Efek hepatoprotektif jangka panjang ekstrak etanol kulit Persea americana Mill. terhadap aktivitas ALT-AST pada tikus terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository

Gratis

0
0
121
6 months ago
Preview
Full text

  

EFEK HEPATOPROTEKTIF JANGKA PANJANG EKSTRAK

ETANOL KULIT Persea americana Mill. TERHADAP AKTIVITAS ALT-

AST PADA TIKUS TERINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA

SKRIPSI

  Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar sarjana farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

  Diajukan oleh : Bernadet Brigita Puspita Wardani

  NIM : 118114048

  

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

  

HALAMAN PERSEMBAHAN

“Tuhan menaruhmu di tempat yang sekarang bukan karena kebetulan.

  Orang yang hebat tidak dihasilkan melalui kemudahan, kesenangan, dan kenyamanan, mereka dibentuk melalui kesukaran, tantangan, dan air mata…” Don’t run ahead of God. Let Him direct your steps.

  He has plans, God’s clock is never early or late, it always strikes on time

  • –instagood.org-

  Dream, believe, and make it happen

  • –Agnes Monica-

  Kupersembahkan karya kecil ini untuk : Yesus Kristus sumber rahmat dan keajaiban

  PRAKATA

  Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan perlindunganNya sehingga skripsi berjudul “Efek Hepatoprotektif Jangka

  Panjang Ekstrak Eatanol Kulit Persea americana Mill. Terhadap Aktivitas ALT- AST Pada Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida

  ” yang disusun untuk memenuhi persyaratan memperoleh gelar Sarjana Strata Satu Program Studi Farmasi (S.

  Farm.) dapat dikerjakan dengan baik, lancar serta tepat pada waktunya.

  Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini tidak terlepas dari bimbingan dan bantuan berbagai pihak. Kesempatan ini penulis pergunakan untuk mengungkapkan rasa terimakasih kepada :

  1. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah mengijinkan penulis menjalankan pembelajaran selama masa studi.

  2. Ibu Phebe Hendra, M. Si., Ph. D., Apt. selaku Dosen Pembimbing Skripsi yang telah meluangkan waktu, tenaga, dan pikiran dalam memberi bimbingan, motivasi kepada penulis selama penelitian dan penyusunan skripsi ini.

  3. Bapak Ipang Djunarko, M. Sc., Apt selaku Dosen Penguji yang telah memberikan kritik dan saran selama penyusunan skripsi.

  4. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si. selaku dosen penguji yang telah memberikan kritik dan saran selama penyusunan skripsi dan atas bantuannya dalam determinasi tanaman Persea americana Mill. selaku Dosen Penguji yang telah memberikan kritik dan saran selama penyusunan skripsi.

  5. Ibu Agustina Setiawati, M. Sc., Apt selaku Kepala Penanggungjawab Laboratorium Fakultas Farmasi yang telah memberikan ijin dalam penggunaan fasilitas laboratorium untuk kepentingan penelitian ini.

  6. Pak Kayat, Pak Heru, Pak Parjiman, Pak Wagiran, Pak Parlan dan selaku laboran laboratorium Fakultas Farmasi yang telah membantu penulis dalam proses pelaksanaan penelitian di laboratorium.

  7. Keluargaku tercinta Bapak Windiyono, Ibu Anna Lucia, Mas Andreas Suryo, Adik Monika, Adik Sandi, Eyang Ti, Eyang Kung, dan semua yang selalu mengirimkan doa, semangat dan dukungan dalam penyusunan skripsi ini

  8. Leonardus Damar Wirokusumo atas ketulusan, perhatian, pengertian dan semangat yang selalu diberikan kepada penulis dalam penyusunan skripsi ini.

  9. Sahabat-sahabat tercinta Kezia Irma, Vivo Puspitasari, Christiana Putri, Levina Apriyani, Yudist Latubayesian, Maria Verita, Laurensia Jessie, Theresia Eviani atas kebersamaan, kekeluargaan, keceriaan, suka duka, semangat dan motivasi yang diberikan

  10. Teman-teman seperjuangan alpukat Siska, Mita, Sita, Angel, Puput, Gemah, Jolin, Wina, Evi dan tentunya tim etanolers (Vivo, Uci, Ester, Risa, Novel) atas segala kerjasama, bantuan dan semangat yang selalu bergelora dalam penyusunan skripsi ini dari awal hingga akhir.

  11. Teman-teman KKN Alternatif Padukuhan Pondok Cynthia Feliana, Maria Verita, Fransisca, Theresia Eviani.

  12. Seluruh teman-teman panitia INSADHA 2013 atas kebersamaan, semangat,

  13. Seluruh teman-teman PSM Cantus Firmus atas canda tawa, kekeluargaan, semangat dalam segala situasi yang ada.

  14. Teman-teman FSM B 2011, FST A 2011 dan seluruh teman-teman angkatan 2011 atas bantuan, kerjasama dan motivasi yang diberikan.

  15. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu sehingga penulis dapat menyelesaikan tugas akhir ini dengan baik.

  Penulis menyadari bahwa tugas akhir ini belum sempurna dan masih banyak kekurangan sehingga penulis berharap kritik dan saran dari semua pihak yang membangun demi kemajuan di masa yang akan datang.

  Akhir kata, penulis berharap semoga tugas akhir ini dapat bermanfaat bagi semua pihak dan mampu memberikan sumbangan kecil bagi perkembangan ilmu pengetahuan terutama di bidang ilmu Farmasi.

  Penulis

  DAFTAR ISI

  HALAMAN JUDUL ................................................................................................ i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ..................................................... ii HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ iii HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................................ iv PERNYATAAN KEASLIAN PENULIS ................................................................ v LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ................. vi PRAKATA ............................................................................................................ vii DAFTAR ISI ............................................................................................................ x DAFTAR TABEL ................................................................................................ xiv DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. xv DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xvi

  INTISARI ........................................................................................................... xviii

  

ABSTRACT ........................................................................................................... xix

  BAB I. PENGANTAR ............................................................................................. 1 A. Latar Belakang ................................................................................................... 1

  1. Perumusan masalah ...................................................................................... 4

  2. Keaslian penelitian ....................................................................................... 4

  3. Manfaat penelitian ........................................................................................ 5

  B. Tujuan Penelitian ............................................................................................... 5

  1. Tujuan umum ............................................................................................... 5

  BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ..................................................................... 7 A. Hati ..................................................................................................................... 7

  1. Anatomi dan fisiologi hati ............................................................................ 7

  2. Kerusakan hati .............................................................................................. 9

  3. Hepatotoksin .............................................................................................. 11

  B. Alanin Aminotransferase (ALT) dan Aspartat Aminotransferase (AST) ........ 11

  C. Karbon Tetraklorida ......................................................................................... 12

  D. Antioksidan ...................................................................................................... 15

  E. Persea americana Mill. .................................................................................... 15

  1. Sinonim ...................................................................................................... 15

  2. Taksonomi .................................................................................................. 16

  3. Nama lain ................................................................................................... 16

  4. Morfologi ................................................................................................... 17

  5. Kandungan kimiawi ................................................................................... 18

  6. Khasiat dan kegunaan ................................................................................ 18

  F. Metode Pengujian............................................................................................. 19

  G. Metode Ekstraksi .............................................................................................. 20

  H. Landasan Teori ................................................................................................. 21

  I. Hipotesis ........................................................................................................... 22

  BAB III. METODE PENELITIAN........................................................................ 23 A. Jenis dan Rancangan Penelitian ....................................................................... 23 B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional .................................................. 23

  2. Variabel pengacau ...................................................................................... 23

  3. Definisi operasional ................................................................................... 24

  C. Bahan Penelitian............................................................................................... 25

  1. Bahan utama ............................................................................................... 25

  2. Bahan kimia ............................................................................................... 25

  D. Alat Penelitian .................................................................................................. 26

  1. Alat pembuatan serbuk kering dan ekstrak ................................................ 26

  2. Alat uji hepatoprotektif .............................................................................. 27

  E. Tata Cara Penelitian ......................................................................................... 27

  1. Determinasi kulit P. americana ................................................................. 27

  2. Pengumpulan bahan uji .............................................................................. 27

  3. Pembuatan serbuk ...................................................................................... 27

  4. Penetapan kadar air serbuk kulit P. americana .......................................... 28

  5. Pembuatan ekstrak etanol kulit P. americana ........................................... 28

  6. Penetapan konsentrasi pekat ekstrak .......................................................... 29

  7. Penetapan dosis ekstrak etanol kulit P. americana .................................... 29

  8. Pembuatan CMC-Na 1% ............................................................................ 30

  9. Pembuatan larutan karbon tetraklorida ...................................................... 30

  10. Uji pendahuluan ......................................................................................... 30

  11. Pengelompokan dan perlakuan hewan uji .................................................. 31

  F. Tata Cara Analisis Hasil................................................................................... 31

  BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................. 33

  B. Hasil Kadar Air Serbuk Kulit P. americana .................................................... 33

  C. Standarisasi Ekstrak Etanol Kulit P. americana .............................................. 34

  D. Uji Pendahuluan .............................................................................................. 35

  1. Penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida ..................................... 35

  2. Penentuan waktu pencuplikan darah .......................................................... 35

  E. Efek Hepatoprotektif Jangka Panjang Ekstrak Etanol Kulit P. ameicana ....... 38

  1. Kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB .......................................................... 42

  2. Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB .............................. 43

  3. Kontrol ekstrak etanol kulit P. americana ................................................. 44

  4. Kelompok perlakuan ekstrak etanol kulit P. americana jangka panjang dosis 0,35 g/kgBB, 0,7 g/kgBB, dan 1,4 g/kgBB pada hewan uji terinduksi CCl

  4 dosis 2 ml/kgBB .............................................. 45

  F. Rangkuman Pembahasan ................................................................................ 48

  BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 51 A. Kesimpulan ...................................................................................................... 51 B. Saran ................................................................................................................ 51 DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 52 LAMPIRAN ........................................................................................................... 57 BIOGRAFI PENULIS ......................................................................................... 102

  DAFTAR TABEL

  Tabel I Komposisi dan konsentrasi reagen serum ALT ............................. 26 Tabel II Komposisi dan konsentrasi reagen serum AST .............................. 26 Tabel III Rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada rentang waktu 0,

  24, dan 48 jam ................................................................................ 36 Tabel IV Perbedaan peningkatan aktivitas serum ALT setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada rentang waktu 0, 24, dan 48 jam.................................................................. 37

  Tabel V Pengaruh perlakuan ekstrak etanol kulit P. americana dilihat dare rata-rata ± SE aktivitas serum ALT dan AST ......................... 38 Tabel VI Hasil analisis statistik uji Post Hoc Mann Whitney dari kebermaknaan aktivitas serum ALT antar kelompok ..................... 40 Tabel VII Hasil analisis statistik uji Post Hoc Mann Whitney dari kebermaknaan aktivitas serum AST antar kelompok ..................... 41 Tabel VIII Nilai persen efek hepatoprotektif pada ketiga kelompok peringkat dosis perlakuan ekstrak etanol kulit P. americana

  Mill. ................................................................................................ 47 Tabel IX Hasil rendemen ekstak etanol kulit P. americana .......................... 99 Tabel X Pengeringan ekstrak etanol kulit P. americana ............................ 100

  DAFTAR GAMBAR

  Gambar 1 Struktur molekul karbon tetraklorida ............................................. 12 Gambar 2 Mekanisme biotransformasi dan oksidasi dari karbon tetraklorida ...................................................................................... 14 Gambar 3 Tanaman P. americana Mill. ......................................................... 17 Gambar 4 Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada rentang waktu 0, 24, dan 48 jam.................................................................. 36

  Gambar 5 Diagram batang aktivitas serum ALT tikus jantan galur Wistar pada perlakuan jangka panjang ekstrak etanol kulit P.

  americana ....................................................................................... 39

  Gambar 6 Diagram batang aktivitas serum AST tikus jantan galur Wistar pada perlakuan jangka panjang ekstrak etanol kulit P.

  americana ....................................................................................... 42

  DAFTAR LAMPIRAN

  Lampiran 1 Foto Bagian Luar P. americana ............................................. 58 Lampiran 2 Foto Bagian Dalam P. americana .......................................... 58 Lampiran 3 Foto Bagian Kulit dan Biji P. americana ............................... 58 Lampiran 4 Foto Serbuk Kulit P. americana ............................................. 59 Lampiran 5 Foto Ekstrak Kental Kulit P. americana ................................ 59 Lampiran 6 Foto Larutan Ekstrak Etanol Kulit P. americana ................... 59 Lampiran 7 Surat Pengesahan Determinasi Kulit P. americana ................ 60 Lampiran 8 Surat Hasil Penetapan Kadar Air Serbuk Kulit P.

  americana ...............................................................................

  61 Lampiran 9 Surat Pengesahan Medical and Health Research Ethics Commitee (MHREC) .............................................................. 62

  Lampiran 10 Hasil Analisis Statistik Serum ALT Pada Uji Pendahuluan Penentuan Waktu Pencuplikan Darah .................................... 63

  Lampiran 11 Hasil Analisis Statistik Serum ALT Kontrol Hepatotoksin (CCl4), Kontrol Negatif (Olive Oil), Kontrol Ekstrak Etanol Kulita P. americana, Perlakuan Ekstrak Etanol Kulit P. americana (dosis 0,35; 0,70; 1,40 g.kgBB) .............. 66

  Lampiran 12 Hasil Analisis Statistik Serum AST Kontrol Hepatotoksin (CCl4), Kontrol Negatif (Olive Oil), Kontrol Ekstrak Etanol Kulita P. americana, Perlakuan

  Ekstrak Etanol Kulit P. americana (dosis 0,35; 0,70; 1,40 g.kgBB) ........................................................................... 82

  Lampiran 13 Hasil Rendemen Ekstrak Etanol Kulit P. americana ............. 99 Lampiran 14 Perhitungan Persen Hepatoprotektif ..................................... 100

  

INTISARI

  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek hepatoprotektif ekstrak etanol jangka panjang kulit Persea americana Mill. dalam menurunkan aktivitas serum Alanin Aminotransferase (ALT) dan Aspartat Aminotransferase (AST) pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida serta mengetahui dosis efektif pemberian ekstrak etanol kulit P.americana Mill.

  Penelitian ini bersifat eksperimental murni dengan rancangan penelitian acak lengkap pola searah. Penelitian ini menggunakan tikus jantan galur Wistar, umur 2-3 bulan, dan berat 150-250 gram. Tikus dibagi secara acak ke dalam enam kelompok perlakuan. Kelompok I merupakan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB secara intraperitonial. Kelompok II merupakan kontrol negatif diberi olive oil dengan pemberian dosis 2 mL/kgBB secara intraperitonial. Kelompok III merupakan kontrol perlakuan yaitu pemberian ekstrak etanol kulit P.americana Mill dosis 1,4 g/kgBB secara per oral. Kelompok

  IV-VI merupakan kelompok perlakuan ekstrak etanol kulit P.americana Mill dengan dosis 0,35; 0,70; 1,4 g/kgBB secara oral sekali sehari selama 6 hari berturut-turut kemudian pada hari ke-7 semua kelompok perlakuan (IV-VI) diberi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB secara intraperitonial. Pada jam ke-24 setelah pemberian CCl semua kelompok diambil darahnya pada daerah sinus orbitalis di

  4,

  mata tikus untuk diukur aktivitas serum ALT dan AST. Data dianalisis dengan uji

  

Kolmogorov-Smirnov untuk melihat distribusi datanya dan uji Mann-Whitney

untuk mengetahui perbedaan aktivitas serum ALT dan AST antar kelompok.

  Berdasarkan hasil penelitian, ekstrak etanol kulit Persea americana Mill. memberikan efek hepatoprotektif dengan adanya penurunan aktivitas ALT dan AST pada tikus terinduksi karbon tetraklorida. Hasil persen hepatoprotektif berturut-turut adalah 77,3; 101,9; dan 89,4%. Dosis efektif ekstrak etanol kulit

  

P.americana Mill setelah dilakukan analisis data secara statistik adalah 0,70

g/kgBB.

  

Kata Kunci : kulit Persea americana Mill., ekstrak etanol, karbon

tetraklorida, hepatoprotektif, ALT, AST

  ABSTRACT

  This aim of study research were to prove hepatoprotective effect of ethanol extract Persea americana Mill. peel for reducing serum activity of ALT and AST in rats induced by carbon tetrachloride and get effective dose of ethanol extract Persea americana Mill. peel.

  This research was purely experimental research with randomized complete direct sampling design. This research use male Wistar rats, attain the age 2-3 months, and 150-250 gram weight. The rats were divided into six treatment groups. Group I was carbon tetrachloride hepatotoxin control dose 2 mL/kgBW intraperitoneally. Group II was olive oil control by giving as much as 2 mL/kgBW intraperitoneally. Group III was control treatment given 1.40 g/kgBW ethanol extract Persea americana Mill. peel orally. Group IV-VI were the treatment group for ethanol extract Persea americana Mill. peel with dose 0.35; 0.70; 1.40 g/kgBW orally once a day for six days succesively and in the seventh day all the tratments group (IV-VI) were given carbon tetrachloride 2 mL/kgBW

  th

  intraperitoneally. At the 24 hour administration of CCl 4, all groups had blood drawn at the orbital sinus region to be measured ALT and AST serum activity. Data were analyzed using Kolmogorov-Smirnov test to look at the data distribution and Mann-Whitney test to determine the differences in ALT and AST serum activity in each group.

  Based of the result, ethanol extract Persea americana Mill. peel gave hepatoprotective effect for reducing serum activity of serum ALT and AST in rats induced by carbon tetrachloride with % hepatoprotective for smallest dose to largest dose was 77.3; 101.9; and 89.4% based from ALT serum. From the data measurement of activities ALT and AST serum which were obtained, the effective dose from ethanol extract Persea americana Mill. peel was 0.70 g/kgBW.

  

Keywords : Persea americana Mill. seed, ethanol extract, carbon

tetrachloride, hepatoprotective, ALT, AST

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Penelitian Hati atau hepar merupakan organ intestinal yang paling besar dalam

  tubuh manusia dan sangat penting peranannya dalam kelangsungan hidup manusia. Hati memegang peranan penting dalam hampir setiap proses metabolisme dan juga mampu mendetoksifikasi obat dan zat berbahaya (Nurachman dan Angriani, 2011). Akan tetapi, sama seperti halnya organ lain, hati juga dapat mengalami kerusakan/kelainan yang dapat menganggu kerja hati.

  Beberapa penyakit hati seperti peradangan (hepatitis) hingga sirosis dapat disebabkan oleh virus, obat-obatan, dan juga alkohol (Ganong dan McPhee, 2011).

  Penyakit hepar sudah menjadi perhatian dunia sebagai permasalahan kesehatan yang cukup serius baik di negara maju maupun negara berkembang.

  Prevalensi kerusakan hati di dunia menunjukkan jumlah yang serius untuk diwaspadai, misalnya di negara Inggris mengalami hepatotoksisitas dengan mengalami peningkatan kadar Alanin Aminotransferase (ALT) dan Aspartat

  

Aminotransferase (AST) sebanyak tiga hingga lima kali lipat sebesar 38,2%

  (Walker et al., 2009). Prevalensi penyakit perlemakan hati di Indonesia menurut penelitian Sofia, Nurdjanah, dan Ratnasari (2009) sebesar 30,6%. memberikan kerusakan sel hati berupa perlemakan hati. CCl

  4 yang bersifat toksik

  berperan sebagai pelarut lipid sehingga memudahkan senyawa tersebut menyebrangi membran sel dan terdistribusi ke semua organ. Ketoksikan CCl

  4

  telah terbukti bahwa pada dosis kecil sekalipun dapat menghasilkan timbunan radikal bebas dan menimbulkan efek pada berbagai organ termasuk susunan saraf pusat, hati, ginjal, dan peredaran darah, tetapi efek toksik CCl

  4 yang paling terlihat yaitu pada hati (Gene, 1999).

  Banyaknya kasus hepatotoksisitas membuat dunia kesehatan pada zaman sekarang ini sangat membutuhkan senyawa yang bisa bertindak sebagai hepatoprotektor. Penggunaan tumbuh-tumbuhan telah memainkan peranan penting dalam menjaga kesehatan dan menyembuhkan penyakit. World Health

  

Organization pada tahun 2008 memprediksi bahwa sekitar 80% penduduk dunia

  telah memanfaatkan tumbuhan obat tradisional dan melibatkan penggunaan ekstrak tanaman atau komponen aktifnya. Masyarakat umumnya menggunakan tanaman obat berdasarkan pengalaman empiris sehingga masih terbatasnya jaminan keamanan dan keuntungannya (Elvin-Lewis, 2001).

  Dalam penelitian ini penulis memilih alpukat (Persea americana Mill.) sebagai tanaman yang diyakini memiliki senyawa sebagai hepatoprotektor. Buah alpukat memiliki kandungan antioksidan dan zat gizi berupa lemak yang sangat baik untuk kesehatan. Menurut penelitian, biji alpukat (biji P. americana) mengandung alkaloid, tanin, triterpen, flavonoid, fenol, kuinon, dan saponin antialergi, antiviral, antiinflamasi, hepatoprotektif, antioksidan dan antikanker (Salah et al., 1995). Penelitian yang dilakukan Nopitasari (2013) melaporkan bahwa ekstrak etanol biji P. americana dengan dosis 0,35 g/kgBB secara jangka panjang (enam hari) memiliki efek hepatoprotektif pada tikus terinduksi CCl

  4

  dengan adanya penurunan nilai aktivitas ALT dan AST. Biji P. americana memang kaya akan berbagai kandungan, tetapi kulit P. americana pun memiliki kandungan antioksidan, protein, glukosinolat, pektin dan protease (Chitturi, Gopichans, Vuppu, 2013). Ekstrak kulit P. americana memiliki kandungan komponen fenolik dan aktivitas antioksidan yang lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak biji P. americana (Kosinska et al., 2012).

  Pada penelitian ini digunakan bentuk sediaan ekstrak etanol kulit alpukat. Hal ini berdasarkan penelitian Javier, David, Maria, Petri, dan Mario (2011) menyatakan bahwa dapat diperoleh senyawa fenolik dan aktivitas antioksidan biji

  

P. americana dari hasil isolasi dengan pelarut organik bersifat polar. Penggunaan

  pelarut etanol diharapkan mampu memperoleh senyawa fenolik dan aktivitas antioksidan dari biji P. americana, sehingga untuk menarik senyawa fenolik dan aktivitas antioksidan dari kulit dilakukan cara yang sama dengan biji. Pengamatan nilai aktivitas ALT dan AST didasarkan pada penelitian Edem dan Akpanabiatu (2006) menyatakan bahwa enzim ALT dan AST merupakan enzim pada serum yang dapat menjadi indikator untuk kerusakan hati, perubahan fungsi hati atau adanya toksisitas pada hati. Eksplorasi tanaman P. americana khususnya kulit yang terkait dengan efek hepatoprotektif masih belum banyak dilakukan. efek hepatoprotektif jangka panjang ekstrak etanol kulit P. americana terhadap aktivitas ALT-AST pada tikus terinduksi karbon tetraklorida.

1. Perumusan masalah

  Berdasarkan latar belakang yang telah diuraikan, permasalahan yang diajukan dalam penelitian ini adalah :

a. Apakah pemberian jangka panjang ekstrak etanol kulit alpukat (P.

  americana ) dapat memberikan efek hepatoprotektif terhadap penurunan

  aktivitas ALT-AST pada tikus jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida? b. Berapa dosis efektif pemberian ekstrak etanol kulit alpukat (P. americana) untuk memberikan efek hepatoprotektif terhadap penurunan aktivitas

  ALT-AST pada tikus jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida?

2. Keaslian penelitian

  Penelitian sebelumnya yang berkaitan dengan P. americana yaitu penelitian yang dilakukan oleh Kate dan Lucky (2009) melaporkan bahwa biji P.

  

americana dapat secara signifikan menurunkan tekanan darah, kadar kolestrol,

  glukosa, urea dan berfungsi sebagai antihipertensi. Nopitasari (2013) melaporkan lainnya menyatakan bahwa ekstrak kulit P. americana memiliki kandungan komponen fenolik dan aktivitas antioksidan yang lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak biji P. americana (Kosinska et al., 2012). Berdasarkan penelusuran pustaka yang dilakukan, penelitian efek hepatoprotektif jangka panjang ekstrak etanol kulit P. americana terhadap tikus terinduksi karbon tetraklorida belum pernah dilakukan.

3. Manfaat penelitian

  a. Manfaat teoritis. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan sumbangan ilmu pengetahuan terutama ilmu kefarmasian mengenai pengaruh pemberian jangka panjang ekstrak etanol kulit alpukat terhadap penurunan aktivitas ALT-AST pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.

  b. Manfaat praktis. Penelitian ini dapat dijadikan bahan pertimbangan masyarakat untuk menggunakan kulit alpukat dengan dosis yang diperoleh dalam penelitian sebagai alternatif pengobatan penyakit hati.

B. Tujuan Penelitian

1. Tujuan umum

  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek hepatoprotektif pemberian jangka panjang ekstrak etanol kulit P. americana pada tikus jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida dengan melihat penurunan aktivitas ALT- AST.

2. Tujuan khusus

  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui dosis pemberian ekstrak etanol kulit

  

P. americana yang efektif terhadap penurunan aktivitas ALT-AST pada tikus

jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida.

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Hati 1. Anatomi dan fisiologi hati Hati merupakan kelenjar terbesar dalam tubuh manusia yang terletak pada bagian teratas dalam rongga abdomen sebelah kanan di bawah diafragma. Hati dengan berat sekitar 1,4 kg atau 2-2,5% dari berat tubuh manusia dewasa

  menerima hampir 25% curah jantung atau sekitar 1500 mL darah per menit melalui vena porta dan arteri hepatica (Robbins & Cotran, 2005). Letak hati bergantung pada distensi organ sekitarnya, posisi tubuh dan juga gerak diafragma pada pernapasan (Widjaja, 2007)

  Hati memiliki dua lobus utama, yaitu lobus kanan yang besar dan lobus kiri yang kecil. Lobus kanan terdiri dari bagian segmen anterior dan posterior, sedangkan lobus kiri terdiri dari bagian segmen medial dan lateral. Lobus kanan dan lobus kiri dipisahkan di antero-superior oleh ligamentum falsiformis dan di postero-inferior oleh fisura. Ligamentum falsiformis dari hati melintasi diafragma sampai ke dinding abdomen anterior. Hepar memiliki 4 saluran, yaitu arteri

  

hepatica , vena porta hepatica, vena hepatica, dan kanal empedu. Setiap lobus

  pada hati terbagi menjadi struktur-struktur yang disebut dengan lobulus yang terdiri dari lempeng-lempeng sel hati yang berbentuk kubus dan tersusun menjulur ke vena sentral yang disebut sinusoid. Sinusoid merupakan cabang vena porta dan arteri hepatica dan dibatasi oleh sel Kupffer. Fungsi dari sel Kupffer adalah sebagai sistem monosit makrofag untuk menelan bakteri dan benda-benda asing dalam darah, sehingga hati merupakan salah satu organ yang sangat penting dalam pertahanan bakteri ataupun agen toksik (Baradero, Dayrit, Siswandi, 2005).

  Hati mempunyai fungsi utama sebagai pusat metabolisme tubuh. Beberapa aktifitas hati dalam regulasi metabolisme adalah sebagai berikut: a. Metabolisme karbohidrat. Kadar gula darah dapat distabilkan oleh hati.

  Hepatosit dapat memecah glikogen dan mengeluarkan glukosa ke aliran darah serta mensisntesis glukosa dari asam amino yang tersedia, jika kadar gula darah menurun. Sintesis glukosa dari komponen lain disebut juga glukoneogenesis. Saat tubuh kekurangan gula darah, cadangan glikogen yang disimpan dalam hati akan diubah menjadi glukosa baru dengan memecah glikogen (Martini, 2004).

  b. Metabolisme lipid. Apabila kadar trigliserida, asam lemak, dan kolestrol menurun, hati akan memecah cadangan lipid dan akan dikeluarkan ke aliran darah. Trigliserida yang ada di dalam tubuh nantinya akan menjadi asam lemak untuk cadangan energi (Martini, 2004).

  c. Metabolisme asam amino. Hepar dapat menurunkan peningkatan jumlah asam amino dalam sirkulasi darah. Kegunaan asam amino untuk mensisntesis protein dan dapat diubah menjadi glukosa atau lipid untuk cadangan energi d. Detoksifikasi. Hepar berperan dalam menghilangkan zat-zat endogen dan eksogen yang dapat merugikan tubuh. Kerusakan pada hepar menandakan efek toksik dari zat-zat tersebut tidak dapat didetoksifikasi (Baradero et al., 2005).

  e. Penyimpanan mineral. Hati dapat mengubah cadangan besi menjadi ferritin dan protein ion kompleksnya dapat disimpan (Martini, 2004).

  f. Penyimpanan vitamin. Vitamin A, D, E, dan K yang dapat larut dalam lemak dapat diabsorbsi dari darah dan disimpan di dalam hepar (Martini, 2004).

  g. Inaktivasi obat. Hepar dapat menghilangkan dan memecah sirkulasi obat tanpa menurunkan durasi dari efeknya (Martini, 2004).

  Sel-sel hati mendapatkan suplai darah dari vena portae hepatis yang kaya akan makanan, tidak mengandung oksigen dan terkadang toksik. Sistem peredaran darah yang tidak biasa ini menyebabkan sel-sel hati mendapat darah yang relatif kekurangan oksigen dan keadaan ini dapat menjelaskan penyebab sel hati lebih rentan terhadap kerusakan dan penyakit ( Wibowo dan Paryana, 2009).

2. Kerusakan hati

  Hepatotoksik adalah kerusakan hati yang berhubungan dengan kerusakan fungsi hati karena paparan obat atau agen non-infeksi lainnya (Navarro dan Senior, 2006). Berbagai macam kerusakan hati bergantung pada agen toksik, kekerasan intoksikasi dan jenis pejanan yang termasuk akut atau kronis. Ketika sel hati rusak maka enzim hati yang spesifik dikeluarkan, yaitu alanin aminotransferase (ALT), aspartat aminotransferase (AST), alkalin fosfatase (ALP) ke dalam darah (Hodgson, 2010).

  Senyawa toksik dapat menyebabkan berbagai jenis efek toksik pada berbagai organel dalam sel hati. Jenis kerusakan hati, seperti :

a. Steatosis (Perlemakan Hati). Perlemakan hati adalah hati yang mengandung berat lipid lebih dari 5% atau mengenai lebih dari separuh jaringan sel hati.

  Perlemakan hati ini berpotensi menjadi penyebab kerusakan hati dan sirosis hati (Gregus dan Klaaseen, 2001). Mekanisme terjadinya penimbunan lemak dalam hati cukup beragam, yang paling umum adalah terjadinya pelepasan trigliserida hati ke plasma (Lu, 1995).

  b. Nekrosis hati. Nekrosis hati adalah suatu kematian hepatosit yang biasanya merupakan kerusakan akut yang ditandai dengan pembengkakan sel, kebocoran, dan hancurnya inti serta masuknya sel-sel radang. Kematian sel terjadi bersamaan dengan pecahnya membran plasma. Perubahan biokimia pada nekrosis hati ini bersifat kompleks (Lu, 1995).

  c. Sirosis hati. Sirosis hati merupaka bentuk kerusakan hati yang kronis dan fatal. Hal ini ditandai dengan adanya penghancuran hepatosit dan adanya septa kolagen yang tersebar di sebagian besar hati (Mary, Mary dan Yakobus, 2005). Sirosis bersifat irreversibel, biasanya juga disebabkan oleh paparan berulang zat kimia beracun misalnya alkohol ( Lu, 1995).

3. Hepatotoksin

  Senyawa dan obat yang dapat menyebakan kerusakan hati dibedakan menjadi dua, yaitu : a. Hepatotoksin teramalkan (Tipe A). Hepatotoksin tipe A ini merupakan obat atau senyawa yang bila diberikan dapat mempengaruhi sebagian besar orang yang mengonsumsinya dalam jumlah yang cukup untuk menimbulkan efek toksik dan bergantung pada dosis pemberian. Contoh dari obat-obat pada tipe ini adalah parasetamol, karbon tetraklorida, tetrasiklin, dan salisilat ( Forrest, 2006).

  b. Hepatotoksin tidak teramalkan (Tipe B). Hepatotoksin tipe B ini merupakan obat atau senyawa yang tidak bersifat toksik pada hati tetapi jika diberikan pada orang tertentu dapat menimbulkan efek toksik dan hepatotoksin ini tidak tergantung pada dosis pemberian. Contoh obat-obat pada tipe ini adalah isoniazid, halothan, klorpromazin (Forrest, 2006).

B. Alanin Aminotransferase (ALT) dan Aspartat Aminotransferase (AST)

  Kerusakan sel-sel hati dapat dideteksi dengan pengukuran indeks fungsional dan mengamati produk hepatosit yang rusak. Uji enzim seringkali menjadi petunjuk adanya cedera sel pada penyakit hati karena perubahan ringan kapasitas ekskretorik mungkin tersamarkan akibat kompensasi dari bagian hati

  Enzim ALT dan AST merupakan enzim pada serum yang dapat menjadi indikator untuk kerusakan hati, perubahan fungsi hati atau adanya toksisitas pada hati (Edem dan Akpanabiatu, 2006). AST menjadi perantara reaksi antara asam aspartat dan asam alfaketoglutamat sedangkan ALT memindahkan satu gugus amino antara alanin dan asam ketoglutamat (Sacher dan McPherson, 2004). Enzim ALT lebih spesifik untuk organ hati karena proporsinya paling banyak berada pada organ ini disbanding organ tubuh lainnya (Edem dan Akpanabiatu, 2006). Menurut AIDSC (cit., Fajar, 2013), kerusakan akut pada hepar terjadi ketika peningkatan kadar ALT lebih dari lima kali dari kadar normalnya. Hati yang mengalami nekrosis atau kehancuran akan menyebabkan kenaikan kadar transaminase pada serum. Enzim transaminase akan masuk ke dalam pembuluh darah dan membuat kadar transaminase dalam darah meningkat (Hartono, Nurwanti, Ikasari, Wiryanti, 2005).

C. Karbon Tetraklorida

  

Gambar 1. Struktur molekul karbon tetraklorida (Direktorat Jenderal

Pengawasan Obat dan Makanan, 1995)

  Karbon tetraklorida (Gambar 1) merupakan senyawa golongan halogen yang berbentuk cairan jernih, bersifat mudah menguap, tidak berwarna, dan berbau khas. Senyawa karbon tetraklorida mempunyai BM 153,82 dan sangat sukar larut dalam air, sangat mudah larut dalam alkohol, benzene, kloroform, eter, karbon disulfida, aseton (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995).

  Karbon tetraklorida termasuk dalam golongan senyawa beracun dan sangat berbahaya bagi lingkungan. Senyawa ini digunakan biasanya sebagai fumigasi atau pengasapan di pertanian, penghilang noda, bahan dasar

  

chlorofluorocarbon (CFC) untuk pendingin AC, pelarut minyak, lilin, dan karet

  (SiKerNas, 2010). Senyawa ini merupakan molekul sederhana, yang jika diberikan kepada berbagai spesies dapat menyebabkan nekrosis sentrilobuler dan perlemakan hati (Timbrell, 2008).

  Kerusakan sel dapat diinisiasi oleh beberapa mekanisme antara lain penghambatan enzim, pengurangan metabolit atau kofaktor, pengurangan ATP, interaksi dengan reseptor, peningkatan intraseluler kalsium, pembentukan metabolit aktif, dan perubahan membran sel. Obat dapat menyebabkan kerusakan sel melalui mekanisme aktifasi metabolit pada tingkatan yang lebih tinggi seperti radikal bebas, karbon, dan nitro akibat stres oksidatif (Hodgson, 2010).

  Karbon tetraklorida cepat diabsorbsi melalui rute apa saja pada manusia dan hewan. Karbon tetraklorida setelah mengalami absorbsi akan didistribusikan diantara jaringan terutama yang memiliki banyak timbunan lipid. Karbon CYP450. Metabolisme CCl

  4 dilakukan penelitian in vivo dan in vitro pada

  mamalia. Tahap awal biotransformasi dari karbon tetraklorida adalah reduksi dehalogenisasi: pembelahan ikatan klorida karbon menjadi ion klorida dan radikal triklorometil. Triklorometil radikal (

  ●CCl3) dapat berikatan kovalen dengan protein atupun lipid menyebabkan kerusakan membran (Klaassen, 2001).

  

Gambar 2. Mekanisme biotransformasi dan oksidasi dari karbon

tetraklorida (Timbrell, 2008)

  Penyebab terjadinya kerusakan jaringan oleh karbon tetraklorida tergantung pada metabolisme aktivasi oleh sitokrom P450, terutama CYP2EI.

  Enzim mikrosomal CYP2EI akan mempengaruhi aktivasi metabolit dari senyawa agen pereduksi dan mengkatalis adisi elektron yang mengakibatkan hilangnya satu ion klorin sehingga terbentuk radikal bebas triklorometil (

  3 ) yang merupakan

  ●CCl metabolit reaktif. Radikal bebas triklorometil ini dengan adanya oksigen (O

  2 ) akan

  berubah menjadi radikal bebas triklorometilperoksi (

  3 ) (Gambar 2) yang

  ●OOCCl bersifat lebih reaktif (Klaaseen, 2001).

D. Antioksidan

  Antioksidan merupakan senyawa pemberi elektron yang bekerja dengan mendonorkan satu elektronnya kepada senyawa yang bersifat oksidan sehingga aktivitas senyawa oksidan tersebut bisa terhambat. Antioksidan menstabilkan radikal bebas dengan melengkapi kekurangan elektron yang dimiliki radikal bebas dan menghambat terjadinya reaksi berantai dari pembentukan radikal bebas (Winarsi, 2007). Senyawa antioksidan bisa didapatkan dari berbagai tanaman dan memiliki potensi tinggi untuk mengurangi berbagai resiko penyakit. Senyawa antioksidan seperti asam fenolik, polifenol, flavonoid dapat menghambat mekanisme oksidasi yang mengarah pada penyakit degeneratif (Percival, 1996).

E. Persea americana Mill.

1. Sinonim

  L., Persea americana var. angustifolia Miranda, Persea

  Laurus persea

americana var. drymifolia (Schldtl &Cham) S. F. Blake, Persea americana var.

  

Persea edulis Raf., Persea floccosa Mez, Persea gigantea L. O. Williams, Persea

gratissima

C. F. Gaertn., Persea gratissima var. drimyfolia (Schldtl. & Cham.)

  Mez, Persea pleiogyna Blake, Persea nubigena L. O. Williams, Persea

paucitriplinervia Lundell, Persea persea (L.) Cockerell, Persea streyermarkii C.

  K. Allen. (Lim, 2012).

  2. Taksonomi

  Kingdom : Plantae (Tumbuhan) Subkingdom : Tracheobionta (Tumbuhan berpembuluh) Super Divisi : Spermatophyta (Menghasilkan biji) Divisi : Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga) Kelas : Magnoliopsida (Berkeping dua/dikotil) Sub Kelas : Magnoliidae Ordo : Laurales Famili : Lauraceae Genus : Persea Spesies : Persea americana.Mill.

  (USDA, 2014).

  3. Nama Lain Avocado, avocado-per, butter fruit (Inggris), avocado (Filipina),

alligatorbirne, avocadobirne (Jerman), adpukat, avokad (Indonesia), apukado,

  

avokado (Malaysia), Aguacate, Pagua (Spanyol), awokado (Thailand), avocat,

avocatier, zabelbok, zaboka (Prancis) (Yasir, Das, Kharya, 2010).

  4. Morfologi Gambar 3. Tanaman P. americana Mill. (Proseanet, 2012) Persea americana (Gambar 3) merupakan pohon yang selalu hijau

  dengan tinggi mencapai 20 m. Pohon terdiri dari daun tunggal, tersusun spiral, tepi daun rata; panjang tangkai daun 1,5-5 cm; daun berbentuk elips hingga lanset, bulat telur hingga bulat telur sungsang, panjang daun 5-40 cm dan lebar 3-15 cm, permukaan atas daun diselaputi lilin. Bunga berupa tongkol majemuk yang muncul di ujung cabang; bunga banci tersusun atas 3 daun mahkota, memiliki bau bagian dasarnya; putik terdiri atas satu ruang bakal buah, tangkai kepala putik ramping dengan kepala putik tunggal. Buah besar berdaging dan berair (berry), berbiji tunggal, permukaan buah halus, panjang 7-20 cm. Buah besar dan bulat dilapisi dua lapisan dan dua kotiledon besar yang melindungi embrio kecil (Proseanet, 2012).

  5. Kandungan kimiawi

  Menurut penelitian yang dilakukan Chitturi dkk. (2013), kulit P.americana Mill. memiliki kandungan protease, protein, antioksidan, melanin, glukosinolat, dan pektin. Menurut Maryani (2003) kulit P.americana juga sangat kaya akan kandungan senyawa flavonoida. Penelitian Vinha, Moreira, Barreira (2013) menyatakan bahwa senyawa fenolik yang terdapat di kulit P.americana Mill. lebih banyak dibandingkan biji P.americana Mill., dan juga terdapat banyak vitamin seperti vitamin C dan E pada kulit P.americana Mill.

  6. Khasiat dan kegunaan

  Kandungan metabolit biji P.americana Mill. dilaporkan mempunyai khasiat yang efektif yaitu melawan hepatotoksitas, inflamasi, kanker dan mengobati hipertensi (Arukwe et al., 2012). Penelitian Nopitasari (2013) menyatakan bahwa biji P.americana Mill.memiliki efek hepatoprotektif terhadap tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida. Kulit buah alpukat bermafaat untuk pengeluaran air seni dan obat sariawan karena adanya kandungan senyawa

  

P.americana Mill. masih sangat minim dan hanya berkisar pada kandungan yang

terdapat pada kulit saja.

F. Metode Pengujian

  Studi tentang efek toksik pada hati dapat dilakukan secara in vivo maupun in vitro. Model in vivo dapat menunjukkan bahwa senyawa eksogen menimbulkan kerusakan pada hati berdasarkan pada tanda-tanda fisiologi yang terjadi. Model in vitro menjelaskan mengenai mekanisme kerusakan hati yang terjadi. Parameter yang dapat digunakan untuk mengevaluasi kerusakan hati antara lain tes enzim serum, tes ekskretori hati, perubahan penyusun kimia dalam hati, analisis histologi kelainan hati.

a. Tes enzim serum. Pengukuran dilakukan untuk mendeteksi ketoksikan pada hati yang didasarkan spesifikasi dan sensitivitas berbagai tipe kerusakan hati.

  Enzim-enzim transaminase adalah contoh yang paling utama kelompok enzim hati yang level serumnya berubah pada gangguan hepatoseluler. Penentuan ALT dan AST adalah cara pengukuran parameter umum dalam plasma untuk mendeteksi kerusakan hati. Peningkatan enzim yang dihasilkan bisa beberapa kali lipat dare harga normal dalam 24 jam pertama (Timbrell, 2008).

  b. Tes ekskretori hati. Kemampuan hati untuk mensintesis urea, kolestrol, dan mempertahankan kadar glukosa darah serta asam amino merupakan fungsi hati. Bilirubin dan xenobiotika merupakan contoh senyawa yang digunakan yang terjadi di hati dapat dijadikan parameter hepatotoksisitas (Zimmerman, 1978).

  c. Perubahan penyusun kimia dalam hati. Perubahan struktural dan fungsional hepatik yang disebabkan oleh zat hepatotoksik dapat mendeteksi tingkat kerusakan hati. Perubahan efek farmakologis obat dapat juga digunakan untuk penentuan dan pendeteksi disfungsi hati (Plaa dan Charbonneau, 2001).

  d. Analisis histologi kelainan hati. Deskripsi histologi kerusakan juga sangat penting dalam analisis potensi hepatotoksik zat kimia terhadap kerusakan yang dihasilkan. Pengamatan mikroskopik cahaya dapat dilakukan untuk menentukan histologi kerusakan hati (Plaa dan Charbonneau, 2001).

G. Metode Ekstraksi

  Ekstraksi senyawa metabolit sekunder dare seluruh bagian tumbuhan seperti bunga, buah, daun ,kulit batang dan akar pada umumnya menggunakan sistem maserasi dengan menggunakan pelarut organik.

  Metode maserasi merupakan cara penyarian yang sederhana yang dilakukan dengan merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari selama beberapa hari pada temperatur kamar dan terlindung cahaya. Metode ini digunakan untuk menyari simplisia yang mengandung komponen kimia yang mudah larut dalam cairan penyari yang tidak mengandung tiraks, lilin dan benzoin

  Ekstrak adalah sediaan yang diperoleh dengan cara ekstraksi tanaman obat dengan ukuran partikel tertentu dan menggunakan medium pengekstraksi yang tertentu yang dapat dilakukan dengan berbagai cara (Agoes, 2009).

H. Landasan Teori

  Hati merupakan organ penting dalam proses metabolisme tubuh. Sel hati mendapat suplai darah dari vena portae hepatis yang tidak mengandung oksigen dan terkadang toksik sehingga sel hati lebih rentan terhadap kerusakan dan penyakit (Wibowo dan Paryana, 2009). Alanin aminotransferase (ALT) dan

  

aspartat aminotransferase (AST) merupakan serum yang sering digunakan untuk

melihat kerusakan sel hati (DiPiro et al., 2005).

  Bentuk kerusakan hati salah satunya berupa perlemakan hati. Hal itu terjadi karena adanya induksi senyawa model hepatotoksik. Senyawa model hepatotoksik yang digunakan dalam penelitian ini adalah karbon tetraklorida. Karbon tetraklorida direduksi oleh suatu enzim sitokrom P-450 menjadi radikal bebas berupa triklorometil (

  3 ) dan triklorometilperoksida ( 3 ) yang

  ●CCl ●OOCCl bersifat lebih reaktif (Klaaseen, 2001). Radikal triklorometil akan berikatan secara kovalen dengan lemak dan protein dan secara langsung dengan membran fosfolipid dan kolestrol. Radikal lipid akan mengaktifkan senyawa oksigen reaktif yang dapat menyebabkan peroksidasi lipid (Timbrell, 2008).

  Radikal bebas sangat berbahaya bagi tubuh karena dapat memicu dibutuhkan antioksidan untuk mengurangi dan menghalangi radikal bebas masuk ke dalam tubuh. Penelitian Nopitasari (2013) menyatakan bahwa biji P.americana Mill.memiliki efek hepatoprotektif terhadap tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida. Kulit P.americana memiliki khasiat yang hampir sama dengan biji

  

P.americana sebagai antioksidan yang diperoleh dari kandungan fenoliknya

(Kosinska et al., 2012).

  Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui apakah pemberian ekstrak etanol jangka panjang kulit P.americana dapat memberikan efek hepatoprotektor dengan melihat penurunan nilai aktivitas ALT dan AST pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida dan juga akan ditentukan dosis efektif ekstrak etanol kulit P.

  americana dalam memberikan efek hepatoprotektif.

I. Hipotesis

  Ekstrak etanol kulit P. americana dalam penggunaan jangka panjang dapat memberikan efek hepatoprotektif dengan menurunkan kadar ALT-AST pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.

BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis dan Rancangan Penelitian Penelitian ini merupakan jenis penelitian eksperimental murni dengan

  menggunakan rancangan penelitian acak lengkap pola searah. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Farmakologi Toksikologi, Laboratorium Farmakognosi Fitokimia Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

B. Variabel dan Definisi Operasional

  Variabel

  • – variabel yang digunakan pada penelitian ini adalah :

  1. Variabel utama a. Variabel bebas. Dosis pemberian jangka panjang ekstrak etanol kulit P. americana .

  b. Variabel tergantung. Nilai aktivitas serum ALT dan AST tikus jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida setelah pemberian jangka panjang ekstrak etanol kulit P. americana.

  2. Variabel pengacau

  a. Variabel pengacau terkendali. Kondisi hewan uji yaitu tikus jantan galur Wistar, berat badan 150

  • – 250 gram, umur 2 – 3 bulan, pemberian ekstrak secara per oral dengan frekuensi satu kali sehari

  americana yang ditanam di Wonosari dan didapatkan dari depot Es Teler 77 di Plaza Ambarukmo Yogyakarta.

b. Variabel pengacau tak terkendali. Kondisi patologis dari tikus jantan galur Wistar.

3. Definisi operasional

  a. Ekstrak etanol kulit P. americana. Didefinisikan sebagai ekstrak kental dari serbuk kering kulit P. americana yang dilarutkan dalam pelarut etanol 70% dan dimaserasi selama 5 hari dengan sesekali penggojogan dan remaserasi selama 2 hari. Kemudian disaring dengan corong

  Buchner yang dilapisi dengan kertas saring, dievaporasi dan diuapkan

  di atas waterbath pada suhu 8 0˚C hingga mencapai bobot pengeringan tetap dengan susut pengeringan sebesar 0%.

  b. Efek hepatoprotektif. Didefinisikan sebagai kemampuan ekstrak etanol kulit P. americana pada dosis tertentu dalam melindungi hati (penurunan aktivitas ALT-AST) pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.

  c. Pemberian jangka panjang. Didefinisikan sebagai pemberian ekstrak etanol kulit P. americana terhadap tikus jantan galur Wistar satu kali sehari selama enam hari berturut-turut.

d. Dosis efektif. Dosis terkecil dimana sediaan ekstrak etanol kulit P.

  americana mampu memberikan efek penurunan aktivitas ALT paling

C. Bahan Penelitian

1. Bahan utama

  a. Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus jantan galur Wistar dengan berat badan 150

  • – 250 gram dan berumur 2 – 3 bulan yang diperoleh dari Laboratorium Imunologi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

  b. Bahan uji yang digunakan adalah kulit P. americana yang diperoleh dari depot Es Teler 77 di Plaza Ambarukmo Yogyakarta periode Juni-Juli 2014.

2. Bahan kimia

  a. Senyawa hepatotoksin yang digunakan adalah karbon tetraklorida yang diperoleh dari Laboratorium Kimia Analisis Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

  b. Pelarut untuk ekstraksi kulit P. americana digunakan etanol 70% yang diperoleh dari toko bahan kimia General Labora Yogyakarta.

  c. Kontrol negatif dan pelarut karbon tetraklorida digunakan olive oil (minyak zaitun) Bertolli berbentuk cair yang dibeli dari Superindo Yogyakarta.

  d. Pelarut ekstrak etanol kulit P. americana digunakan CMC Na berbentuk serbuk yang diperoleh dari Laboratorium Biofarmasetika Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

  e. Reagen serum ALT Komposisi dan konsentrasi dari reagen ALT Diasys yang digunakan adalah

  

Tabel I. Komposisi dan konsentrasi reagen serum ALT

  9,6 100 mmol/L 13mmol/L

  9,6 100 mmol/L 13mmol/L

  Pyridoxal- 5phosphate FS: Good’s buffer Pyridoxal- 5-phosphate

  1 mmol/L

  ≥ 1200 mmol/L R2: 2-oxoglutarate 65 mmol/L NADH

  ≥ 800 U/L LDH (lactate dehydrogease)

  Komposisi pH Konsentrasi R1: TRIS 7,65 110 mmol/L L-aspartate 320 mmol/L MDH (malate deydrogenase)

  Pyridoxal- 5phosphate FS: Good’s buffer Pyridoxal- 5-phosphate

  Komposisi dan konsentrasi dari reagen AST Diasys yang digunakan adalah sebagai berikut

  1 mmol/L

  ≥ 2300 mmol/L R2: 2-oxogultarate 85 mmol/L NADH

  700 mmol/L LDH (lactate dehydrogease)

  Komposisi pH Konsentrasi R1: TRIS 7,15 140 mmol/L L-alanine

f. Reagen serum AST

  Alat – alat yang digunakan antara lain oven, mesin penyerbuk dan ayakan. Seperangkat alat gelas berupa Bekker glass, Erlenmeyer, gelas ukur, labu ukur, cawan porselen, corong Buchner, pipet tetes, batang pengaduk (Pyrex

   Alat Penelitian

  

Tabel II. Komposisi dan konsentrasi reagen serum AST

D.

1. Alat pembuatan serbuk kering dan ekstrak etanol P. americana

  timbangan analitik Mettler Toledo®, orbital shaker Optima®, rotary vacuum

  evaporator IKAVAC®, oven Memmert®.

2. Alat uji hepatoprotektif

  Seperangkat alat gelas berupa Bekker glass, gelas ukur, tabung reaksi, labu ukur, pipet tetes, batang pengaduk (Pyrex Iwaki Glass®), timbangan analitik Mettler Toledo®, spuit injeksi, syringe 3 cc Terumo®, jarum tuberculin.

E. Tata Cara Penelitian

  1. Determinasi kulit P. americana

  Determinasi dilakukan untuk memastikan validitas tanaman yang digunakan. Determinasi dilakukan dengan mencocokkan kulit P. americana yang diperoleh dari depot Es Teler 77 di Plaza Ambarukmo Yogyakarta dengan kulit P. americana dilakukan di Laboratorium Farmakognosi Fitokimia dengan menggunakan buku acuan (Agrilink, 2001).

  2. Pengumpulan bahan uji

  Bahan uji yang digunakan adalah kulit P. americana yang masih segar dan tidak busuk yang diperoleh dari depot Es Teler 77 di Plaza Ambarukmo Yogyakarta periode Juni-Juli 2014.

  3. Pembuatan serbuk kulit P. americana Kulit P. americana dicuci bersih dan dipisahkan dari sisa buahnya. dalam oven pada suhu 50

  o

  C selama 24 jam kemudian dihaluskan dan diayak dengan ayakan nomor 40.

  4. Penetapan kadar air pada serbuk kering kulit P. americana

  Serbuk kering kulit P. americana yang sudah diayak, dimasukkan sebanyak ± 5 gram ke dalam alat moisture balance kemudian diratakan.

  Bobot serbuk kering kulit tersebut ditetapkan sebagai bobot sebelum pemanasan (bobot A), setelah itu dipanaskan pada suhu 110 C. Serbuk kering kulit P. americana yang sudah dipanaskan ditimbang kembali dan dihitung sebagai bobot setelah pemanasan (bobot B). Kemudian dilakukan perhitungan terhadap selisih bobot A terhadap bobot B yang merupakan kadar air serbuk kulit P. americana.

  5. Pembuatan ekstrak etanol kulit P. americana

  Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi. Sebanyak 40 g serbuk kulit

  P. americana direndam dalam 200 mL pelarut etanol 70% pada suhu kamar

  selama 5 x 24 jam. Setelah dilakukan perendaman, hasil maserasi kemudian disaring menggunakan corong Buchner yang dilapisi kertas saring sehingga diperoleh filtrat. Serbuk sisa perendaman dimaserasi kembali (remaserasi) dengan 200 mL etanol 70 % selama 2 x 24 jam. Filtrat hasil saringan dipindahkan dalam labu alas bulat untuk dievaporasi untuk menguapkan cairan penyari pada proses maserasi. Hasil evaporasi dituangkan dalam cawan porselen yang telah ditimbang sebelumnya agar mempermudah perhitungan rendemen ekstrak yang akan diperoleh. Cawan porselen yang untuk mendapatkan ekstrak etanol kulit P. americana dengan bobot pengeringan ekstrak yang tetap, kemudian dilakukan perhitungan rata-rata rendemen dari replikasi ekstrak etanol kulit P. americana kental yang telah dibuat.

  Rendemen ekstrak = berat cawan ekstrak kental

  • – berat cawan kosong Rata-rata rendemen = 6.

   Penetapan konsentrasi pekat ekstrak

  Konsentrasi yang digunakan adalah konsentrasi pekat yang dapat dibuat dimana pada konsentrasi tersebut ekstrak dapat dimasukkan serta dikeluarkan dari spuit oral. Cara pembuatannya adalah dengan melarutkan ekstrak per cawannya dengan pelarut yang sesuai, yaitu CMC Na 1% (Kurniawati, Adrianto,Hendra., 2011). Sebanyak 3,5 gram ekstrak dalam labu ukur 50 mL dengan pelarut yang sesuai yaitu CMC Na 1% sehingga konsentrasi ekstrak dapat ditetapkan sebesar 7%b/v atau 0,07 g/mL atau 70 mg/mL.

7. Penetapan dosis ekstrak etanol kulit P. americana

  Penetapan peringkat dosis mengacu pada penelitian Nopitasari (2013) yaitu ditetapkan peringkat dosis melalui perhitungan dengan bobot tikus paling besar yaitu 250 mg, konsentrasi ekstrak etanol kulit P. americana yang dapat dimasukkan dan dikeluarkan melalui spuit oral yaitu 7% atau 70

  BB x D = C x V 0,250 kg x D = 70mg/mL x 5 mL

  D = 1400 mg/kg BB Dosis tengah dan dosis rendah ditentukan dengan menurunkan dua kelipatan dari dosis tertinggi sehingga diperoleh dosis 700 dan 350 mg/kg

  BB. Dosis yang akan digunakan dalam penelitian adalah 350, 700, dan 1400 mg/kg BB.

  8. Pembuatan CMC-Na 1%

  Ditimbang sebanyak 1 gram CMC-Na, kemudian dilarutkan menggunakan aquadest sebanyak 50 mL, didiamkan selama 24 jam hingga CMC-Na mengembang, kemudian di add hingga 100 mL pada labu ukur.

  9. Pembuatan larutan karbon tetraklorida dalam olive oil

  Perbandingan karbon tetraklorida dengan olive oil 1:1, sehingga keduanya diambil dengan seksama dan dicampur hingga homogeny dalam gelas bekker.

  10. Uji pendahuluan

a. Penetapan dosis hepatotoksin (karbon tetraklorida). Berdasarkan penelitian

  Murugesan dkk. (2009) dosis tunggal injeksi sebesar 2 mL/kgBB karbon tetraklorida dengan perbandingan karbon tetraklorida dengan olive oil 1:1.

  Dosis ini menyebabkan kenaikan ALT dan AST pada tikus jantan galur Wistar tetapi tidak menyebabkan kematian.

b. Penetapan waktu pencuplikan darah. Penetapan waktu pencuplikan darah

  pada jam ke 0, 24, 48 setelah pemejanan karbon tetraklorida. Setiap kelompok perlakuan terdiri dari 5 hewan uji yang pengambilan darahnya dilakukan melalui pembuluh sinus orbitalis mata. Kemudian nilai aktivitas ALT diukur.

11. Pengelompokkan dan perlakuan hewan uji

  Hewan uji yang dibutuhkan sebanyak 30 ekor tikus jantan galur Wistar yang dibagi secara acak dalam 6 kelompok sama banyak. Kelompok I (kelompok kontrol hepatotoksin) diberi karbon tetraklorida dengan pelarut

  olive oil dengan dosis 2g/kgBB secara inraperitonial. Kelompok II (kelompok

  kontrol negatif) diberi olive oil secara intraperitonial. Kelompok III (kelompok kontrol ekstrak etanol) diberi ekstrak etanol kulit P. americana dengan dosis 1,4 g/kg BB selama 6 hari berturut-turut. Setelah 24 jam, kelompok I-III diambil darahnya melalui vena orbitalis kemudian diukur aktivitas ALT-AST. Kelompok IV, V, VI (kelompok perlakuan) diberi ekstrak etanol kulit P. americana dengan seri dosis 0,35 ; 0,7 dan 1,4 g/kg BB secara peroral sekali sehari selama enam hari berturut-turut. Pada hari ke tujuh kelompok IV-VI dipejankan karbon tetraklorida dengan dosis 2 g/kgBB secara per oral. Pada jam ke 24 setelah pemberian karbon tetraklorida, diambil darahnya melalui vena orbitalis dan diukur aktivitas ALT-AST.

F. Tata Cara Analisis Hasil

  data yang normal maka analisis dilanjutkan dengan analisis pola searah (One Way ANOVA) dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui perbedaan masing- masing kelompok. Kemudian dilanjutkan dengan uji Scheffe untuk melihat perbedaan masing-masing antar kelompok bermakna (signifikan) (p<0,05) atau tidak bermakna (tidak signifikan) (p>0,05). Namun bila didapatkan distribusi tidak normal, maka dilakukan analisis dengan uji Kruskal Wallis untuk mengetahui perbedaan aktivitas ALT dan AST antar kelompok. Setelah itu dilanjutkkan dengan uji Mann Whitney untuk mengetahui perbedaan tiap kelompok.

  Perhitungan persen efek hepatoprotektif terhadap hepatotoksin karbon tetraklorida diperoleh dengan rumus:

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. Hasil Determinasi Tanaman Determinasi tanaman dilakukan dengan tujuan untuk menjamin

  kebenaran buah dari tanaman yang digunakan dalam penelitian mengenai efek hepatoprotektif ekstrak kulit P. americana. Determinasi dilakukan dengan cara mencocokkan kesamaan buah alpukat dengan acuan yang digunakan. Bagian- bagian tanaman yang digunakan pada determinasi tidak hanya kulit saja melainkan buah alpukat. Buah P. americana yang digunakan dalam penelitian memiliki ciri-ciri bentuk seperti buah pir, warna kulit hijau agak kegelapan, dan memiliki permukaan kulit yang tebal dan halus. Hasil determinasi dengan menggunakan acuan (Agrilink, 2001) membuktikan bahwa benar yang digunakan dalam penelitian adalah buah dari tanaman P. americana dengan jenis endranol.

B. Hasil Kadar Air Serbuk Kulit P. americana

  Tujuan dari penetapan kadar air untuk mengetahui kandungan air dalam serbuk kulit P. americana, sehingga dapat diketahui apakah serbuk memenuhi salah satu persyaratan serbuk yang baik atau tidak, yaitu memiliki kadar air kurang dari 10% (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995).

  Penetapan kadar air ini dilakukan dengan menggunakan metode

  7,1%. Hal ini menyatakan bahwa kadar air serbuk kulit P. americana sudah memenuhi persyaratan yang ditetapkan.

C. Standarisasi Ekstrak Etanol Kulit P. americana

  Dalam penelitian ini, pembuatan ekstrak etanol kulit P. americana menggunakan metode maserasi. Pemilihan metode maserasi dikarenakan metode ini dinilai cukup sederhana dalam prosesnya dan cocok digunakan untuk menyari simplisia yang komponen zat aktifnya mudah larut dalam cairan penyari. Cairan penyari yang digunakan dalam penelitian ini adalah etanol.

  Kulit alpukat diserbukkan terlebih dahulu dan diayak dengan ayakan no mesh 40 sebelum proses maserasi dimulai. Pada standarisasi ekstrak etanol kulit

  

P. americana yang menjadi parameter adalah dilihat dari bobot tetap dengan susut

  pengeringan 0% yang bertujuan untuk menghitung sisa zat setelah dilakukan

  o

  pengeringan pada suhu 80

C. Ekstrak yang berada dalam cawan ditimbang tiap satu jam sekali selama kurang lebih 10 jam atau hingga mencapai bobot tetap.

  Hasil yang diperoleh menunjukkan sebanyak 400 gram serbuk kering kulit P.

  

americana menghasilkan 10 cawan ekstrak kental. Rata-rata rendemen dari

  masing-masing cawan adalah 4,48 gram ekstrak kental. Pada pembuatan 400 gram serbuk kering kulit P. americana menghasilkan 44,8 gram ekstrak kental, dengan rendemen 11,20%.

D. Uji Pendahuluan

  1. Penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida

  Senyawa yang digunakan sebagai hepatotoksin pada penelitian ini adalah karbon tetraklorida. Tujuan dari penentuan dosis hepatotoksik karbon tetraklorida adalah untuk menentukan dosis karbon tetraklorida yang dapat mengakibatkan kerusakan hati yang ditunjukkan dengan peningkatan aktivitas ALT dan AST pada tikus jantan galur Wistar.

  Pemejanan karbon tetraklorida dapat menyebabkan steatosis (perlemakan) pada hati yang ditandai dengan peningkatan aktivitas ALT dan AST sebanyak tiga atau empat kali dari normal (Pachos dan Paletas, 2009). Dosis hepatotoksin yang digunakan dalam penelitian ini mengacu pada penelitian yang dilakukan oleh Janakat dan Merie (2002), yaitu 2mL/kgBB dalam olive oil dengan perbandingan 1:1 secara intraperitonial. Pemberian secara intraperitonial bertujuan agar hepatotoksin karbon tetraklorida dapat bereaksi lebih cepat dibandingkan dengan pemberian oral.

  2. Penentuan waktu pencuplikan darah tikus jantan galur Wistar

  Penentuan waktu pencuplikan darah dilakukan untuk mengetahui waktu dimana karbon tetraklorida dosis 2mL/kgBB mampu memberikan efek hepatotoksik maksimal yang ditandai dengan peningkatan ALT dan AST tertinggi pada waktu tertentu. Senyawa hepatotoksin dosis 2mL/kgBB diberikan pada tikus jantan dan dilakukan pencuplikan darah pada vena orbitalis hewan uji pada jam ke 0, 24, dan 48 jam. Hasil uji berupa aktivitas ALT yang tertera pada Tabel III dan Gambar 4.

  

Tabel III. Rata-rata aktivitas ALT tikus setelah pemberian karbon tetraklorida

  dosis 2mL/kgBB pada rentang waktu 0, 24, 48 jam Selang Waktu (jam) Rata-rata aktivitas serum ALT ± SE (U/L)

  72,3 ± 5,8 24 217,3 ± 2,7 48 90,3 ± 3,7

  Keterangan: SE=Standar Error

  

Gambar 4. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT setelah pemberian

karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada rentang waktu 0, 24, dan 48 jam.

  Berdasarkan aktivitas serum ALT yang telah dianalisis dengan menggunakan uji Kolmogorov Smirnov menunjukkan pada jam ke 0, 48 dengan nilai signifikansi 0,067 (>0,05). Hal itu menyatakan bahwa aktivitas serum ALT pada jam ke 48 sudah kembali normal karena mekanisme fisiologi hati yang dapat menggantikan sel-sel hati yang rusak. Aktivitas serum ALT pada jam ke 24 (217,3 ± 2,7) mengalami peningkatan sebesar 3 kali dibandingkan dengan jam ke 0. Pada hasil uji statistik juga menunjukkan bahwa terdapat peningkatan yang signifikan dan berbeda bermakna dibandingkan dengan jam ke 0 dan 48 dengan nilai signifikansi 0,000 (<0,05). Hal ini menunjukkan bahwa pemberian karbon tetraklorida pada jam ke 24 terbukti menyebabkan kerusakan hati paling maksimal. Hasil analisis dari uji statistik aktivitas ALT pada waktu pencuplikan 0, 24, 48 jam dapat dilihat pada tabel IV.

  

Tabel IV. Perbedaan peningkatan aktivitas serum ALT setelah pemberian karbon

  tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada rentang waktu 0, 24, dan 48 jam Jam 0 Jam 24 Jam 48

  Jam 0 BB BTB Jam 24 BB BB

  Jam48 BTB BB Keterangan : BB=Berbeda Bermakna; BTB= Berbeda Tidak Bermakna

  Berdasarkan data tersebut (Tabel IV), terlihat bahwa efek hepatotoksik yang dimiliki karbon tetraklorida dengan dosis 2mL/kgBB menunjukkan efek maksimal pada jam ke 24. Hasil orientasi ini selanjutnya digunakan peneliti sebagai acuan dalam penentuan waktu pencuplikan darah hewan uji setelah

E. Efek Hepatoprotektif Jangka Panjang Ekstrak Etanol Kulit P.

  americana terhadap Tikus Jantan

  Penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui efek hepatoprotektif jangka panjang ekstrak etanol kulit P. americana pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida. Pada penelitian ini terdapat kelompok perlakuan yang diberikan ekstrak etanol P. americana dengan 3 peringkat dosis yaitu dosis 0,35; 0,70; dan 1,40 g/kgBB secara per oral selama enam hatri berturut-turut pada jam yang sama. Pada hari ke tujuh tikus dipejankan dengan karbon tetraklorida 2 g/kgBB secara intraperitonial dan diambil darahnya setelah 24 jam pemberian karbon tetraklorida untuk dilakukan pengukuran aktivitas serum ALT dan AST. Hasil data ALT dan AST pada tiap kontrol dan perlakuan tertera dalam bentuk rata-rata ± SE dalam Tabel V dan Gambar 5.

  

Tabel V. Pengaruh perlakuan ekstrak etanol kulit P. americana dilihat dari rata-

  rata ± SE aktivitas serum ALT dan AST Purata aktivitas Purata Aktivitas

  Kelompok serum ALT ± SE serum AST ± SE (U/l) (U/l)

  Kontrol hepatotoksin karbon 246,8 ± 10,2 762,2 ± 43,1 tetraklorida 2mL/kgBB

  Kontrol negatif olive oil 81,6 ± 3,0 127,8 ± 7,3

  2mL/kgBB Kontrol ekstrak etanol kulit

  168,9 ± 12,0 132,6 ± 5,5

  P. americana 1,4 g/kgBB

  EPA 0,35 g/kgBB + karbon 119,1 ± 10,5 256,1 ± 66,8 tetraklorida 2mL/kgBB

  EPA 0,7 g/kgBB + karbon 78,4 ± 6,0 163,3 ± 39,0 tetraklorida 2mL/kgBB

  EPA 1,4 g/kgBB + karbon 99,0 ± 4,1 145,2 ± 12,2 tetraklorida 2mL/kgBB

  

Gambar 5. Diagram batang aktivitas serum ALT tikus jantan galur Wistar pada

  perlakuan jangka panjang ekstrak etanol kulit P. americana Hasil analisis statistik data serum ALT dan AST keduanya menunjukkan bahwa distribusi normal sehingga bisa dilanjutkan dengan analisis variansi saru arah (ANOVA). Analisis menunjukkan nilai signifikansi 0,000 (< 0,005) menunjukkan bahwa terdapat perbedaan bermakna diantara kelompok. Perbedaan tiap kelompok dilihat dengan menggunakan uji Scheffe, sehingga hasil analisis uji Scheffe yang didapat dapat dilihat pada Tabel VI dan Tabel VII.

  

Tabel VI. Hasil analisis statistik uji Post Hoc Mann Whitney dari kebermaknaan

  aktivitas serum ALT antar kelompok Kontrol EPA

  Kontrol Kontrol EPA 0,7 EPA 1,4 hepatoto 0,35 negatif Ekstrak g/kgBB g/kgBB ksin g/kgBB

  Kelompok olive oil (EPA + CCl

  4 + CCl

  4 CCl

  4

  2 + CCl

  4

  2mL/kg 1,4g/kgB 2mL/kg 2mL/kg mL/kgB 2mL/kg BB

  B) BB BB B BB

  Kontrol hepatotoks BB BB BB BB BB in CCl

  4

  2 mL/kgBB Kontrol negatif

BB BB BB BTB BB

  olive oil

  2 mL/kgBB Kontrol

  Ekstrak

BB BB BB BB BB

  (EPA 1,4 g/kgBB) EPA 0,35 g/kgBB +

BB BB BB BB BTB

  CCl

  4

  2 mL/kgBB EPA 0,7 g/kgBB +

BB BTB BB BB BB

  CCl

  4

  2 mL/kgBB EPA 1,4 g/kgBB +

BB BB BB BTB BB

  CCl

  2

  4

  mL/kgBB Keterangan : BB=Berbeda Bermakna; BTB= Berbeda Tidak Bermakna; EPA = Ekstrak Etanol Kulit P. americana

  

Tabel VII. Hasil analisis statistik uji Post Hoc Mann Whitney dari kebermaknaan

  aktivitas serum AST antar kelompok Kontrol EPA

  Kontrol Kontrol EPA 0,7 EPA 1,4 hepatoto 0,35 negatif Ekstrak g/kgBB g/kgBB ksin g/kgBB

  Kelompok olive oil (EPA + CCl

  4 + CCl

  4 CCl

  4

  2 + CCl

  4

  2mL/kg 1,4g/kg 2mL/kg 2mL/kg mL/kgB 2mL/kg

BB BB) BB BB

  B BB Kontrol hepatotoks

  BB BB BB BB BB in CCl

  4

  2 mL/kgBB Kontrol negatif

BB BTB BTB BTB BTB

  olive oil

  2 mL/kgBB Kontrol Ekstrak

BB BTB BTB BTB BTB

  (EPA 1,4 g/kgBB) EPA 0,35 g/kgBB +

BB BTB BTB BTB BTB

  CCl

  2

  4

  mL/kgBB EPA 0,7 g/kgBB +

BB BTB BTB BTB BTB

  CCl

  4

  2 mL/kgBB EPA 1,4 g/kgBB +

BB BTB BTB BTB BTB

  CCl

  2

  4

  mL/kgBB Keterangan : BB=Berbeda Bermakna; BTB= Berbeda Tidak Bermakna; EPA =

  

Gambar 6. Diagram batang aktivitas serum AST tikus jantan galur Wistar pada

  perlakuan jangka panjang ekstrak etanol kulit P. americana 1.

   Kontrol negatif olive oil 2 mL/kgBB

  Penggunaan kontrol negatif (Kelompok II) bertujuan untuk melihat apakah pelarut dari hepatotoksin karbon tetraklorida dapat mempengaruhi peningkatan aktivitas serum ALT dan AST dan memastikan tidak berpotensi untuk menimbulkan efek toksik. Kontrol negatif yang digunakan adalah olive oil dosis 2 mL/kgBB dengan pemberian secara intraperitonial.

  Penelitian Febrianti (2013) menunjukkan bahwa terdapat perbedaan tidak bermakna antara aktivitas serum ALT dan AST setelah diberikan olive oil 2ml/kgBB pada jam ke 0 dan 24. Hal ini menunjukkan bahwa olive oil sebagai kontrol pelarut hepatotoksin dapat dikatakan tidak mempengaruhi peningkatan aktivitas serum ALT dan AST sehingga nantinya akan dipakai sebagai dasar nilai aktivitas serum ALT dan AST normal dalam penelitian ini.

2. Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2mL/kgBB

  Penggunaan kontrol hepatotoksin (Kelompok I) bertujuan untuk melihat pengaruh pemberian karbon tetraklorida dengan dosis 2 mL/kgBB terhadap kerusakan hati yang dilihat dari peningkatan aktivitas serum ALT dan AST pada jam ke 24. Aktivitas serum ALT kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida sebesar 246,8 ± 10,2 U/l dengan peningkatan 3 kali dibandingkan dengan kontrol negatif

  

olive oil (81,6 ± 3,0U/l). Aktivitas serum AST kontrol hepatotoksin karbon

  tetraklorida sebesar 762,2 ± 43,1 U/l dengan peningkatan 6 kali dibandingkan dengan kontrol negatif olive oil.

  Peningkatan aktivitas serum ALT dan AST merupakan parameter terjadinya kerusakan hati yang mengarah pada perlemakan hati. Menurut Thapa dan Walia (2007) aktivitas serum ALT dan AST meningkat mencapai 3 kali lipat terhadap nilai normal sudah menandakan adanya kelainan atau kerusakan pada hati. Data analisis dengan uji statistik menunjukkan bahwa peningkatan aktivitas serum ALT dan AST kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida berbeda bermakna dengan kontrol negatif olive oil dengan p=0,009. Kenaikan aktivitas serum ALT dan AST pada hasil pengukuran menunjukkan bahwa pemejanan karbon tetraklorida dengan dosis 2 mL/kgBB menimbulkan efek hepatotoksik pada hewan uji.

3. Kontrol ekstrak etanol kulit P. americana

  Kontrol ekstrak etanol kulit P. americana (Kelompok III) bertujuan untuk melihat apakah pemberian ekstrak etanol kulit P. americana mempengaruhi aktivitas ALT dan AST pada hewan uji. Dosis ekstrak etanol kulit P. americana yang digunakan sebagai kontrol adalah 1,4 g/kgBB secara per oral, dosis tersebut merupakan dosis tertinggi dari beberapa peringkat dosis pada penelitian ini. Dosis tertinggi digunakan dengan tujuan dosis tersebut dapat mewakili dosis I dan dosis

  II, apabila pada dosis III tidak meningkatkan aktivitas serum ALT dan AST, maka dipastikan pemberian dosis I dan II tidak menyebabkan peningkatan aktivitas serum ALT dan AST.

  Aktivitas serum ALT kontrol ekstrak etanol kulit P. americana adalah 168,9 ± 12,04 U/l, sedangkan aktivitas serum ALT kontrol negatif olive oil 2 mL/kgBB adalah 81,6 ± 3,08 U/l. Apabila keduanya dibandingkan maka aktivitas serum ALT memperoleh hasil berbeda bermakna (p=0,009), hasil tersebut menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit P. americana dapat meningkatkan aktivitas serum ALT tetapi jika dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida menggunakan uji statistik memperoleh hasil berbeda bermakna pula dengan p=0,009, sehingga dapat dikatakan ekstrak etanol memang memiliki kemampuan untuk meningkatkan aktivitas serum ALT, namun kenaikan yang terjadi tidak setinggi kelompok kontrol CCl . Aktivitas serum AST juga dilakukan

  4

  pengukuran dan diperoleh hasil 132,6 ± 5,59 U/l, hasil uji statistik pada aktivitas serum AST dengan kontrol olive oil adalah berbeda tidak bermakna (p=0,463).

  Berdasarkan hasil yang diperoleh, maka dapat disimpulkan bahwa pemberian ekstrak etanol kulit P. americana dosis tertinggi dapat meningkatkan aktivitas serum ALT, namun tidak seperti kelompok kontrol CCl

  4 dan tidak meningkatkan aktivitas serum AST tikus jantan galur Wistar.

4. Kelompok perlakuan ekstrak etanol kulit P. americana jagka panjang dosis 0,35; 0,70; dan 1,40 g/kgBB pada hewan uji terinduksi CCl 4 dosis 2mL/kgBB Kelompok perlakuan diberikan praperlakuan ekstrak etanol kulit P.

  

americana dengan tujuan untuk melihat efek hepatoprotektif jangka panjang

  ekstrak etanol kulit P. americana pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida terhadap penurunan aktivitas serum ALT dan AST.

  Aktivitas serum ALT pada kelompok perlakuan IV ekstrak etanol kulit

  

P. americana dosis 0,35 g/kgBB sebesar 119,1 ± 10,5 U/l. Hasil uji statistik

  dibandingkan dengan kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB dan kontrol olive oil 2 mL/kgBB menunjukkan perbedaan bermakna (Tabel VI). Aktivitas serum AST kelompok perlakuan IV ekstrak etanol kulit P.

  

americana dosis 0,35 g/kgBB sebesar 256,1 ± 66,8 U/l, bila secara statistik

  dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB terdapat perbedaan bermakna tetapi dengan kontrol olive oil 2mL/kgBB memberikan perbedaan tidak bermakna (Tabel VII). Aktivitas serum AST tidak dapat menjadi patokan bahwa hati mengalami kerusakan karena sebagian besar otot rangka, jantung dan tersebar ke seluruh jaringan sehingga belum dapat digunakan sebagai patokan kerusakan hati. Berdasarkan hasil yang didapatkan dapat dikatakan bahwa ekstrak etanol kulit P. americana dosis 0,35 g/kgBB memiliki efek hepatoprotektif yaitu mampu melindungi sel hati, namun kerusakan yang terjadi akibat karbon tetraklorida belum bisa kembali seutuhnya seperti keadaan sel hati normal.

  Aktivitas serum ALT pada kelompok perlakuan V ekstrak etanol kulit P.

  

americana dosis 0,70 g/kgBB sebesar 78,4 ± 6,07 U/l. Hasil uji statistik kadar

  serum ALT perlakuan dosis 0,70 g/kgBB dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida diperoleh hasil terdapat perbedaan yang bermakna (p=0,009), kemudian jika dibandingkan dengan kontrol olive oil memberikan hasil berbeda tidak bermakna (p=0,754) (Tabel VI). Hasil pengukuran aktivitas serum AST yang diperoleh adalah 163,3 ± 39,0 U/l. Hasil uji statistik kadar AST perlakuan dosis 0,70 g/kgBB dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida diperoleh hasil berbeda bermakna dengan p= 0,009, kemudian dibandingkan dengan kontrol olive oil memberikan hasil berbeda tidak bermakna dengan p=0,917 (Tabel VII). Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit P. americana dosis 0,70 g/kgBB memiliki kemampuan hepatoprotektif (menurunkan aktivitas ALT dan AST) pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida dan sudah dapat kembali seperti keadaan normal.

  Aktivitas serum ALT pada kelompok VI ekstrak etanol kulit P.

  

americana dosis 1,40 g/kgBB sebesar 99,0 ± 4,19 U/l, jika dibandingkan dengan mendapatkan hasil berbeda bermakana dengan p=0,009 (Tabel VI). Hasil pengukuran aktivitas serum AST adalah 145,2 ± 12,2 U/l, jika dibandingkan dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida diperoleh hasil berbeda bermakna dengan p=0,009, kemudian dibandingkan dengan kontrol olive oil memberikan hasil berbeda tidak bermakna dengan p=0,347 (Tabel VII). Hal ini menunjukkan ekstrak etanol kulit P. americana dosis 1,40 g.kgBB memiliki efek hepatoprotektif, namun belum bisa kembali seperti keadaan normal.

  Analisis statistik aktivitas serum ALT juga dilakukan antar kelompok perlakuan IV, V, dan VI. Kelompok IV (ekstrak etanol kulit dosis 0,35 g/kgBB) terhadap kelompok V (ekstrak etanol kulit dosis 0,70 g/kgBB) menunjukkan perbedaan bermakna, sedangkan dengan kelompok VI (ekstrak etanol kulit dosis 1,40 g/kgBB) menunjukkan perbedaan tidak bermakna. Berdasarkan hasil diatas menunjukkan bahwa dosis efektif hepatoprotektif pada tikus terinduksi karbon tetraklorida adalah dosis 0,70 g/kgBB (kelompok perlakuan V).

  

Tabel VIII. Nilai persen efek hepatoprotektif pada ketiga kelompok peringkat

dosis perlakuan ekstrak etanol kulit P.amerivana Mill.

  Kelompok perlakuan Persen (%) hepatoprotektif EPA 0,35 g/kgBB 77,3 % EPA 0,70 g/kgBB 101,9 % EPA 1,40 g/kgBB 89,4 %

  Nilai persen hepatoprotektif yang diperoleh dari ketiga kelompok peringkat dosis berturut-turut sebesar 77,3; 101,9; 89,4 % (Tabel VIII).

F. Rangkuman Pembahasan

  Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui efek hepatoprotektif ekstrak etanol kulit P. americana pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida. Dalam penelitian ini digunakan tiga peringkat dosis 0,35;0,70;1,40 g/kgBB untuk melihat kemampuan hepatoprotektif dari aktivitas serum ALT dan AST pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida. Pada penelitian ini tidak ada kekerabatan dosis dengan respon yang muncul, ditunjukkan dengan semakin besar dosis pra-perlakuan ekstrak etanol kulit P. americana yang diberikan tidak diikuti dengan semakin besar efek hepatoprotektif. Hasil purata ± SE untuk aktivitas serum ALT dari dosis rendah ke tinggi yaitu sebesar 119,1 ± 10,5; 78,4 ± 6,0; 99,0 ± 4,1 U/l, sedangkan untuk hasil purata ± SE aktivitas serum AST adalah 256,1 ± 66,8; 163,3 ± 39,0; 145,2 ± 12,2 U/l. Hasil perolehan tersebut menjawab permasalahan pertama dalam penelitian ini yaitu pemberian ekstrak etanol kulit P. americana mempunyai efek hepatoprotektif berupa penurunan aktivitas serum ALT dan AST pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida.

  Berdasarkan uji statistik antara kontrol olive oil dengan kontrol ekstrak etanol kulit P. americana pada aktivitas serum ALT menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang bermakna (p=0,009) sedangkan pada kadar AST terdapat perbedan yang tidak bermakna (p=0,463). Dari hasil statistik menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit P. americana meningkatkan aktivitas serum ALT tetapi masih dalam batasan normal dan tidak meningkatkan aktivitas serum AST. Hal ini berarti bahwa peningkatan aktivitas serum ALT dan AST pada tikus jantan disebabkan oleh senyawa model karbon tetraklorida saja.

  Dosis efektif ekstrak etanol kulit P. americana adalah pada peringkat dosis kedua yaitu 0,70 g/kgBB. Hal ini didasarkan pada uji statistik yang dilakukan ketika dibandingkan dengan kontrol olive oil pada aktivitas serum ALT dan AST memberikan hasil berbeda tidak bermakna (p=0,754; p=0,917), dan jika dibandingkan dengan kontrol karbon tetraklorida pada aktivitas serum ALT dan AST memberikan hasil berbeda bermakna (p=0,009). Dosis ekstrak etanol kulit P.

  

americana 0,70 g/kgBB yang paling baik hasilnya karena selain %

  hepatoprotektif nya paling besar, pada dosis 0,30 g/kgBB terdapat perbedaan yang bermakna dengan kontrol olive oil sehingga belum sepenuhnya dapat kembali ke sel hati normal, sedangkan walaupun dosis 1,40 g/kgBB memberikan hasil sama dengan dosis 0,70 g/kgBB yaitu berbeda tidak bermakna dengan olive oil tetapi dosis 0,70 g/kgBB tetap menjadi dosis efektif karena kemampuan hepatoprotektifnya sangat besar dibandingkan dua dosis lainnya.

  Karbon tetraklorida bersifat toksik terjadi akibat karbon tetraklorida yang dimetabolisme di retikulum endoplasma hati oleh sitokrom P450 2E1 ) yang merupakan metabolit

  (CYP2E1) menjadi radikal bebas triklorometil (●CCl

  3

  reaktif dan akan membentuk radikal triklorometilperoxi jika bereaksi dengan oksigen yang dapat menyerang membran lipid retikulum endoplasma dengan kecepatan melebihi dari triklorometil dan menyebabkan steatosis pada sel hati. Karbon tetraklorida hanyalah salah satu dari hepatotoksin yang ada, maka dari itu perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai penggunaan senyawa hepatotoksin lain misalnya parasetamol.

  Kandungan pada kulit P. americana diduga merupakan senyawa fenolik sebagai antioksidan yang dapat tersari oleh pelarut polar yaitu etanol.

  Kemungkinan mekanisme kerjanya adalah dengan melindungi sel hati dalam hal penangkapan radikal bebas triklorometil dan triklorometilperoxi dalam tubuh yang ditunjukkan dengan penurunan aktivitas serum ALT dan AST. Berdasarkan data tersebut, peneliti menyarankan agar dapat dilakukan penelitian lanjutan terkait dengan penentuan jumlah senyawa fenolik dan antioksidan yang ada pada kulit P. americana.

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan Berdasarkan hasil yang diperoleh dan analisis statistik yang telah

  dilakukan, maka dapat disimpulkan :

  1. Pemberian ekstrak etanol kulit P. americana dapat menurunkan aktivitas serum ALT dan AST sehingga memiliki efek hepatoprotektif pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.

  2. Dosis efektif ekstrak etanol kulit P.americana yang memiliki efek hepatoprotektif pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida adalah 0,70 g/kgBB.

B. Saran

  Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai :

  1. Uji efek hepatoprotektif kulit P.americana menggunakan senyawa hepatotoksin lain misalnya parasetamol.

  2. Penentuan jumlah senyawa fenolik dan antioksidan pada kulit P.

  americana .

DAFTAR PUSTAKA

  Agoes, G., 2009, Seri Farmasi Industri-2 : Teknologi Bahan Alam, ITB, Bandung, pp. 31, 43. Agrilink, 2001, Suplement to Avocado Information Kit, Queensland Horticulture Institute, Departement of Primary Industry, Queensland. Arukwe, U., Amadi, B.,Duru, M., Agomuo,E., Adindu, E.,Odika, P., Lele, K.,

  Egejuru, L., dan Anundike, J., 2012, Chemical Composition of Persea americana Leaf, Fruit and Seed, IJRRAS, 11 (2), 345. Baradero, M., Dayrit, M.W., Siswadi, Y., 2005, Klien Gangnguan Hati : Seri

  Asuhan Keperawatan , Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, hal. 1, 2, 5-10.

  Chitturi, S., Gopichand, V., Vuppu, T, 2013, Studies on protein content, protease activity, antioxidants potential, melanin composition, glucosinolate and pectin constitution with brief statistical analysis in some medicinally significant fruit peels, Der Pharmacia Lettre., 5(1), 13-23.

  Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995 a, Material Medika Indonesia , Jilid VI, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, pp.

46. Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan Republik Indonesia, 1995 b,

  Sediaan Galenik , Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, pp.25.

  DiPiro, J. T., Talbert, R. L., Yee, G.I., Matzke, G.R., Wells, B.G., and Posey, L.M., 2005, Pharmacotherapy a Pathophysioogic Approach, edisi I, McGraw Hill Companies, United States of America, pp. 657,693.

  Edem., Akpanabiatu, M. I., 2006, Effects of Palm Oil Containing Diets on Enzyme Activities of Rats, Pakistan J Nutr., 5(4), 301-305. Elvin-Lewis, Z., 2001, Should We Be Concerned About Herbal Remedies, J Ethnopharmacol , 75 (2), 141-164. Fajar, J.P., 2013, Uji Hepatoprotektif Fraksi Etil Asetat Daun Kesum (Polygonum

  minus Huds.) Sebagai Ko-Kemoterapi Pada Tikus Putih Jantan Galur

  Wistar yang Diinduksi Sisplatin, Skripsi, Universitas Tanjungpura, Pontianak.

  Tikus Jantan Terinduksi Karbon Tetraklorida, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Forrest, E., 2006, Hepatic Disorders, Edisi Kedua, Pharmaceutical Press, London, pp. 193, 201-202. Ganong, W., dan McPhee, S.J., 2011, Patofisiologi Penyakit : Pengantar Menuju Kedokteran Klinis , Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 419-462. Gene, D., 1999, Acute Carbon Tethrachloride Feeding Induces Damage of Large

  But Not Small Cholangiocytes From BDL Rat Liver, Am J Physiol, 276(5), 1289-1301. Greguz, E., dan Klaaseen, C.D., 2001, Mechanism of Toxicity, in Klaaseen, C.D.,

  Cassarett dan Doull’s Toxicology: The Basic Science Poisons, Edisi 6, Mc Graw Hill, New York, pp.57-64. Hartono, Nurwanti, I., Ikasari, F., Wiryanto., 2005, Pengaruh Ekstrak Rimpang

  Kunyit (Curcuma domestica Val.) Terhadap Peningkatan Kadar SGOT dan SGPT Tikus Putih (Rattus norvegicus) Akibat Pemberian Asetaminofen, Jurnal Biofarmasi, 3 (2), 58, 59. Hodgson, E., 2010, A Textbook of Modern Toxicology, John Wiley & Sons Inc., Canada, pp.279-286.

  Janakat, S., and Al-Merie, H., 2002, Optimization of The Dose and Route of Injection, and Characterization of The Time Course of Carbon Tetrachloride- Induced Hepatotoxicity In The Rat, J. Pharm. Tox. Methods, 48, 41-44.

  Javier, G.R.C., David, M., Maria, J.A., Petri, K., and Mario, E., 2011, Avocado (Persea americana Mill.) Phenolics, In Vitro Antioxidant and Antimicrobial Activities, and Inhibition of Lipid and Protein Oxidation in Porcine Patties, J.Agric. Food Chem., 59, 5625-5635.

  Kate, I.E., Lucky,O.O., 2009, Biochemical Evaluation of The Tradomedicinal Uses of The Seeds of Persea Americana. Mill., (Family : Lauraceae),

  ., 4(2), 143

  World Journal of Medicinal Science –146.

  Klaassen, C. D., 2001,

  Casarett and Doull’s Toxicology: The Basic Science of Poison , Mc-Graw Hill, USA, pp. 887.

  Kurniawati, A.Y., Adrianto, E.E., Hendra, P., 2011, Uji Praklinik Ekstrak Metanol-Air Macaranga tanarius L Kajian : Aktivitas Antiinflamasi dan Hepatoprotektif, Kongres Ilmiah dan Rapat Kerja Nasional IAI 2011, IAI, Manado.

  Persea americana Mill Peels and Seed of Two Varieties,JAFC, 60,

  4613 −4619. Lim, T.K., 2012, Edible Medical and Non-Medical Plants, Books 3, Spingers Dordrecht Heidelbergh, London, New York, pp.78-100.

  Lu, F. C., 1995, Basic Toxicology Fundamental Target Organ, and Risk

  Assesment , Edisi 2, alih bahasa oleh : Nugroho Edi., hal. 85-97, UI Press,Jakarta.

  Martini, F. H., 2004, Fundamentals of Anatomy and Physiology, 8th edition, Pearson Education inc, San Fransisco, pp. 903-907. Maryani, H., 2003, Tanaman Obat Untuk Mengatasi Penyakit Pada Usia Lanjut, Agromedia Pustaka, Jakarta, 23, 24. Mary, B., Mary W. D., Yakobus, S., 2005, Seri Asuhan Keperawatan : Klien

Gangguan Hati , Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 43-47.

McPhee, S. J., Ganong, W. F., 2005, Patofisiologi Penyakit: Pengantar Menuju Kedokteran Klinis , Penerbit EGC, Jakarta, hal. 429-430. Murugesan, G.S., Sathiskumar, M., Jayabalan, R., Binupriya,A.R., Swaminantan,

  K., Yun, S.E., 2009, Hepatoprotective and Curative Properties of Kombucha Tea Against Carbon Tetrachloride-Induced Toxicity, J of

  Microbiology and Biotechnology , 19 (4), 397-402

  Navarro, V. J., Senior, J. R., 2006, Drug Related Hepatotoxicity, The New England Journal of Medicine , 354, 731. Nopitasari, K, A., 2013, Efek Hepatoprotektif Pemberian Jangka Panjang Ekstrak

  Etanol Biji Persea Americana Mill. Terhadap Aktivitas ALT dan AST Serum Pada Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida, Skripsi, 61, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

  Nurachman, E., dan Angriani, R., 2011, Dasar-dasar Anatomi dan Fisiologi, Salemba Medika, Jakarta, pp. 192-196. Pachos, P., Paletas, K., 2009, Non Alcoholic Fatty Liver Disease and Metabolic Syndrome, Hipokratia, 13 (1), 9-19. Percival, M., 1996, Antioxidants, Clinical Nutrition Insight, 1 (96), 1-4. Plaa, G.L., Charbonneau, M., 2001, Detection and Evaluation of Chemically

  th Induced Liver Injury in Hayes, Principles and Methods of Toxicology , 4 edition, Taylor and Francis, Philadelphia, pp. 1148-1175. Proseanet, 2012, Persea americana, http:/www.proseanet.org/prohati4/broeser.php?keywords=persea+americana &do_search=Search+Now&pcategory=0, diakses tanggal 30 Agustus 2014. Robbins., Cotran, 2005, Pathologic Basic of Disease, Edisi Ketujuh, Elsevier Inc., New York, USA, pp. 899-975.

  Sacher, R.A., McPherson, R.A., 2004, Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan Laboratorium , Edisi 11, EGC, Jakarta, pp. 368-370. Salah, W., Miller, N.J., Pangauga, T., Bolwell, G.P., Rice, E., and Evans, C.,

  1995, Polyphenolic Flavonols as Scavengers of Aquaous Phase Radicals as Chainbreaking Antioxidant, Arch. Biochem. Biorh, 2, 339-346. SiKerNas, 2010, Karbon Tetraklorida, Pusat Informasi Obat dan Makanan, Badan POM RI, Jakarta, hal. 1-3.

  Sofia, N.A., Nurdjanah, S., dan Ratnasari, N., 2009, Kadar Leptin pada Populasi non Diabetes dengan dan tanpa Non Alcoholic Fatty Liver, Berkala , 15 (1), 49-55.

  Kesehatan Klinik Sudjadi, 1986, Metode Pemisahan, UGM Press, Yogyakarta, pp.53.

  Thapa, B. R., Walia, A., 2007, Hati Function Test and Their Interpretation, Indian Journal of Pediatrics , 74 (7), 663-671. Timbrell, J. A. 2008, Principles of Biochemical Toxicology, 4th Edition, Informa Healthcare, New York, pp.308-311. USDA, 2014, Persea americana Mill., last modified, diakses tanggal 20

  Agustus 2014. Vinha, A,F., Moreira, J., Barreira, S., 2013, Physicochemical Parameters,

  Phytochemical Composition and Antioxidant Activity of the Algarvian Avocado (Persea americana Mill.), Journal of Agricultural Science, 5

  (12), 100-109. Walker, N. F., Kliner, M., Turner, D., Bhagani, S., Cropley, I., Hopkins, S.,

  Lipman, M., 2009, Hepatotoxicity and Antituberculosis Therapy: Time to Revise UK Gudiance?, Thorax, 64 (10), 918. Wibowo, D.S., dan Paryana, 2009, Anatomi Tubuh Manusia, Graha Ilmu, Indonesia, hal. 347,348,351, 352. WHO, 2008, Traditional Medicine Fact Sheet ,

  diakses tanggal 12 November 2014.

  Wijaya, L. S., 2013, Efek Antihepatotoksik Infusa Herba Mimosa pigra L.

  Terhadap Tikus jantan Terinduksi Karbon Tetraklorida, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Winarsi, H., 2007, Antioksidan Alami dan Radikal Bebas, Kanisius, Yogyakarta, hal. 77. Yasir, M., Das, S., and Kharya, M.D., 2010, The Phytochemical and

  Pharmacological Profile of Persea americana Mill , NCBI,

  http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3249906/, diakses pada 3 Maret 2013. Zimmerman, H.J., 1978, Hepatotoxicity, Appleton Century Crofts, New York, 95- 99. Zuhrotun, A., 2007, Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Biji Buah Alpukat

  (Persea americana Mill.) Bentuk Bulat, Skripsi, Universitas Padjajaran, Bandung.

  

LAMPIRAN

  

Lampiran 1. Foto bagian luar Persea americana Mill.

  

Lampiran 2. Foto bagian dalam Persea americana Mill.

  

Lampiran 4. Foto serbuk kulit P. americana

Lampiran 5. Foto ekstrak kental kulit P. americana

  

Lampiran 6. Foto larutan ekstrak etanol kulit P. americana

  

Lampiran 7. Surat pengesahan determinasi kulit P.americana

  

Lampiran 8. Surat hasil penetapan kadar air serbuk kulit P. americana

  

Lampiran 9. Surat ethical clearance

  

Lampiran 10. Hasil analisis statistik serum ALT pada uji pendahuluan

penentuan waktu pencuplikan darah

Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum jam_0 3 72.3333 10.06645

  63.00

  83.00 jam_24 3 2.1733E2 4.72582 212.00 221.00 jam_48 3 90.3333 6.50641

  84.00

  97.00 One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test jam_0 jam_24 jam_48 N

  3

  3

  3

  a

  Normal Parameters Mean 72.3333 2.1733E2 90.3333 Std. Deviation 1.00664E 4.72582 6.50641

  1 Most Extreme Differences Absolute .219 .304 .187 Positive .219 .219 .187 Negative -.189 -.304 -.181

  Kolmogorov-Smirnov Z .380 .527 .324 Asymp. Sig. (2-tailed) .999 .944 1.000 a. Test distribution is Normal.

  Oneway ANOVA (Homogenicity Test)

Descriptives

  Test of Homogeneity of Variances

  48 74.1705 106.4961

  84.00

  97.00 Total 9 1.266

  7E2 68.74773

  22.91 591

  73.8225 179.5108 63.00 221.00

  ALT Levene

  90.33

  Statistic df1 df2 Sig.

  .742

  2 6 .515

  ANOVA

  ALT Sum of

  Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 37478.000 2 18739.000 338.657 .000 Within Groups 332.000 6 55.333 Total 37810.000

  33 6.50641 3.756

  3

  ALT N Mean Std.

  3

  Deviation Std.

  Error 95% Confidence Interval for Mean

  Minim um Maxim um

  Lower Bound

  Upper Bound

  1

  72.33

  3

  33 10.06645 5.811

  87 47.3269 97.3398

  63.00

  83.00

  2 3 2.173

  3E2 4.72582 2.728

  45 205.5938 229.0729 212.0 221.00

  8

  Post Hoc Tests Multiple Comparisons

  ALT Scheffe

  (I) (J) Mean Std. Sig. 95% Confidence Interval perlakuan perlakuan Differen Error Lower Bound Upper Bound ce (I-J)

  • 1 (jam ke 2 (jam ke 6.0736 .000 -164.4797 -125.5203 0) 24) 145.00

  2

  • 000 3 (jam ke 6.0736 - .067 -37.4797 1.4797 48) 18.000

  2

  00 2 (jam ke 1 (jam ke 145.00 6.0736 .000 125.5203 164.4797

  • 24) 0) 000

  2 3 (jam ke 127.00 6.0736 .000 107.5203 146.4797

  • 48) 000

  2 3 (jam ke 1 (jam ke 18.000 6.0736 .067 -1.4797 37.4797 48) 0)

  00

  2

  • 2 (jam ke 6.0736 .000 -146.4797 -107.5203 24) 127.00

  2

  • 000 *. The mean difference is significant at the 0.05 level.

  Homogeneous Subsets ALT

  Scheffe Perlakuan N Subset for alpha = 0.05

  1

  2

  1 3 72.3333

  3 3 90.3333

  2 3 217.3333 Sig.

  .067 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

  

Lampiran 11. Hasil analisis statistik serum ALT kontrol hepatotoksin

(CCl4), kontrol negatif (olive oil), kontrol ekstrak etanol kulit P. americana,

perlakuan ekstrak etanol kulit P.americana (dosis 0,35; 0,70; 1,40 g/kgBB)

  

Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum Kontrol_CCl4 5 2.4684E2 22.87855 221.00 270.00 Kontrol_oliveoil 5 81.6000 6.87750

  70.00

  88.00 Kontrol_sediaan 5 1.6890E2 26.92759 126.40 192.90 Dosis_1 5 1.1910E2 23.68090 88.30 150.20 Dosis_2 5 78.4200 13.58076

  55.30

  89.20 Dosis_3 5 98.9600 9.37299 87.70 111.90

  

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

  Kontrol_ Kontrol_ Kontrol_ Dosis Dosis Dosis CCl4 oliveoil sediaan _1 _2 _3

  N

  5

  5

  5

  5

  5

  5 Normal Mean 246.840 81.6000 168.9000 1.191

  78.42

  98.96

  a

  Parameters

  0E2

  00

  00 Differences Positive .241 .176 .186 .160 .214 .138 Negative -.239 -.323 -.269 -.200 -.332 -.116

  Kolmogorov-Smirnov Z .539 .723 .602 .447 .742 .308 Asymp. Sig. (2-tailed) .934 .673 .861 .988 .641 1.000 a. Test distribution is Normal.

  Descriptives

  sgpt N Mea Std. Std. 95% Confidence Mini Maxi n Deviatio Error Interval for Mean mum mum n

  Lower Upper Bound Bound kontrol

  5 2.46 22.8785 10.23 218.432 275.247 221.0 270.0 ccl4

  84E2 5 160

  5

  5 kontrol 5 81.6 6.87750 3.075 73.0605 90.1395

  70.00

  88.00 olive oil 000 71 kontrol

  5 1.68 26.9275 12.04 135.465 202.335 126.4 192.9 sediaan

  90E2 9 238 dosis 1

  5 1.19 23.6809 10.59 89.6963 148.503 88.30 150.2

  10E2 042

  7 dosis 2 5 78.4 13.5807 6.073 61.5573 95.2827

  55.30

  89.20 200

  6

  50 dosis 3 5 98.9 9.37299 4.191 87.3219 110.598 87.70 111.9

  600

  73

  1 Total

  30 1.32 62.8647 11.47 108.829 155.777 55.30 270.0

  30E2 747

  3

  4 Test of Homogeneity of Variances sgpt Levene Statistic df1 df2 Sig.

  3.078

  5 24 .028

  ANOVA

  sgpt Sum of df Mean Square F Sig.

  Squares Between Groups 106091.558 5 21218.312 59.801 .000 Within Groups 8515.592 24 354.816 Total 114607.150

29 Post Hoc Tests

  

Multiple Comparisons

  sgpt Scheffe (I) (J) perlakuan Mean Std. Sig. 95% Confidence perlakua Difference Error Interval n (I-J)

  Lower Upper Bound Bound

  • kontrol kontrol olive 165.24000 11.9132 .000 122.115 208.36 ccl4 oil

  9

  7

  43

  • kontrol 77.94000 11.9132 .000 34.8157 121.06 sediaan

  9

  43

  • dosis 1 127.74000 11.9132 .000 84.6157 170.86

  9

  43

  • dosis 2 168.42000 11.9132 .000 125.295 211.54

  9

  7

  43

  • dosis 3 147.88000 11.9132 .000 104.755 191.00

  9

  7

  43

  • kontrol kontrol ccl4 -165.24000 - - 11.9132 .000 olive oil

  9 208.364 122.11

  3

  57

  • kontrol -87.30000 11.9132 - - .000
  • 11.9132

  • 34.815
    • 11.9132
    • 11.9132

  • 11.9132
  • 11.9132
  • 11.9132
    • 84.615

  • 11.9132
    • 49.80000
    • 6.6757 dosis 2 40.68000 11.9132

  • 11.9132
    • 125.29
    • 3.18000 11.9132

  • 11.9132
    • 90.48000
    • 47.355

  37.50000 11.9132

  9 .118 -5.6243 80.624

  3 kontrol sediaan

  9 .016 -

  92.9243

  9 .073 -2.4443 83.804

  3 dosis 3 20.14000 11.9132

  9 .721 -

  22.9843 63.264

  9 .000 -

  3 dosis 2 kontrol ccl4 -168.42000

  211.544

  3

  57 kontrol olive oil

  9 1.000 -

  46.3043 39.944

  3 kontrol sediaan

  9 .000 -

  133.604

  3

  7 kontrol olive oil

  170.864

  3

  3

  9 80.6243 dosis 2 3.18000 11.9132

  9 1.000 -

  39.9443 46.304

  3 dosis 3 -17.36000 11.9132

  9 .827 -

  60.4843 25.764

  3 kontrol sediaan kontrol ccl4 -77.94000

  9 .000 -

  121.064

  7 kontrol olive oil

  9 .000 -

  87.30000

  9 .000 44.1757 130.42

  43 dosis 1 49.80000

  9 .016 6.6757 92.924

  3 dosis 2 90.48000

  9 .000 47.3557 133.60

  43 dosis 3 69.94000

  9 .000 26.8157 113.06

  43 dosis 1 kontrol ccl4 -127.74000

  7 dosis 1 -40.68000 11.9132 .073 - 2.4443

  • dosis 3 kontrol ccl4
    • 147.88000 11.9132 .000 9 191.004 104.75

  3

  57 kontrol olive 17.36000 - 11.9132 .827 60.484 oil 9 25.7643

  3

  • kontrol -69.94000 11.9132 - - .000 sediaan

  9 113.064 26.815

  3

  7 dosis 1 -20.14000 11.9132 .721 - 22.984 9 63.2643

  3

  • dosis 2 20.54000 11.9132 .704 63.664 9 22.5843

  3

  • . The mean difference is significant at the 0.05 level.

  Homogeneous Subsets ALT

  Scheffe perlakuan N Subset for alpha = 0.05

  1

  2

  3 dosis 2 5 78.4200 kontrol olive oil 5 81.6000 dosis 3 5 98.9600 dosis 1 5 1.1910E2 kontrol sediaan 5 1.6890E2 kontrol ccl4 5 2.4684E2

  Sig. .073 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00

  Kruskal-Wallis Test

Ranks

  Perlakuan N Mean Rank sgpt kontrol ccl4

  5

  28.00 kontrol olive oil

  5

  6.00 kontrol sediaan

  5

  22.60 dosis 1

  5

  17.20 dosis 2

  5

  5.60 dosis 3

  5

  13.60 Total

  30

  

a,b

Test Statistics

  sgpt Chi-Square

  25.898 Df

  5 Asymp. Sig. .000

  a. Kruskal Wallis Test

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks sgpt kontrol ccl4

  5

  8.00

  40.00

  b Test Statistics

  sgpt Mann-Whitney U

  .000 Wilcoxon W

  15.000 Z

  • 2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks sgpt kontrol ccl4

  5

  8.00

  40.00 kontrol sediaan

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  sgpt Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks sgpt kontrol ccl4

  5

  8.00

  40.00 dosis 1

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  sgpt Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks sgpt kontrol ccl4

  5

  8.00

  40.00

  b Test Statistics

  sgpt Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  

a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks sgpt kontrol ccl4

  5

  8.00

  40.00 dosis 3

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  sgpt Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks sgpt kontrol olive oil

  5

  3.00

  15.00 kontrol sediaan

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  sgpt Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00

  Mann-Whitney Test Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks sgpt kontrol olive oil

  5

  3.00

  15.00 dosis 1

  5

  8.00

  40.00 Total

  10

  b Test Statistics

  sgpt Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks sgpt kontrol olive oil

  5

  5.80

  29.00 dosis 2

  5

  5.20

  26.00 Total

  10

  b Test Statistics

  sgpt Mann-Whitney U 11.000 Wilcoxon W 26.000 Z

  • .313 Asymp. Sig. (2-tailed) .754

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .841 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks sgpt kontrol olive oil

  5

  3.20

  16.00 dosis 3

  5

  7.80

  39.00 Total

  10

  b Test Statistics

  sgpt Mann-Whitney U 1.000 Wilcoxon W 16.000 Z -2.402 Asymp. Sig. (2-tailed) .016

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .016 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks sgpt kontrol sediaan

  5

  7.60

  38.00 dosis 1

  5

  3.40

  17.00 Total

  10

  b Test Statistics

  sgpt Mann-Whitney U 2.000 Wilcoxon W 17.000 Z -2.193 Asymp. Sig. (2-tailed) .028

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .032 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks Total

  10

  b Test Statistics

  sgpt Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks sgpt kontrol sediaan

  5

  8.00

  40.00 dosis 3

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  sgpt Mann-Whitney U .000 Wilcoxon W 15.000 Z -2.611 Asymp. Sig. (2-tailed) .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakua N Mean Rank Sum of Ranks n sgpt dosis 1

  5

  7.80

  39.00 dosis 2

  5

  3.20

  16.00 Total

  10

  b Test Statistics

  sgpt Mann-Whitney U 1.000 Wilcoxon W 16.000 Z -2.402 Asymp. Sig. (2-tailed) .016

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .016 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 perlakua N Mean Rank Sum of Ranks n sgpt dosis 1

  5

  7.00

  35.00 dosis 3

  5

  4.00

  20.00 Total

  10

  b Test Statistics

  sgpt Mann-Whitney U 5.000 Wilcoxon W 20.000 Z -1.567 Asymp. Sig. (2-tailed) .117

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .151 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum sgpt 30 1.3230E2 62.86470 55.30 270.00 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  

Ranks

  perlakua N Mean Rank Sum of Ranks n sgpt dosis 2

  5

  3.20

  16.00 dosis 3

  5

  7.80

  39.00 Total

  10

  b

Test Statistics Z

  • 2.402 Asymp. Sig. (2-tailed)

  .016 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .016

  a a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  

Lampiran 12. Hasil analisis statistik serum AST kontrol hepatotoksin (CCl4),

kontrol negatif (olive oil), kontrol ekstrak etanol kulit P. americana,

perlakuan ekstrak etanol kulit P.americana (dosis 0,35; 0,70; 1,40 g/kgBB)

  

Descriptive Statistics

N Mean Std.

  Deviation Minimum Maximum

  Kontrol_CCl4 5 7.6222E2 96.48493 666.00 867.60 Kontrol_oliveoil 5 1.2782E2 16.34494 106.10 147.00 Kontrol_sediaan 5 1.3260E2 12.50860 119.40 146.60 Dosis_1 5 2.5606E2 149.44134 105.00 439.10

  One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

  Kontrol Kontrol Kontrol_s Dosis Dosis Dosis _CCl4 _oliveoil ediaan _1 _2 _3

  N

  5

  5

  5

  5

  5

  5 Normal Mean 762.22 127.820 132.6000 2.560 1.632 1.452

  a

  Parameters

  00

  6E2

  6E2

  4E2 Std. Deviation 96.484 16.3449 12.50860 1.494 8.737 2.733

  93

  4

  41E2

  19E1

  21E1 Most Extreme Absolute .302 .229 .254 .204 .303 .197 Differences

  Positive .302 .156 .254 .196 .303 .175 Negative -.257 -.229 -.246 -.204 -.222 -.197

  Kolmogorov-Smirnov Z .676 .512 .569 .457 .678 .442 Asymp. Sig. (2-tailed) .751 .956 .903 .985 .747 .990 a. Test distribution is Normal.

  Descriptives

  AST N Mean Std. Std. 95% Confidence Mini Maxi

  Devi Error Interval for Mean mum mum ation Lower Upper

  Bound Bound kontrol 5 7.6222E2 96.48 43.1 642.418 882.021 666.0 867.6 ccl4 493 4937

  1

  9 kontrol 5 1.2782E2 16.34 7.30 107.525 148.114 106.1 147.0 olive oil 494 968

  1

  9 kontrol 5 1.3260E2 12.50 5.59 117.068 148.131 119.4 146.6 sediaan 860 401

  5

  5

  187 7389

  5 dosis 3 5 1.4524E2 27.33 12.2 111.302 179.177 113.0 176.9 209 2328

  7

  3 Total 30 2.6453E2 242.3 44.2 174.031 355.035 96.50 867.6 6806 5015

  6

  1 Test of Homogeneity of Variances AST Levene Statistic df1 df2 Sig.

  10.096

  5 24 .000

  ANOVA

  AST Sum of df Mean Square F Sig.

  Squares Between Groups 1541739.715 5 308347.943 45.742 .000 Within Groups 161786.252 24 6741.094 Total 1703525.967

  29 Post Hoc Tests

  Multiple Comparisons

  AST Scheffe (I) (J) Mean Std. Sig. 95% Confidence perlakuan perlakuan Difference Error Interval

  (I-J) Lower Upper Bound Bound kontrol ccl4 kontrol olive 634.40000 51.927 .000 446.4315 822.3685

  • oil

  23 kontrol 629.62000 51.927 .000 441.6515 817.5885

  • sediaan

  23

  • 51.927
  • 51.927
  • 51.927
    • 4.78000 51.927

  4.78000 51.927

  23 .371 -64.5085 311.4285 dosis 2 92.80000 51.927

  123.46000 51.927

  23 .330 -59.7285 316.2085 kontrol sediaan

  128.24000 51.927

  23 .000 -694.1285 -318.1915 kontrol olive oil

  506.16000

  23 1.000 -200.6085 175.3285 dosis 1 kontrol ccl4 -

  23 .996 -218.6285 157.3085 dosis 3 -12.64000 51.927

  23 .371 -311.4285 64.5085 dosis 2 -30.66000 51.927

  123.46000 51.927

  23 1.000 -183.1885 192.7485 dosis 1 -

  23 .000 -817.5885 -441.6515 kontrol olive oil

  629.62000

  23 1.000 -205.3885 170.5485 kontrol sediaan kontrol ccl4 -

  23 .993 -223.4085 152.5285 dosis 3 -17.42000 51.927

  23 .330 -316.2085 59.7285 dosis 2 -35.44000 51.927

  128.24000 51.927

  23 1.000 -192.7485 183.1885 dosis 1 -

  23 .000 -822.3685 -446.4315 kontrol sediaan

  634.40000

  23 .000 429.0115 804.9485 kontrol olive oil kontrol ccl4 -

  23 .000 410.9915 786.9285 dosis 3 616.98000

  dosis 2 598.96000

  • 51.927
  • 51.927

  23 .672 -95.1685 280.7685 dosis 3 110.82000 51.927 .490 -77.1485 298.7885

  • kontrol olive oil
  • 51.927

  23 1.000 -170.5485 205.3885 kontrol sediaan

  1

  Scheffe perlakuan N Subset for alpha = 0.05

  Homogeneous Subsets AST

  23 1.000 -205.9885 169.9485

  23 .490 -298.7885 77.1485 dosis 2 -18.02000 51.927

  110.82000 51.927

  23 1.000 -175.3285 200.6085 dosis 1 -

  12.64000 51.927

  17.42000 51.927

  23 .000 -804.9485 -429.0115 kontrol olive oil

  616.98000

  23 1.000 -169.9485 205.9885 dosis 3 kontrol ccl4 -

  23 .672 -280.7685 95.1685 dosis 3 18.02000 51.927

  23 .996 -157.3085 218.6285 dosis 1 -92.80000 51.927

  30.66000 51.927

  23 .993 -152.5285 223.4085 kontrol sediaan

  35.44000 51.927

  • . The mean difference is significant at the 0.05 level.

  2 kontrol olive oil 5 127.8200 kontrol sediaan 5 132.6000 dosis 3 5 145.2400 dosis 2 5 163.2600 dosis 1 5 256.0600 kontrol ccl4 5 762.2200

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 30 2.6453E2 242.36806

  96.50 867.60 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Kruskal-Wallis Test

  Ranks

  Perlakuan N Mean Rank AST kontrol ccl4

  5

  28.00 kontrol olive oil

  5

  10.40 kontrol sediaan

  5

  12.60 dosis 1

  5

  16.80 dosis 2

  5

  11.40 dosis 3

  5

  13.80 Total

  30

  a,b Test Statistics

  AST Chi-Square

  13.684 Df

  5 Asymp. Sig. .018

  a. Kruskal Wallis Test

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 30 2.6453E2 242.36806

  96.50 867.60 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00

  Mann-Whitney Test Ranks

  Perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol ccl4

  5

  8.00

  40.00 kontrol olive oil

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U

  .000 Wilcoxon W

  15.000 Z

  • 2.611 Asymp. Sig. (2-tailed)

  .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 30 2.6453E2 242.36806

  96.50 867.60 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol ccl4

  5

  8.00

  40.00 kontrol sediaan

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Z

  • 2.619 Asymp. Sig. (2-tailed)

  .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 30 2.6453E2 242.36806

  96.50 867.60 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol ccl4

  5

  8.00

  40.00 dosis 1

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  

b

Test Statistics

  AST Mann-Whitney U

  .000 Wilcoxon W

  15.000 Z

  • 2.611 Asymp. Sig. (2-tailed)

  .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 30 2.6453E2 242.36806

  96.50 867.60

  Mann-Whitney Test Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol ccl4

  5

  8.00

  40.00 dosis 2

  5

  3.00

  15.00 Total

  10

  

b

Test Statistics

  AST Mann-Whitney U

  .000 Wilcoxon W

  15.000 Z

  • 2.611 Asymp. Sig. (2-tailed)

  .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 30 2.6453E2 242.36806

  96.50 867.60 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol ccl4

  5

  8.00

  40.00

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U

  .000 Wilcoxon W

  15.000 Z

  • 2.611 Asymp. Sig. (2-tailed)

  .009

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .008 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 30 2.6453E2 242.36806

  96.50 867.60 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol olive oil

  5

  4.80

  24.00 kontrol sediaan

  5

  6.20

  31.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U

  9.000 Wilcoxon W

  24.000 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 30 2.6453E2 242.36806

  96.50 867.60 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol olive oil

  5

  4.60

  23.00 dosis 1

  5

  6.40

  32.00 Total

  10

  

b

Test Statistics

  AST Mann-Whitney U

  8.000 Wilcoxon W

  23.000 Z

  • .940 Asymp. Sig. (2-tailed)

  .347

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .421 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 30 2.6453E2 242.36806

  96.50 867.60 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00

  Mann-Whitney Test Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol olive oil

  5

  5.40

  27.00 dosis 2

  5

  5.60

  28.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U

  12.000 Wilcoxon W

  27.000 Z

  • .104 Asymp. Sig. (2-tailed)

  .917

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] 1.000 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 30 2.6453E2 242.36806

  96.50 867.60 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol olive oil

  5

  4.60

  23.00

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U 8.000 Wilcoxon W 23.000 Z -.940 Asymp. Sig. (2-tailed) .347

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .421 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 30 2.6453E2 242.36806

  96.50 867.60 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol sediaan

  5

  4.60

  23.00 dosis 1

  5

  6.40

  32.00 Total

  10

  

b

Test Statistics

  AST Mann-Whitney U

  8.000 Wilcoxon W

  23.000 Z

  • .943 Asymp. Sig. (2-tailed)

  .346

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .421 a. Not corrected for ties.

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 30 2.6453E2 242.36806

  96.50 867.60 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol sediaan

  5

  6.00

  30.00 dosis 2

  5

  5.00

  25.00 Total

  10

  

b

Test Statistics

  AST Mann-Whitney U

  10.000 Wilcoxon W

  25.000 Z

  • .524 Asymp. Sig. (2-tailed)

  .600

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .690 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 30 2.6453E2 242.36806

  96.50 867.60 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00

  Mann-Whitney Test Ranks

  perlakuan N Mean Rank Sum of Ranks AST kontrol sediaan

  5

  4.80

  24.00 dosis 3

  5

  6.20

  31.00 Total

  10

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U

  9.000 Wilcoxon W

  24.000 Z

  • .733 Asymp. Sig. (2-tailed)

  .463

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .548 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 30 2.6453E2 242.36806

  96.50 867.60 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakua N Mean Rank Sum of Ranks n AST dosis 1

  5

  6.60

  33.00

  b Test Statistics

  AST Mann-Whitney U

  7.000 Wilcoxon W

  22.000 Z

  • 1.149 Asymp. Sig. (2-tailed)

  .251

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] .310 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan N Mean Std. Deviation Minimum Maximum

  AST 30 2.6453E2 242.36806 96.50 867.60 perlakuan

  30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakua N Mean Rank Sum of Ranks n AST dosis 1

  5

  6.40

  32.00 dosis 3

  5

  4.60

  23.00 Total

  10

  

b

Test Statistics

  AST Mann-Whitney U

  8.000 Wilcoxon W

  23.000 Z

  • .940 Asymp. Sig. (2-tailed)

  .347

  a

  Descriptive Statistics

  N Mean Std. Deviation Minimum Maximum AST 30 2.6453E2 242.36806

  96.50 867.60 perlakuan 30 3.5000 1.73702

  1.00

  6.00 Mann-Whitney Test

  Ranks

  perlakua N Mean Rank Sum of Ranks n AST dosis 2

  5

  5.40

  27.00 dosis 3

  5

  5.60

  28.00 Total

  10

  

b

Test Statistics

  AST Mann-Whitney U

  12.000 Wilcoxon W

  27.000 Z

  • .104 Asymp. Sig. (2-tailed)

  .917

  a

  Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] 1.000 a. Not corrected for ties.

  b. Grouping Variable: perlakuan

  

Lampiran 13. Hasil rendemen ekstrak etanol kulit P. americana

Tabel IX. Hasil rendemen ekstak etanol kulit P. americana

  Ket (gram)

  C-1

  C- 2

  C- 3

  C- 4

  C- 5

  C- 6 C-7,8 C- 9.10 Cawan kosong

  58,8 48,9 36,6 52,6 59,0 56,7 65,0 65,7 Cawan+ ekstrak

  64,1 53,6 42,9 58,3 64,2 61,3 68,7 75,0 Rendem en

  5,3 4,7 6,3 5,7 5,2 4,6 3,7 9,3 Keterangan : C=cawan

  Rata-rata rendemen = =

  = 4,48 gram % rendemen ektrak kental = Hasil menunjukkan bahwa sebanyak 400 gram serbuk kering kulit P.

  

americana menghasilkan 10 cawan ekstrak kental. Rata-rata rendemen setiap

cawan 4,48 gram ekstrak kental. Pada pembuatan 400 gram serbuk kering kulit P. americana menghasilkan 44,8 gram ekstrak kental, dengan rendemen 11,20 %.

  Tabel X. Pengeringan ekstrak etanol kulit P. americana Berat cawan Jam ke

  2

  4

  6

  8

  10

  12 kosong (gram)

  48,9 58,5 54,9 54,1 53,8 53,7 53,6 53,6

  Berat

  36,6 ekstrak 51,0 45,1 43,7 43,2 43,0 42,9 42,9

  (gram)

  59,0 71,5 66,1 64,9 64,6 64,4 64,2 64,2

  

Lampiran 14. Perhitungan persen hepatoprotektif

  Perhitungan persen hepatoprotektif serum ALT :

  • Perlakuan dosis 0, 35 g/kgBB (p.o) + induksi karbon tetraklorida :
  • Perlakuan dosis 0, 70 g/kgBB (p.o) + induksi karbon tetraklorida :

  • Perlakuan dosis 1, 40 g/kgBB (p.o) + induksi karbon tetraklorida :

BIOGRAFI PENULIS

  Penulis skripsi dengan judul “Efek Hepatoprotektif Jangka Panjang Ekstrak Etanol Kulit Persea americana Mill.

  Terhadap Aktivitas ALT-AST Pada Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida dengan nama lengkap Bernadet

  Brigita Puspita Wardani, merupakan putri kedua dari pasangan Y. Windiyono S.H dan Anna Lucia Dian Ratna. Penulis lahir di Jakarta, tanggal 3 Mei 1994. Pendidikan formal yang telah ditempuh penulis yaitu TK Tarsisius I Jakarta (1997-1999), tingkat Sekolah Dasar di SD Tarsisius I Jakarta (1999-2005), tingkat Sekolah Menengah Pertama di SMP Tarsisius I Jakarta (2005-2008), tingkat Sekolah Menengah Atas di SMAN 2 Jakarta (2008-2011). Pada tahun 2011, penulis melanjutkan pendidikan sarjana di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Semasa menempuh pendidikan sarjana, penulis aktif dalam kegiatan kepanitiaan,seperti Journalistic Competition 2011 sebagai anggota seksi DDU, Kampanye Informasi Obat 2012 sebagai anggota seksi Dekorasi dan Dokumentasi, serta Inisiasi Sanata Dharma 2013 sebagai kordinator divisi medis, serta dalam kegiatan organisasi Paduan Suara Mahasiswa Cantus Firmus sebagai anggota sopran. Penulis pernah menjuarai lomba internasional dan meraih medali emas dalam “Bali International Choir Competition” dan pernah menjadi asisten praktikum Bentuk Sediaan Farmasi (2012) dan Farmakologi Toksikologi (2014).

Dokumen baru

Tags

Dokumen yang terkait

Efek hepatoprotektif jangka panjang dekok biji Persea americana Mill. terhadap aktivitas ALT-AST serum pada tikus terinduksi karbon tetraklorida.
0
3
127
Efek hepatoprotektif jangka panjang dekokta kulit buah persea americana Mill. terhadap aktivitas ALT-AST pada tikus jantan galur wistar terinduksi karbon tetraklorida.
0
2
8
Pengaruh pemberian jangka pendek ekstrak etanol kulit buah Persea americana Mill. terhadap kadar albumin pada tikus terinduksi karbon tetraklorida.
0
0
96
Efek hepatoprotektif pemberian jangka pendek ekstrak etanol kulit buah Persea americana Mill. terhadap aktivitas ALT-AST pada tikus terinduksi karbon tetraklorida.
0
0
112
Pengaruh pemberian jangka panjang ekstrak etanol kulit Persea americana Mill. terhadap kadar albumin pada hati tikus terinduksi karbon tetraklorida.
0
1
91
Efek hepatoprotektif pemberian infusa kulit Persea americana Mill. terhadap ALT-AST tikus terinduksi karbon tetraklorida.
0
2
125
Uji efek hepatoprotektif jangka pendek sediaan dekokta kulit Persea americana Mill. terhadap aktivitas alt-ast pada tikus terinduksi karbon tetraklorida.
0
1
8
Pengaruh pemberian jangka panjang infusa kulit Persea americana Mill. terhadap aktivitas alkali fosfatase pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida.
0
1
81
Uji efek hepatoprotektif jangka pendek sediaan dekokta kulit Persea americana Mill. terhadap aktivitas alt ast pada tikus terinduksi karbon tetraklorida
0
1
6
Pengaruh pemberian jangka panjang infusa kulit Persea americana Mill. terhadap aktivitas alkali fosfatase pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida
0
6
79
Efek hepatoprotektif pemberian infusa kulit Persea americana Mill. terhadap ALT AST tikus terinduksi karbon tetraklorida
0
0
123
Pengaruh pemberian jangka panjang ekstrak etanol kulit Persea americana Mill. terhadap kadar albumin pada hati tikus terinduksi karbon tetraklorida
0
1
89
Efek hepatoprotektif jangka pendek dekok biji persea americana mill. terhadap aktivitas ALT-AST pada tikus terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository
0
0
113
Efek hepatoprotektif jangka panjang ekstrak metanol-air biji persea americana mill. terhadap aktivitas alt-ast serum pada tikus jantan wistar terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository
0
0
153
Efek hepatoprotektif pemberian jangka panjang ekstrak etanol biji persea americana mill. terhadap aktivitas alt dan ast serum pada tikus terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository
0
0
115
Show more