, Pedoman Teknologi Formulasi Sediaan Berbasis Ekstrak, Volume 2, Badan POM RI, Jakarta, pp. 4, 10. Direktorat Jendral Badan Pengawas Obat dan Makanan RI, 1985, Tumbuhan Obat Indonesia, Jilid I, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, pp.72. Fitriyani A., Winarti, L., Muslichah, S. Siti, 2011, Uji Antiinflamasi Ekstrak Metanol Daun Sirih Merah (Piper crocatum Ruiz & Pav) Pada Tikus Putih, Majalah Obat Tradisional, 16 (1), 34-42. Gunani, S. B., 2009, Uji Daya Antiinflamasi Krim Tipe A/M Ekstrak Etanolik Jahe 10% (Zingiber officinale Roscoe) yang Diberikan Topikal Terhadap Udem Kaki Tikus yang Diinduksi Karagenin, Skripsi, 7, Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta. Hamdani, S., 2013, Maserasi, http://catatankimia.com/catatan/maserasi.html, diakses pada tanggal 6 Mei 2013. Haryanti S., Katno, 2011, Aktivitas Sitotoksik Ocimum sanctum L. Pada Sel Kanker Kolon WiDr, Simposium, Simposium Nasional XV PERHIPBA, Solo. Hidayati, N. A., Listyawati, S., dan Setyawan A. D., 2005, Kandungan Kimia dan Uji Antiinflamasi Ekstrak Etanol Lantana camara L. Pada Tikus Putih (Rattus Norvegicus L.) Jantan, Bioteknologi, 5 (1), 10-17. Ikawati, Z., Supardjan, A. M., Asmara, L. S., 2007, Pengaruh Senyawa Heksagamavunon-1 (HGV-1) Terhadap Inflamasi AkutAkibat Reaksi Anafilaksis Kutaneus Aktif Pada Tikus Wistar Jantan Terinduksi Ovalbumin, Laporan Penelitian, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Kaurinovic, B., Popovic, M., Vlaisavljevic, S., Trivic S., 2011, Antioxidant Capacity of Ocimum basilicum L. and Origanum vulgare L. Extracts, Molecules, 16, 7401-7414. Kee, J., 1996, Farmakologi Pendekatan Proses Keperawatan, EGC, Jakarta, pp. 45-47.

(54) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 36 Lafuente A. G., Guillamón, E., Villares, A., Rostagno, M. A., Martínez, J. A., 2009, Flavonoids as Anti-Inflamatory Agents: Implication in Cancer and Cardiovascular Disease, Inflamation Research, 58, 537-552. McCane, H., 2008, Understanding Pathophysiology, 4th Edition, Mosby Inc., China, pp. 121-142. Netdoctor, 2014, Hc45 hydrocortisone cream, http://www.netdoctor.co.uk/skinand-hair/medicines/hc45-hydrocortisone-cream.html, diakses pada tanggal 29 April 2014. Plantamor, 2012, Selasih (Ocimum basilicum), http://www.plantamor.com/ index.php?plant=913, diakses pada tanggal 5 Mei 2013. Ramdani, N. F., Mambo, C., Wuisan J., 2014, Uji Efek Daun Kemangi (Ocimum basilicum L. Terhadap Penyembuhan Luka Insisi Pada Kelinci (Oryctolagus cuniculus), Jurnal E-Biomedik, 2 (1). Ramesh, B., Satakopan V. N., 2010, In Vitro AntioxidantActivities of Ocimum Species: Ocimum Basilicum and Ocimum Sanctum, Journal of Cell and Tissue Research, 10 (1), 2145-2150. Rang, H.P., Dale, M.M., Ritter, J. M. And Moore, P.K., 2007, Pharmacology 5th ed., Churcill Livingstone, London. pp. 231-237, 244-250, 562-567. Rhen T., Cidlowski J. A., 2005, Antiinflamatory Action of Glucocortocoids, New Mechanism for Old Drugs, The New England Journal of Medicine, 353 (16), 1711-1723 Robinson, T., 1995, Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi, Edisi keenam, ITB, Bandung, pp. 191-216. Rotblatt, M., 2002, Eviden-Based Herbal Medicine, Hanley & Belfus Inc., Philadelphia, pp. 405. Tanko, Y., Kamba, B., Saleh, M. I. A., Musa, K. Y., Mohammed, A., 2008, Antinociceptive and anti-inflammatory Activities of Ethanolic Flower Extract of Newbouldia Laevis in Mice and Rats, International Journal of Applied Research in Natural Products, 1 (3), 13-19. Tjay, T.H., Rahardja, K., 2002, Obat-obat Penting, Edisi V, Elex Media Komputindo, Jakarta, pp. 202-302, 311. Walidah, C., 2014, Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Etil Asetat Lumut Hati Mastigophora diclados Secara In Vivo, Skripsi, UIN Syarif Hidayatullah, Jakarta.

(55) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 37 Walter, K. A., 2002, Dermatological and Transdermal Formulations, Marcel Dekker Inc., New York, pp. 1, 4. WebMD, 2009, The Skin (Human Anatomy): Picture, Definition, Function, and Skin Conditions, http://www.webmd.com/skin-problems-and-treatments/picture-of-the-skin, diakses pada tanggal 12 Agustus 2014. Weller, B. F., 1997, Kamus Saku Perawat, Edisi 22, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 354. WHO, 2004, WHO Monographs on Selected Medicinal Plants, Volume 2, World Health Organization, Geneva, pp. 206-207. Winarsi, H., 2007, Antioksidan Alami Dan Radikal Bebas, Kanisius, Yogyakarta, pp. 186. Yanhendi, Yenny S. W., Berbagai Bentuk Sediaan Topikal Dalam Dermatologi, Cermin Dunia Kedokteran Edisi 194, 39 (6), 426-428.

(56) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 38 LAMPIRAN

(57) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI Lampiran 1: Data perhitungan statistik a. Data perhitungan AUC tebal lipat kulit punggung mencit 1. Kontrol negatif (Karagenin) Mencit Jam I II III 0 0 0 0 1 2,13 2,12 2,60 2 1,52 1,37 1,71 3 1,67 1,05 1,92 4 1,66 0,85 1,58 5 0,59 1,16 1,22 6 0,64 1,10 0,98 AUC 7,89 7,10 9,52 IV 0 1,98 2,56 2,09 1,72 1,26 0,92 10,07 V 0 3,12 2,12 2,14 1,61 1,90 1,75 11,77 Mean 0,00 2,39 1,86 1,77 1,48 1,23 1,08 9,27 2. Kontrol Biocream Jam 0 1 2 3 4 5 6 AUC I 0 3,01 2,76 1,95 1,94 1,43 1,13 11,66 II 0 2,04 1,48 0,68 1,23 1,22 0,73 7,02 Mencit III 0 3,20 1,41 2,11 1,39 1,54 1,20 10,25 IV V 0 1,03 0,74 1,00 1,33 0,98 0,98 5,57 0 2,80 0,84 0,86 0,98 0,50 0,89 6,43 IV V 0 0,35 0,11 0,38 0,40 0,11 0,04 1,37 0 3,67 2,10 1,21 0,18 0,27 0,02 7,44 Mean 0,00 2,42 1,45 1,32 1,37 1,13 0,99 8,18 3. Kontrol positif (Calacort) Jam 0 1 2 3 4 5 6 AUC I II 0 0,50 0,26 0,10 0,00 0,03 0,02 0,90 0 0,64 0,49 0,47 0,44 0,41 0,19 2,55 Mencit III 0 0,21 0,10 0,14 0,00 0,00 0,00 0,45 Mean 0,00 1,07 0,61 0,46 0,20 0,16 0,05 2,54 39

(58) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 4. Kemangi 1,67% Jam 0 1 2 3 4 5 6 AUC I II 0 1,55 0,98 1,24 0,59 1,40 1,52 6,52 0 0,27 0,23 0,23 0,20 0,31 0,23 1,36 Mencit III 0 1,57 0,78 1,13 0,86 0,99 0,67 5,67 IV V 0 2,07 2,26 1,80 1,58 0,88 1,19 9,19 0 2,49 1,70 0,54 1,22 0,59 0,75 6,92 IV V 0 0,34 0,48 0,58 0,47 0,27 0,29 2,29 0 1,59 1,15 1,00 0,64 0,49 0,58 5,16 IV V 0 3,31 1,68 1,57 1,50 1,75 1,39 10,51 0 0,67 0,04 0,20 0,52 0,20 0,16 1,71 Mean 0,00 1,59 1,19 0,99 0,89 0,83 0,87 5,93 5. Kemangi 2,5% Jam 0 1 2 3 4 5 6 AUC I II 0 1,56 0,98 0,47 0,53 0,27 0,21 3,92 0 1,71 1,58 1,14 0,34 0,72 0,08 5,53 Mencit III 0 1,32 1,09 0,93 1,10 1,00 0,82 5,85 Mean 0,00 1,30 1,06 0,82 0,62 0,55 0,40 4,55 6. Kemangi 3,75% Jam 0 1 2 3 4 5 6 AUC I II 0 0,28 0,56 0,06 0,30 0,38 0,48 1,82 0 1,04 0,73 0,36 0,41 0,43 0,65 3,30 Mencit III 0 2,53 1,50 1,64 1,10 0,69 1,03 7,98 Mean 0,00 1,57 0,90 0,77 0,77 0,69 0,74 5,06 40

(59) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 41 7. Data hasil uji statistik Case Processing Summary Cases Valid Perlakuan AUC N Missing Percent N Total Percent N Percent Kontrol Negatif 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% Kontrol Biocream 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% Kontrol Positif 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% Kemangi 1,67% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% Kemangi 2,5% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% Kemangi 3,75% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% Deskriptif AUC Perlakuan Kontrol Negatif Kontrol Biocream Kontrol Positif Kemangi 1,67% Kemangi 2,5% Kemangi 3,75% Statistik 9,27 8,18 2,54 Mean 5,93 4,55 5,06 SE 0,82 1,18 1,27 1,28 0,65 1,78 Tests of Normality Kolmogorov-Smirnov Perlakuan AUC Statistic df a Shapiro-Wilk Sig. Statistic df Sig. * .971 5 .884 .200 * .894 5 .379 5 .165 .784 5 .060 .264 5 .200 * .921 5 .538 Kemangi 2,5% .262 5 .200 * .890 5 .357 Kemangi 3,75% .272 5 .200 * .854 5 .206 Kontrol Negatif .173 5 .200 Kontrol Biocream .271 5 Kontrol Positif .299 Kemangi 1,67% a. Lilliefors Significance Correction *. This is a lower bound of the true significance.

(60) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 42 Test of Homogeneity of Variances AUC Levene Statistic df1 1.627 df2 5 Sig. 24 .191 ANOVA AUC Sum of Squares df Mean Square Between Groups 151.889 5 30.378 Within Groups 178.100 24 7.421 Total 329.989 29 F Sig. 4.094 .008 Multiple Comparisons AUC Scheffe Mean 95% Confidence Interval Difference (I) Perlakuan (J) Perlakuan (I-J) Kontrol Kontrol Biocream 1.08400 1.72288 .995 -5.1526 7.3206 Kontrol Positif 6.72800 * 1.72288 .029 .4914 12.9646 Kemangi 1,67% 3.33800 1.72288 .594 -2.8986 9.5746 Kemangi 2,5% 4.72000 1.72288 .227 -1.5166 10.9566 Kemangi 3,75% 4.20600 1.72288 .343 -2.0306 10.4426 Kontrol Kontrol Negatif -1.08400 1.72288 .995 -7.3206 5.1526 Biocream Kontrol Positif 5.64400 1.72288 .094 -.5926 11.8806 Kemangi 1,67% 2.25400 1.72288 .882 -3.9826 8.4906 Kemangi 2,5% 3.63600 1.72288 .503 -2.6006 9.8726 Kemangi 3,75% 3.12200 1.72288 .659 -3.1146 9.3586 Negatif Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound Kontrol Kontrol Negatif -6.72800 * 1.72288 .029 -12.9646 -.4914 Positif Kontrol Biocream -5.64400 1.72288 .094 -11.8806 .5926 Kemangi 1,67% -3.39000 1.72288 .578 -9.6266 2.8466 Kemangi 2,5% -2.00800 1.72288 .924 -8.2446 4.2286 Kemangi 3,75% -2.52200 1.72288 .824 -8.7586 3.7146

(61) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 43 Kemangi Kontrol Negatif -3.33800 1.72288 .594 -9.5746 2.8986 1,67% Kontrol Biocream -2.25400 1.72288 .882 -8.4906 3.9826 Kontrol Positif 3.39000 1.72288 .578 -2.8466 9.6266 Kemangi 2,5% 1.38200 1.72288 .984 -4.8546 7.6186 Kemangi 3,75% .86800 1.72288 .998 -5.3686 7.1046 Kemangi Kontrol Negatif -4.72000 1.72288 .227 -10.9566 1.5166 2,5% Kontrol Biocream -3.63600 1.72288 .503 -9.8726 2.6006 2.00800 1.72288 .924 -4.2286 8.2446 Kemangi 1,67% -1.38200 1.72288 .984 -7.6186 4.8546 Kemangi 3,75% -.51400 1.72288 1.000 -6.7506 5.7226 Kemangi Kontrol Negatif -4.20600 1.72288 .343 -10.4426 2.0306 3,75% Kontrol Biocream -3.12200 1.72288 .659 -9.3586 3.1146 Kontrol Positif 2.52200 1.72288 .824 -3.7146 8.7586 Kemangi 1,67% -.86800 1.72288 .998 -7.1046 5.3686 Kemangi 2,5% .51400 1.72288 1.000 -5.7226 6.7506 Kontrol Positif *. The mean difference is significant at the 0.05 level.

(62) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI b. Data perhitungan persen penghambatan inflamasi (%PI) 1. Kontrol negatif Mencit AUC K. Negatif Nilai AUC %PI 1 9,27 7,89 14,88 2 9,27 7,10 23,40 3 9,27 9,52 -2,71 4 9,27 10,07 -8,64 5 9,27 11,77 -26,93 Rata-rata %PI 0,00 2. Kontrol Biocream Mencit AUC K. Negatif Nilai AUC %PI 1 9,27 11,66 -25,74 2 9,27 7,02 24,32 3 9,27 10,25 -10,58 4 9,27 5,57 39,91 5 9,27 6,43 30,68 Rata-rata %PI 11,72 3. Kontrol positif Mencit AUC K. Negatif Nilai AUC 1 9,27 0,90 2 9,27 2,55 3 9,27 0,45 4 9,27 1,37 5 9,27 7,44 Rata-rata %PI %PI 90,29 72,49 95,15 85,22 19,73 72,58 4. Kemangi 1,67% Mencit AUC K. Negatif Nilai AUC 1 9,27 6,52 2 9,27 1,36 3 9,27 5,67 4 9,27 9,19 5 9,27 6,92 Rata-rata %PI %PI 29,66 85,38 38,88 0,91 25,40 36,04 44

(63) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 5. Kemangi 2,5% Mencit AUC K. Negatif Nilai AUC 1 9,27 3,92 2 9,27 5,53 3 9,27 5,85 4 9,27 2,29 5 9,27 5,16 Rata-rata %PI %PI 57,76 40,34 36,89 75,35 44,33 50,93 6. Kemangi 3,75% Mencit AUC K. Negatif Nilai AUC %PI 1 9,27 1,82 80,36 2 9,27 3,30 64,45 3 9,27 7,98 13,96 4 9,27 10,51 -13,33 5 9,27 1,71 81,55 Rata-rata %PI 45,40 7. Data hasil uji statistik Case Processing Summary Cases Valid Perlakuan Persen Kontrol Negatif PI N Percent Missing N Total Percent N Percent 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% Kontrol Biocream 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% Kontrol Positif 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% Kemangi 1,67% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% Kemangi 2,5% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% Kemangi 3,75% 5 100.0% 0 .0% 5 100.0% 45

(64) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 46 Deskriptif Persen PI Perlakuan Kontrol Negatif Kontrol Biocream Kontrol Positif Kemangi 1,67% Kemangi 2,5% Kemangi 3,75% Statistik 0,00 11,72 72,58 Mean 36,05 50,93 45,40 SE 8,88 12,68 13,74 13,84 7,06 19,14 Tests of Normality Kolmogorov-Smirnov Perlakuan Statistic Shapiro-Wilk Sig. Statistic df Sig. .173 5 .200 * .971 5 .884 Kontrol Biocream .272 5 .200 * .894 5 .376 Kontrol Positif .299 5 .165 .784 5 .060 Kemangi 1,67% .264 5 .200 * .921 5 .536 Kemangi 2,5% .262 5 .200 * .890 5 .356 Kemangi 3,75% .272 5 .200 * .853 5 .205 Persen Kontrol Negatif PI df a a. Lilliefors Significance Correction *. This is a lower bound of the true significance. Test of Homogeneity of Variances PersenPI Levene Statistic 1.624 df1 df2 5 Sig. 24 .192 ANOVA PersenPI Sum of Squares df Mean Square Between Groups 17673.465 5 3534.693 Within Groups 20721.561 24 863.398 Total 38395.026 29 F 4.094 Sig. .008

(65) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 47 Multiple Comparisons PersenPI Scheffe Mean 95% Confidence Interval Difference (I) Perlakuan (J) Perlakuan Kontrol (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound .995 -78.9886 55.5526 -72.57600 18.58385 .029 -139.8466 -5.3054 Kemangi 1,67% -36.04600 18.58385 .593 -103.3166 31.2246 Kemangi 2,5% -50.93400 18.58385 .226 -118.2046 16.3366 Kemangi 3,75% -45.39800 18.58385 .342 -112.6686 21.8726 Kontrol Kontrol Negatif 11.71800 18.58385 .995 -55.5526 78.9886 Biocream Kontrol Positif -60.85800 18.58385 .094 -128.1286 6.4126 Kemangi 1,67% -24.32800 18.58385 .882 -91.5986 42.9426 Kemangi 2,5% -39.21600 18.58385 .503 -106.4866 28.0546 Kemangi 3,75% -33.68000 18.58385 .659 -100.9506 33.5906 Kontrol Kontrol Negatif 72.57600 18.58385 .029 5.3054 139.8466 Positif Kontrol Biocream 60.85800 18.58385 .094 -6.4126 128.1286 Kemangi 1,67% 36.53000 18.58385 .579 -30.7406 103.8006 Kemangi 2,5% 21.64200 18.58385 .924 -45.6286 88.9126 Kemangi 3,75% 27.17800 18.58385 .825 -40.0926 94.4486 Kemangi Kontrol Negatif 36.04600 18.58385 .593 -31.2246 103.3166 1,67% Kontrol Biocream 24.32800 18.58385 .882 -42.9426 91.5986 Kontrol Positif -36.53000 18.58385 .579 -103.8006 30.7406 Kemangi 2,5% -14.88800 18.58385 .984 -82.1586 52.3826 Kemangi 3,75% -9.35200 18.58385 .998 -76.6226 57.9186 Kemangi Kontrol Negatif 50.93400 18.58385 .226 -16.3366 118.2046 2,5% Kontrol Biocream 39.21600 18.58385 .503 -28.0546 106.4866 -21.64200 18.58385 .924 -88.9126 45.6286 14.88800 18.58385 .984 -52.3826 82.1586 5.53600 18.58385 1.000 -61.7346 72.8066 -21.8726 112.6686 Negatif Kontrol Biocream -11.71800 18.58385 Kontrol Positif Kontrol Positif Kemangi 1,67% Kemangi 3,75% Kemangi Kontrol Negatif * * 45.39800 18.58385 .342

(66) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 3,75% Kontrol Biocream Kontrol Positif Kemangi 1,67% Kemangi 2,5% 48 33.68000 18.58385 .659 -33.5906 100.9506 -27.17800 18.58385 .825 -94.4486 40.0926 9.35200 18.58385 .998 -57.9186 76.6226 -5.53600 18.58385 1.000 -72.8066 61.7346 *. The mean difference is significant at the 0.05 level.

(67) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 49 Lampiran 2: Gambar struktur kulit dengan pengecatan HE dan perbesaran 200x (a) (b) (c) (d) (e) (f) (g) Gambar 8. Struktur kulit: (a)normal, (b)kontrol positif, (c)kontrol negatif, (d)kontrol biocream, (e)kemangi 1,67%, (f)kemangi 2,5%, (g)kemangi 3,75%.

(68) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI Lampiran 3: Tanaman Kemangi dan ekstrak Gambar 9. Tanaman kemangi. Gambar 10. Daun kemangi kering. Gambar 11. Maserasi daun kemangi. . Gambar 12. Ekstrak kental daun kemangi 50

(69) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI Lampiran 4: Alat dan bahan Gambar 13. Biocream®. Gambar 14. Calacort®. Gambar 15. Spuit injeksi. Gambar 16. Mencit betina. 51

(70) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI Lampiran 5: Cara kerja Gambar 17. Punggung mencit yang telah dicukur bulunya. Gambar 18. Pengukuran tebal kulit. Gambar 19. Pengambilan sampel kulit. Gambar 20. Sampel kulit. 52

(71) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI Gambar 21. Sampel kulit yang disimpan dalam formalin 10%. 53

(72) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI Lampiran 6: Ethical Clearance 54

(73) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI Lampiran 7: Determinasi tanaman 55

(74) PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 56 BIOGRAFI PENULIS Yohanes Ivan Kristian Santoso merupakan anak bungsu dari tiga bersaudara dari pasangan Bambang Purnomo Santoso dan Listiani Dewi. Lahir di Magelang, 08 Juli 1992. Memiliki dua kakak perempuan bernama Inge Ekasari Sartika dan Devina Kristiani. Penulis menempuh pendidikan di TK Tunas Kasih Magelang (1996-1998), SD Kristien Indonesia Magelang (1998-2004), SMP Negeri 1 Magelang (2004-2007), SMA Negeri 1 Magelang (2007-2010), kemudian melanjutkan pendidikan di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta (2010-2014).

(75)

Dokumen baru

Tags

Dokumen yang terkait

Uji antiinflamasi topikal ekstrak milk Thistle® pada edema punggung mencit betina terinduksi karagenin.
0
2
87
Uji efek antiinflamasi topikal ekstrak etanol daun majapait (Crescentia cujete L.) pada edema kulit punggung mencit galur swiss terinduksi karagenin.
4
5
126
Uji efek antiinflamasi topikal ekstrak milk Thistle® pada jumlah neutrofil dan ekspresi cox-2 mencit betina terinduksi karagenin.
1
2
129
Uji efek antiinflamasi dekokta daun songgolangit (Tridax procumbens L.) pada mencit betina galur Swiss terinduksi karagenin.
4
14
56
Uji efek antiinflamasi dekokta herba baru Cina (Artemisia vulgaris L.) pada mencit betina galur Swiss terinduksi karagenin menggunakan Plethysmometer.
0
0
49
Uji efek antiinflamasi topikal ekstrak buah lada hitam(piper nigrum l.) pada edema kulit punggung mencit galur swiss terinduksi karagenin.
3
6
67
Uji efek antiinflamasi ekstrak etanol daun trengguli (Cassia fistula L.) pada edema punggung mencit terinduki karagenin.
4
11
99
Uji efek antiinflamasi topikal ekstrak etanol daun majapait (Crescentia cujete L.) terhadap jumlah neutrofil dan ekspresi siklooksigenase 2 pada mencit terinduksi karagenin.
0
13
133
Uji efek antiinflamasi ekstrak etanol daun trengguli (Cassia fistula L.) secara topikal terhadap neutrofil dan siklooksigenase-2 (cox-2) pada mencit terinduksi karagenin.
1
10
143
Uji efek antiinflamasi analgesik jus buah belimbing (Averrhoa carambola L.) pada mencit putih betina galur Swiss - USD Repository
0
0
158
Efek antiinflamasi ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. pada mencit betina galur Swiss - USD Repository
0
0
101
Efek analgesik ekstrak metanol-air daun Macaranga tanarius L. pada mencit betina Galur Swiss - USD Repository
0
1
96
Efek antiinflamasi benzoil eugenol secara topikal terhadap edema kaki yang diinduksi formalin 0,5% pada mencit jantan Galur Swiss - USD Repository
0
1
118
Efek antiinflamasi Asetil Eugenol secara topikal terhadap edema kaki yang diinduksi formalin 0,5% pada mencit jantan Galur Swiss - USD Repository
0
0
100
Efek antiinflamasi topikal ekstrak metanol-air daun senu (macaranga tanarius l. mull. arg) pada mencit betina terinduksi karagenin - USD Repository
0
0
104
Show more